¿Cuál es la importancia clínica de la enzima Ampc de baja producción?
La β-lactamasa AmpC (denominada enzima AmpC) es un tipo de β-lactamasa producida por los cromosomas o plásmidos de Enterobacteriaceae y/y Pseudomonas aeruginosa. Pertenece a la categoría de las β-lactamasas. son el grupo C en la clasificación de estructura molecular de Ambler y el primer grupo en la clasificación funcional de Bush-Jacoby-Medeiros, es decir, betalactamasas que actúan sobre las cefalosporinas y no son inhibidas por el ácido clavulánico. Por lo tanto, la enzima AmpC también se llama cefalosporinasa.
1 Clasificación de las enzimas AmpC
Las enzimas AmpC se clasifican en tres categorías según la forma en que se producen: enzima inducida de alto rendimiento, enzima sostenida de alto rendimiento y enzima sostenida de bajo rendimiento. enzima.
1.1 Inducción de enzimas de alto rendimiento La síntesis de la enzima AmpC suele estar relacionada con la presencia de antibióticos β-lactámicos. La mayoría de Enterobacteriaceae y Pseudomonas aeruginosa producen sólo una pequeña cantidad de la enzima AmpC en condiciones normales (es decir, en ausencia de antibióticos β-lactámicos). En presencia de antibióticos β-lactámicos inducibles, la producción de la enzima AmpC aumentó significativamente, con un aumento que osciló entre 100 y 1000 veces.
1.2 Enzimas sostenidas de alto rendimiento. Algunas cepas que producen enzimas AmpC pueden continuar produciendo enzimas AmpC en niveles altos independientemente de la presencia o ausencia de antibióticos β-lactámicos. La razón es la mutación de desrepresión, es decir, Uno de los genes, el gen ampD, muta, lo que produce una proteína AmpD defectuosa que no puede combinarse con otra proteína reguladora, la proteína AmpR, para formar un complejo. La proteína AmpR desempeña un papel activador en el estado activador, lo que provoca una mutación. gran cantidad de expresión de la enzima AmpC. Las enzimas AmpC mediadas por plásmidos suelen pertenecer a este tipo de enzimas AmpC. Las bacterias que producen enzimas AmpC representan el mayor daño clínico y son el foco de las pruebas de laboratorio de microbiología clínica.
1.3 Enzimas persistentemente de bajo rendimiento También hay muy pocas cepas que produzcan enzimas AmpC, que continúan produciendo enzimas AmpC en niveles bajos independientemente de la presencia o ausencia de antibióticos β-lactámicos. La razón puede ser otra. Por esta razón, una mutación en el gen ampR, un gen regulador, produce una proteína AmpR defectuosa que no puede funcionar como represor en ausencia de antibióticos betalactámicos o en presencia de antibióticos betalactámicos. la enzima AmpC puede seguir expresándose a un nivel bajo.
2 Métodos de detección de AmpCβ-lactamasa
Los métodos para detectar diferentes tipos de enzimas AmpC o detectar cepas que producen diferentes tipos de enzimas AmpC también son diferentes. Se han informado uno tras otro de una variedad de métodos para detectar la enzima AmpC. A excepción de la prueba tridimensional mejorada, que es más clásica, otros métodos de detección aún están inmaduros y aún se están explorando en la etapa experimental. diferente. Se describe a continuación.
2.1 Prueba de susceptibilidad a cefoxitina La enzima AmpC puede hidrolizar la cefoxitina (FOX), es decir, las cepas productoras de la enzima AmpC son resistentes a la cefoxitina. Otras β-lactamasas, como las β-lactamasas de espectro extendido (BLEE), generalmente no pueden descomponer la cefoxitina, es decir, las cepas que producen BLEE son sensibles a la cefoxitina. Utilizando esta característica de la enzima AmpC, se pueden detectar inicialmente las cepas que producen la enzima AmpC.
Métodos de operación específicos: (1) Método de difusión en disco: Realizar de acuerdo con el método de difusión en disco (K-B) del Comité Nacional de Estándares de Laboratorio Clínico (NCCLS). El contenido de las hojas de papel FOX es de 30μg. El estándar de juicio es que la zona de inhibición sea <18 mm, lo que significa que la cepa a probar es resistente a FOX. (2) Método de dilución: el método de dilución manual (micro) en caldo se lleva a cabo de acuerdo con el método NCCLS, también puede analizarse mediante analizadores microbianos como MicroScan, y el método de operación se lleva a cabo de acuerdo con sus procedimientos operativos; El estándar de valoración es que MIC>16μg/ml significa que la cepa que se va a probar es resistente a FOX. En el caso de cepas resistentes a FOX, se debe sospechar la posibilidad de producir enzima AmpC. Sin embargo, Coudron et al. utilizaron este estándar para detectar enzimas AmpC de Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli y Proteus mirabilis y encontraron que entre 28 cepas de Klebsiella pneumoniae con una zona de inhibición de cefoxitina <18 mm, solo 4 cepas producían enzima AmpC. cepas de Escherichia coli que producen la enzima AmpC, y sus zonas de inhibición son de 17 mm y 18 mm respectivamente. Por lo tanto, este método sólo se utiliza como evaluación preliminar. Es necesario realizar pruebas como pruebas tridimensionales o pruebas de sinergia en papel para una mayor determinación.