¿Qué es un reactivo de radioinmunoensayo y cuáles son sus propiedades únicas?
A menudo se utiliza en radioinmunoimagen. Utilizando la especificidad de la unión antígeno-anticuerpo, los anticuerpos marcados con isótopos se pueden concentrar específicamente en el antígeno correspondiente después de ser inyectados en el cuerpo humano. La ubicación, el alcance y las características del objeto a analizar se pueden escanear mediante fotografía gamma. Este método de examen que aplica principios inmunológicos a la localización morfológica se llama radioinmunoensayo.
El inmunoensayo por radiación supera las deficiencias de que la ecografía B y la resonancia magnética no pueden determinar el tipo de tumor, y el suero no puede determinar la ubicación del tumor. Tiene una gran sensibilidad y puede detectar lesiones ocultas o metastásicas, como tumores tan pequeños como de 1 a 2 cm de diámetro y ganglios linfáticos metastásicos.
Los anticuerpos monoclonales comúnmente utilizados incluyen: OC125, B72.4, CEA, COC 183-B2, etc. Los isótopos de uso común incluyen: yodo 131, yodo 123, isótopo 111, etc. Los anticuerpos marcados con tecnecio se utilizan ampliamente actualmente debido a su corta vida media, su bajo daño al cuerpo humano y su bajo precio. El kit B72-4 marcado con el isótopo 111 se ha utilizado clínicamente en el extranjero, y en China se está desarrollando un kit de anticuerpos monoclonales marcados con 99mTc para el cáncer de ovario.
Aplicación de radioinmunoensayo;
Agregar diferentes concentraciones de antígeno estándar (o muestra desconocida) a una cierta cantidad de tubos de ensayo, y agregar una cantidad igual de antígeno marcado radiactivamente a cada tubo de ensayo. y una cierta cantidad de anticuerpo, mantenga la temperatura a 4°C o 37°C, y después de equilibrar la reacción, elija un método apropiado para separar B y F, medir y liberar.
La intensidad radiactiva, la curva estándar se elabora a partir de la relación de intensidad radiactiva B/T y la cantidad de Ag. La cantidad de muestra desconocida se puede calcular a partir de la curva estándar.
Los anticuerpos son moléculas de inmunoglobulina que pueden unirse específicamente al antígeno o hapteno correspondiente. Se pueden obtener anticuerpos específicos mediante técnicas inmunológicas. El rango de sensibilidad de un anticuerpo está determinado por su especificidad y afinidad. Cuanto menor sea la dilución del anticuerpo utilizado en el ensayo y mayor la cantidad añadida, menor será la sensibilidad del ensayo y más amplio será el rango medible. Si se agrega una pequeña cantidad de anticuerpo, la sensibilidad del ensayo aumentará y el rango mensurable se reducirá. Generalmente, después de seleccionar la dosis de antígeno marcado, se puede seleccionar la dosis de antisuero adecuada según los requisitos de medición.
Los isótopos radiactivos comúnmente utilizados para marcar antígenos incluyen 3H, 125I, 131I, etc. El 3H puede reemplazar al hidrógeno en compuestos orgánicos sin afectar las propiedades químicas originales. El 3H tiene una vida media larga, baja energía y es fácil de proteger. Los compuestos de etiquetado comúnmente utilizados incluyen monofosfato de guanosina cíclico 3H, monofosfato de adenosina cíclico 3H y testosterona 3H. Las propiedades químicas de los átomos de 125I y 131I son relativamente activas y el método de etiquetado es sencillo. Ya sean péptidos, proteínas o haptenos de moléculas pequeñas, todos pueden marcarse con yodo. Algunos haptenos no pueden marcarse directamente con yodo y, a menudo, se marcan con tirosina para reducir la pérdida de actividad inmunoquímica del antígeno marcado. Los reactivos de acoplamiento comúnmente utilizados incluyen: carbodiimida, iso-? Sales de azol, cloroformiatos de alquilo, diisocianatos e iminas, etc.
Perspectivas
Los reactivos de radioinmunoensayo isotópico han sido eliminados del mercado internacional debido a su alta contaminación ambiental, y todavía se utilizan en pequeñas cantidades en nuestro país. Sobre la base de este método, en los últimos años se han desarrollado otros métodos de inmunoensayo, utilizando otras sustancias con propiedades especiales en lugar de antígenos marcados con isótopos radiactivos, y también utilizando la unión competitiva de antígenos marcados y no marcados a anticuerpos, y luego utilizando métodos apropiados. para determinar el resultado. Entre ellos, el método más estudiado es el inmunoensayo de fluorescencia, que utiliza compuestos fluorescentes para marcar antígenos y luego realiza un análisis cuantitativo midiendo el valor de fluorescencia después de la unión y la separación.