¿Cómo mejora la cobertura LC-MS? ¿Es normal que la cobertura de las proteínas correspondientes en los datos y la base de datos de LC-MS sea inferior al 20% después del análisis del software? como mejorar
Tras un rápido desarrollo, en 1970, surgió la espectrometría de masas (caracterizada por la espectrometría de masas con separación de masas). Este método permite una mayor fragmentación de los iones precursores, lo que da como resultado procesos de fragmentación y estructuras moleculares, comúnmente conocidos como espectrometría de masas en tándem, espectrometría de masas bidimensional y espectrometría de masas secuencial.
Sabemos que la espectrometría de masas se basa en el análisis de sustancias y establece la ionización para lograr el propósito del análisis. Al medir los picos de iones, los iones se separan según la relación carga-masa y la intensidad. Después de la separación cromatográfica de la muestra vaporizada, los iones formados se ionizan bajo la acción combinada de un campo eléctrico y un campo magnético, y la proporción de las cargas espectrales registradas se organiza en orden según el tamaño y la cantidad del número másico. El eje vertical común de MS es la intensidad de la señal de los iones y el eje horizontal es la relación de masa nuclear de los iones. El ESI que utilizamos es la fuente de iones ESI y APCI comúnmente utilizada en cromatografía líquida-espectrometría de masas. ¿Qué es ESI? La ionización más suave que APCI tiene un grado menor de ionización y, aunque APCI tiene una amplia gama de aplicaciones, solo una pequeña parte puede resolver el problema sin la ayuda de las moléculas orgánicas ESI y APCI. Generalmente, ESI y APCI tienen una gama más amplia de aplicaciones que ESI y APCI.
ESI y APCI suelen producir fuentes de iones moleculares (M+H)+ o (MH)-, con ajuste de parámetros simple, fácil uso y alta sensibilidad. Las desventajas de la fuente APCI son la información estructural limitada, el fácil craqueo térmico de las muestras y la baja calidad del ruido inicial. Por lo general, ESI solo se refiere a picos de iones moleculares y sus mezclas. Puede medir directamente compuestos polares que son térmicamente inestables y pueden medirse. Las macromoléculas biológicas, como las proteínas y el ADN, se forman fácilmente, las propiedades de los iones con carga múltiple se pueden analizar como parte de la estructura del compuesto resultante y el voltaje de la fuente de iones (CID en la fuente) se puede controlar mediante ajuste.
Por supuesto, la espectrometría de masas orgánicas también tiene sus propias limitaciones. Es necesario controlar estrictamente los isómeros de la mayoría de las moléculas orgánicas, así como el poder de resolución de la espectrometría de masas en la estereoquímica; Las condiciones de funcionamiento son ligeramente deficientes y no pueden controlarse directamente mediante magnetismo nuclear, infrarrojos, etc. , el responsable debe completarlo; el efecto memoria de la fuente de iones de espectrometría de masas hace que la operación sea muy complicada, pero cuando se utiliza cromatografía de gases-espectrometría de masas para analizar productos naturales. Acerca de
El análisis LC/MS/MS también se utiliza para determinar el peso molecular en biotecnología [7]. Para una determinación de masa precisa, la proteína tiene un peso molecular de 65.438+00.000 o mayor. La tecnología de pulverización de iones es un análisis de rutina. El peso molecular del sulfato de metilo-hormona de crecimiento humano (MET-HGH) medido mediante pulverización de iones es 22256,32 ± 0,44 dr, y el peso molecular calculado es menor que el 22256,2 real. Determine el peso molecular de las proteínas mediante electroforesis en gel de poliacrilamida, centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa, etc. El tiempo de análisis es más corto, el consumo de muestra es menor y es rápido y preciso. Algunos investigadores utilizan LC/MS/MS para analizar la coordinación de las proteínas de unión de fármacos del ADN con iones metálicos [8].
La LC/MS/MS forense es una poderosa herramienta para la detección de drogas [9]. Sonoff confirmó la presencia de benzoilecgonina en la sangre del bebé recién nacido e identificó al bebé como sospechoso de drogadicto. La cocaína del cabello de Clauwean y sus metabolitos se detectaron mediante LC/MS/MS y LC/fluorescencia con resultados consistentes y aún se pudieron escanear en MS/MS en concentraciones muy bajas. Los orígenes y estándares de King Cocaine y su metabolito CID son profundos, vastos y exitosos, condicionan cambios y mecanismos de craqueo.
LC/MS/MS no se puede subestimar en las pruebas de alimentos.
Por ejemplo, análisis LC/MS/MS de cloranfenicol en miel, análisis de verde de malaquita de varios antibióticos en peces LC/MS/MS, tejido animal, determinación de estimulantes 19β-adrenérgicos en el método LC-MS/MS de Sudán, determinación de frutas y hortalizas, detección simultánea de 100 pesticidas y sus metabolitos, determinación de acrilamida en frituras. Artículos de inspección requeridos para el comercio internacional de nitrofuranos en alimentos de origen animal; tratamiento y prevención de enfermedades gastrointestinales tipo nitrofurazolidona en mamíferos como furazolidona, furanona, nitrofurazona, nitrofurantoína, Escherichia coli y salmonella. Se descubrió que la nitrofuracilina, la furazolidona y sus metabolitos eran cancerígenos [10].
En 1995, la Unión Europea prohibió el uso de nitrofuranos en animales destinados a la producción de alimentos. En 2002, mi país promulgó una prohibición del uso de medicamentos veterinarios [11]. Los nitrofuranos se metabolizan rápidamente y son sensibles a la luz, pero los compuestos y productos originales caen rápidamente por debajo del límite de detección en animales, pero los conjugados proteicos de sus metabolitos pueden permanecer en el cuerpo durante mucho tiempo [12, 13].
Etiquetado nacional de metabolitos de nitrofurano y etiquetado de residuos de fármacos nitrofuranos. Se utilizó el método de cromatografía líquida de alto rendimiento/espectrometría de masas en tándem de Peng Tao para determinar los metabolitos de furazolidona, furanona, nitrofuracilina y nitrofurantoína en la leche en polvo. Amplia investigación empírica [14, 15].
Con el desarrollo de la ciencia y la tecnología, la demanda de análisis de instrumentos in situ está aumentando. El contenido de impurezas en la industria farmacéutica es de 0,65438±0%, aumentando la selectividad y sensibilidad para detectar más compuestos, ¿mejorando? El análisis basado en tipos compuestos también es un desafío para nuestros analistas. La cromatografía líquida de alto rendimiento/espectrometría de masas en tándem y la cromatografía líquida tienen potentes capacidades de análisis de separación e identificación estructural y de espectrometría de masas sensibles. Pueden proporcionar información confiable y precisa sobre la estructura y el peso molecular, simplificar los procedimientos de detección y ahorrar tiempo de preparación y análisis de muestras. Como uno de los métodos de separación e identificación más importantes, desempeñan un papel cada vez más importante en el campo de la química analítica.