¿Cuáles son las precauciones durante el proceso de purificación del extracto de muestra para la determinación de residuos de pesticidas organoclorados?
Los utensilios utilizados en esta prueba deben limpiarse rigurosamente (no deben quedar iones halógenos).
Al preparar la solución de prueba, la fase orgánica debe concentrarse a presión reducida hasta que esté casi seca para evitar la pérdida de los componentes a probar.
Para evitar resultados falsos positivos, se pueden seleccionar columnas cromatográficas de diferentes polaridades para la verificación. Si las condiciones lo permiten, se puede utilizar GC-MS para la confirmación.
Si hay interferencia de otros componentes de la muestra, se pueden cambiar las condiciones cromatográficas pero se requiere verificación en blanco.
Método para la determinación de residuos de pesticidas organoclorados
1 Breve descripción
Los pesticidas organoclorados son los pesticidas más utilizados en la historia de los pesticidas y tienen la historia más larga de Los pesticidas similares a los pesticidas tienen propiedades químicas estables, una fuerte solubilidad en grasas y un efecto residual prolongado (de 30 a 50 años). Son fáciles de acumular en el tejido graso, lo que provoca intoxicación crónica y pone en grave peligro la salud humana. La edición de 2000 de la Farmacopea China (Parte I) comenzó a incluir métodos para la determinación de residuos de pesticidas organoclorados (666, DDT, pentacloronitrobenceno, etc.).
Este método prepara el líquido del ficus de prueba mediante los pasos de extracción, purificación y enriquecimiento, y utiliza cromatografía de gases y un detector de captura de electrones para medirlo. 2 Instrumentos y utensilios
2.1 Cromatógrafo de gases (como PE-9000, Agilent-6890, Varian 6000, Shimadzu GC-17 A, etc.), con detector de captura de electrones 63Ni-ECD y gas portador es alto Para nitrógeno puro (pureza gt; 99,9999), se debe instalar una tubería de desoxidación (comprada en el Instituto Dalian de Física Química).
2. 2 Máquina de ultrasonido.
2.3 Centrifugar. 2.4 Evaporador rotativo.
Columna cromatográfica 2.5: SE': 54 o columna capilar elástica de cuarzo DB-1701 (botella de 30m000mI), pipeta, etc. 3 medicamentos de prueba y soluciones de prueba
3. 1 El propilenglicol, el refrigerante de petróleo (60 ~ 90 °C) y el diclorometano son todos de grado analítico y todos han sido redestilados mediante un evaporador de vidrio. cromatografía de gases, cumple con los requisitos para las pruebas de residuos de pesticidas. (Los laboratorios con condiciones pueden utilizar reactivos importados de grado pesticida)
La clavija de ácido sulfúrico de agua de 3,2 yuanes y el recipiente de cloración son ambos de grado analítico, y el ácido sulfúrico tiene una pureza de grado superior.
3.3 Sustancia de referencia del plaguicida: 666 CBHC) [incluidos cuatro isómeros de α-BHC, I3-BHC, γ-BHC y o-BHC], DDT CDDT) [incluidos pp y DDE, pp'-DDD , op'-DDT y pp'-DDT cuatro isómeros] y también se pueden utilizar estándares de pesticidas de pentacloronitrobenceno (PCN) con el contenido etiquetado (concentración) proporcionado por el Centro Nacional de Investigación de Materiales de Referencia. Nosotros mismos preparamos estándares de pesticidas reconocidos internacionalmente. p>
4 Condiciones cromatográficas y prueba de idoneidad del sistema
4.1 Columna cromatográfica SE-54: Temperatura de entrada: 230·C, temperatura del detector: 300·C, inyección splitless: Temperatura inicial. : 100°C, aumentando a 22WC a 10°C por minuto, luego aumentando a 250°C a 8°C por minuto y manteniendo durante 10 minutos p>4.2 Columna DB-1701: Temperatura de entrada: 220°C, detector. temperatura: 300°C, inyección splitless, aumento de temperatura programado: temperatura inicial 140°C, mantenida durante 1 minuto, a 10°C por minuto, aumentar a 210°C, luego aumentar a 260°C a 20°C por minuto, y mantener durante 4 minutos.
Operar según las condiciones anteriores, y el número de placas teóricas no debe ser inferior a 1 106, la separación de dos picos cromatográficos adyacentes debe ser superior a 1,5.
5 Métodos de funcionamiento
5. 1 Preparación de la solución madre de la sustancia de referencia Pesar con precisión BHC (α-BHC, βBHC, γ-BHC, o-BHC), DDT
CDDT) [PP'-DDE, PP'-DDD, OP'-DDT, PP'-DDT] y solución de referencia para pesticidas de pentacloronitrobenceno (PCNB) en cantidades apropiadas, con alcohol de petróleo (60~90·C) para preparar Soluciones que contienen de 4 a 5 preguntas por 1 ml.
Preparación: Mida con precisión 0,5 de cada solución madre de sustancia de referencia anterior, colóquela en un matraz volumétrico de 10 ml, diluya hasta la marca con enzima de petróleo (60 ~ 90 °C) y agite bien.
5. 3 Preparación de la solución de sustancia de referencia mixta Mida con precisión la solución madre de sustancia de referencia mixta anterior y prepárela con refrigerante de petróleo (60 ~ 90 °C). Cada 1 litro contiene 0 μg, 1 μg y 5 μg respectivamente. 10 meses, soluciones de 50 T, 100 μg y 250 T.
5.4 Preparación de la solución de la muestra de prueba
5. 4. 1 Método 1 (materiales medicinales): Secar la muestra de prueba a 60 °C durante 4 horas, triturarla hasta obtener un polvo fino, se toman aproximadamente 2 g, se pesan con precisión, se colocan en un matraz Erlenmeyer con tapa de 100 mi, se agregan 20 mi de agua y se remojan durante la noche, se agrega propilenglicol con precisión durante 40 horas, se pesa, se somete a ultrasonidos durante 30 minutos, se deja enfriar, se pesa nuevamente y se suplementa con propilenglicol Para el peso perdido, añadir unos 6 g de cloruro de uranio, añadir exactamente 30 ml de cloruro de metileno, pesarlo y someterlo a ultrasonidos durante 15 minutos hasta que el cloruro de uranio esté completamente disuelto, pesarlo nuevamente y completar el peso. con cloruro de metileno perder peso, dejar reposar para separar completamente la fase acuosa y la fase orgánica, pasar rápidamente la fase orgánica a un matraz cónico con tapa de 100 tni que contenga una cantidad adecuada de sulfato de uranio anhidro y deshidratar durante 4 horas. 35 horas, colocarlo en un matraz rotavaporador de 100 mi, concentrar a presión reducida en un baño de agua a 40°C hasta que esté casi seco, agregar una pequeña cantidad de refrigerante de petróleo (60~90°C), y repetir la operación como antes hasta que se eliminen el diclorometano y el cloruro de propileno, disolver con refrigerante de petróleo (60~90·C) y transferir a un tubo de centrífuga graduado de 10 mi con tapón, agregar refrigerante de petróleo (60~90·C) para diluir con precisión a 5 o. En punto, agregar con cuidado 1 ml de ácido sulfúrico y agitar durante 1 minuto, centrifugar (3000 rpm) durante 10 minutos, medir con precisión el sobrenadante durante 2 horas, colocarlo en una botella de concentración graduada, conectarlo a un rotavapor, concentrar. la solución a una cantidad adecuada a 40°C (o use nitrógeno), y diluya con precisión a 1 ml, eso es todo. Prepare muestras en blanco de la misma manera.
5.4.2 Método 2 (preparación): tomar la muestra de prueba y triturarla hasta obtener un polvo fino (picar las pastillas de miel y medir el líquido directamente), pesar con precisión una cantidad adecuada (equivalente a 2 g de materiales medicinales). ), siga el método siguiente 1. Prepare la solución de prueba.
5.5 El método de determinación se opera de acuerdo con las condiciones cromatográficas anteriores. Extraiga con precisión 1 μl de cada una de la solución de prueba y la solución de referencia mixta de la concentración correspondiente.
Tome la muestra 3. veces, tome el valor promedio de las 3 veces y calcule las cantidades residuales de 9 pesticidas organoclorados en el producto de prueba de acuerdo con el método estándar externo.
6 Precauciones
6./1 Los utensilios utilizados en esta prueba deben limpiarse rigurosamente (no deben quedar iones halógenos).
6.2 Al preparar la solución de prueba, la fase orgánica debe concentrarse a presión reducida hasta que esté casi seca para evitar la pérdida de los componentes a probar.
6.3 Para evitar resultados falsos positivos, se pueden seleccionar columnas cromatográficas de diferentes polaridades para la verificación. Si las condiciones lo permiten, se puede utilizar GC-MS para la confirmación.
6.4 Si hay interferencia de otros componentes de la muestra, se pueden cambiar las condiciones cromatográficas, pero se requiere verificación en blanco. Redactor: Tian Jingai (Instituto de China para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos) Revisor: Jin Hongyu (Instituto de China para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos)