Las principales funciones y efectos del Bacillus subtilis

1. Bacillus subtilis se utiliza en el tratamiento de aguas residuales municipales e industriales, tratamiento de agua circulante industrial, fosas sépticas, fosas sépticas, etc., tratamiento de olores y desechos de ganado y animales, sistemas de tratamiento de heces, basura y estiércol. pozos, fosas sépticas, etc.;

2. Inducir la resistencia de las plantas significa que Bacillus subtilis no solo puede inhibir las bacterias patógenas de las plantas, sino que también induce el propio mecanismo de resistencia a las enfermedades de la planta.

3. Bacillus subtilis puede sintetizar múltiples vitaminas y aumentar la actividad de los interferones y macrófagos en los animales.

4. Bacillus subtilis puede estimular el crecimiento y desarrollo de los órganos inmunes de los animales, activar los linfocitos, aumentar los niveles de inmunoglobulinas y anticuerpos, mejorar la inmunidad celular y la inmunidad humoral y mejorar la inmunidad de grupo.

5. Bacillus subtilis puede mejorar la tasa de utilización de fertilizantes químicos, inhibir la absorción de nitrato de nitrógeno, metales pesados ​​y pesticidas por los cultivos, purificar y reparar el suelo, reducir la aparición de enfermedades de los cultivos y promover la Descomposición y utilización de paja de cultivos y residuos municipales, protege el medio ambiente. Ha desempeñado un papel irreemplazable en la mejora de la calidad de los productos agrícolas y la seguridad alimentaria.

Información ampliada

(1) Fórmula de medio de cultivo común para Bacillus subtilis:

1 litro de agua destilada 20 g de glucosa 15 g de peptona 5 g de cloruro de sodio 0,5 g de extracto de ternera 20 g de agar ?

(2) Proceso de preparación de protoplastos de Bacillus subtilis:

1. Cultivo de Bacillus subtilis:

Tomar muestras frescas de las cepas parentales T4412 y TT2 respectivamente. un anillo a un tubo de ensayo que contiene medio de cultivo completo líquido (CM) e incubar a 36 °C durante 14 horas con agitación. Transferir 1 ml de cada solución bacteriana a un matraz Erlenmeyer de 250 ml que contenga 20 ml de medio de cultivo completo líquido y. incubar a 36 °C durante 3 horas con agitación, para que el crecimiento celular entre en la fase logarítmica temprana, agregar 25 u/ml de penicilina a cada uno para obtener una concentración final de 0,3 u/ml y continuar cultivando con agitación durante 2 h. p>

2. Recolecte las células:

Cada una tome 10 ml de líquido bacteriano, centrifugue a 4000 r/min durante 10 min, deseche el sobrenadante, suspenda las bacterias en tampón fosfato y centrifugue. Lavar dos veces de esta manera y suspender las bacterias en 10 ml de SMM. Es apropiado que cada ml contenga entre 108 y 109 bacterias viables. ?

3. Determinación del recuento bacteriano total:

Tomar 0,5 ml de cada solución bacteriana, diluirla con suero fisiológico y tomar 1 ml de cada uno de 10-5, 10-6, y 10-7 (cada uno Hacer dos placas según la dilución), verter el medio de cultivo completo y contar después de incubar a 36°C durante 24 horas. Este es el número total de bacterias sin tratamiento enzimático. ?

4. Separación:

Tomar 5 ml de suspensión bacteriana de cada una de las dos cepas originales, agregar 5 ml de solución de lisozima, la concentración de lisozima es de 100 ug/ml, mezclar bien e incubar. a 36 Incubar en un baño de agua ℃ durante 30 minutos, tomar muestras regularmente y observar la formación de protoplastos bajo un microscopio. Cuando más del 95% de las células se conviertan en protoplastos esféricos, centrifugar a 4000 r/min durante 10 minutos, desechar el. sobrenadante, se lavó con tampón hipertónico para eliminar las enzimas y luego se suspendieron los protoplastos en 5 ml de tampón hipertónico. Mida inmediatamente la cantidad de bacterias restantes.

5. Determinación del número de bacterias restantes:

Tomar 0,5 ml de la suspensión de protoplastos anterior, diluirla con agua esterilizada para lisar los protoplastos y morir, tomar 10-2 y 10-3, 0,1 ml cada una de la dilución 10-4, esparcir sobre la placa de medio completa y cultivar a 36°C durante 24 a 48 horas. Las colonias que crezcan deben ser las células restantes que no han sido lisadas por la enzima. Calcule el número de células restantes después del tratamiento con enzimas y calcule la tasa de formación de protoplastos de la segunda cepa original. Tasa de formación de protoplastos = número total de bacterias sin tratamiento enzimático - número de células restantes después del tratamiento enzimático.

Referencia: Enciclopedia Baidu-Bacillus subtilis