Concepto y desarrollo de CAR-T

La activación de células T mediada por CAR de primera generación se logra mediante el motivo de activación de tirosina o FceRIg en la cadena CD3z. Las cadenas CD3z pueden proporcionar señales para la activación de células T, lisis de células diana, regulación de la secreción de IL-2 y actividad antitumoral in vivo. Sin embargo, la actividad antitumoral de las células T transformadas con CAR de primera generación in vivo es limitada y la proliferación de células T se reduce, lo que en última instancia conduce a la apoptosis de las células T. La segunda generación de coches añade nuevas señales de estimulación a las células. Los experimentos muestran que esto amplifica la "señal 1" original del complejo TCR/CD3. Muchos estudios han demostrado que, en comparación con el CAR de primera generación, el CAR de segunda generación equipado con la "Señal 2" tiene la misma especificidad de antígeno, mayor proliferación de células T, secreción de citoquinas, secreción de proteínas antiapoptóticas y mayor muerte celular. La molécula estimulante * * * comúnmente utilizada es CD28, pero estudios posteriores utilizaron CD137 (4-1BB) en lugar de CD28. Además, también se ha propuesto la idea de utilizar el receptor de células NK CD244. Aunque diferentes CAR de segunda generación tienen buenos y malos resultados, diferentes investigadores han obtenido resultados diferentes en diferentes tumores in vivo e in vitro. Pero en comparación con el CAR de primera generación, este diseño puede aumentar el efecto de memoria de la lisis de las células tumorales y el efecto letal mediado por el CAR.

Con el fin de mejorar aún más el diseño de los automóviles, muchos grupos de investigación comenzaron a centrarse en el desarrollo de automóviles de tercera generación, que no sólo incluían "señal 1" y "señal 2", sino que también añadían * *Señales de estimulación. Existen algunas diferencias en los resultados de comparación de los automóviles de segunda generación y de tercera generación obtenidos por diferentes investigadores bajo diferentes objetivos y señales de estimulación. Algunos estudios han informado que las células T recombinantes que expresan CAR de tercera generación tienen mejoras significativas en la actividad antitumoral, el ciclo de supervivencia y la liberación de citocinas. Los resultados de la investigación de Wilkie et al. mostraron que no existe una diferencia significativa en la citotoxicidad antitumoral de las células T recombinantes CAR de segunda generación y CAR de tercera generación dirigidas a MUC1, aunque las células T que expresan CAR de tercera generación pueden secretar más IFN-. γ (Wilkie S, Picco G, Foster J, et al. Redireccionamiento de células T humanas a muc 1 asociado a tumores: evolución del receptor de antígeno quimérico. J Immunol 2008180: 4901–4909.). Vale la pena señalar que las diferencias anteriores son solo conclusiones extraídas de experimentos in vitro, y no se han informado comparaciones de automóviles de segunda y tercera generación in vivo. La diferencia entre las dos generaciones de CAR no solo puede provenir del dominio de transducción de señales, el dominio de unión a antígeno extracelular (scFv), el método de transfección de células T recombinantes (lentivirus vs retrovirus) y el método de reinfusión de células T recombinantes (intravenoso). reinfusión). Transfusión VS peritoneal VS tumor) pueden afectar el efecto antitumoral final de las células CAR-T. El proceso típico de tratamiento CAR-T se divide principalmente en los siguientes cinco pasos.

①Aislamiento: Aislar células T inmunes de pacientes con cáncer.

②Modificación: utilizando tecnología de ingeniería genética, se agrega a las células T un anticuerpo quimérico que puede reconocer células tumorales y activar células T para preparar células CAR-T.

③Expansión: En cultivo in vitro se expande un gran número de células CAR-T. Generalmente, un paciente requiere miles de millones o incluso miles de millones de células CAR-T (cuanto más grande es el cuerpo, más células se necesitan).

④Reinfusión: Infundir las células CAR-T expandidas nuevamente en el paciente.

⑤Monitoreo: Vigile de cerca al paciente, especialmente para controlar las reacciones violentas del cuerpo en los últimos días.

El tratamiento completo dura aproximadamente 3 semanas, de las cuales la "extracción-modificación-amplificación" de las células dura aproximadamente 2 semanas, lo que lleva mucho tiempo.