¿Cuáles son los procedimientos operativos para las pruebas de ácido nucleico?
En la actualidad, la mayoría de las ciudades de China ofrecen pruebas de ácido nucleico. Entonces, ¿cuáles son los pasos para realizar las pruebas de ácido nucleico? Echemos un vistazo al proceso operativo de la prueba de ácido nucleico:
1. Recolectar secreciones
Primero, el personal médico limpiará la cavidad nasal o las amígdalas del sujeto con un hisopo de garganta para recolectar saliva. cosas de secreciones. En realidad, este proceso es bastante doloroso.
2. Conservar muestras.
Después de recolectar secreciones humanas, sumerja el hisopo de garganta en la solución conservante y apriete la tapa del tubo para recolectar la muestra.
3. Inspección de la muestra
Luego, coloque la muestra en una bolsa limpia y sellada, séllela y envíela a la parte correspondiente para su análisis.
4. Extracción de ácido nucleico
Los departamentos pertinentes enviarán muestras a los laboratorios designados para experimentos de extracción de ácido nucleico.
5. Detección de ácido nucleico por PCR fluorescente
Después de extraer el ácido nucleico, utilice PCR fluorescente para detectar si existe una reacción de amplificación, es decir, si es negativa o positiva.
6. Informe de la prueba de ácido nucleico
Finalmente, según los resultados de la reacción de PCR fluorescente de la prueba de ácido nucleico, puedo obtener el informe de la prueba de ácido nucleico y puedo verificar los resultados.
2. ¿Cuál es el principio de las pruebas de ácido nucleico?
El método más utilizado para detectar secuencias específicas del nuevo coronavirus es la PCR cuantitativa por fluorescencia (reacción en cadena de la polimerasa). Debido a que la plantilla para la reacción de PCR es solo ADN, el ácido nucleico (ARN) del nuevo coronavirus debe transcribirse de manera inversa a ADN antes de realizar la reacción de PCR. En el sistema de reacción de PCR, hay un par de cebadores específicos y una sonda Taqman. La sonda Taqman es una secuencia de oligonucleótidos específica. Los dos extremos de la sonda están marcados con un grupo fluorescente indicador y un grupo fluorescente de extinción, respectivamente. Cuando la sonda está completa, la señal fluorescente emitida por el grupo indicador es absorbida por el grupo de extinción. Si hay una secuencia objetivo en el sistema de reacción, la sonda se unirá a la plantilla durante la reacción de PCR y la ADN polimerasa utilizará la misma; actividad exonucleasa de la enzima A medida que la sonda se digiere a lo largo de la plantilla, el grupo indicador se separa del grupo desactivador y emite fluorescencia.
Cada vez que se amplifica una hebra de ADN se produce una molécula fluorescente. El instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia puede controlar que el número de ciclos (valor Ct) en el que la fluorescencia alcanza un umbral preestablecido esté relacionado con la concentración de ácido nucleico viral. Cuanto mayor es la concentración de ácido nucleico viral, menor es el valor de Ct. Los productos de diferentes fabricantes determinarán el valor de juicio positivo de este producto en función del rendimiento de sus productos.