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¿Cuáles son las razones de la insensibilidad a los medicamentos en las pruebas de susceptibilidad a medicamentos en animales?

Prueba clínica veterinaria de susceptibilidad a fármacos

Actualmente, las enfermedades causadas por diversas bacterias han provocado graves pérdidas económicas a la industria ganadera y avícola y han obstaculizado el rápido desarrollo de la industria ganadera y avícola. Por lo tanto, el uso de medicamentos antimicrobianos para prevenir y tratar enfermedades bacterianas se ha convertido en una tarea importante en la cría de ganado y aves de corral. Sin embargo, debido al mal uso ciego y no científico de los medicamentos antimicrobianos durante el proceso de reproducción, el problema de la resistencia bacteriana se ha vuelto cada vez más prominente y muchas cepas resistentes a los medicamentos pueden tolerar múltiples antibióticos. El daño causado por esto es muy grave, no solo reduce la eficacia de los medicamentos antibacterianos, prolonga el curso del tratamiento, aumenta la mortalidad y aumenta los costos del tratamiento. Esto no sólo trae enormes pérdidas económicas a la acuicultura, sino que las cepas resistentes a los medicamentos pueden transferir genes resistentes a los medicamentos de los animales a los humanos, lo que representa una amenaza potencial para la salud humana. Por lo tanto, los antibióticos deben usarse racionalmente en la práctica clínica para evitar o reducir la aparición de resistencia a los medicamentos. Una parte importante del uso racional de los antibióticos para prevenir y tratar enfermedades del ganado y las aves de corral es guiar la medicación clínica a través de pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, a fin de guiar la medicación clínica a través de pruebas de susceptibilidad a los medicamentos. aprovechar al máximo la eficacia de los antibióticos y reducir sus efectos adversos.

1. ¿Qué son las pruebas de susceptibilidad a medicamentos?

Las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos antibacterianos, conocidas como pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, se refieren a las pruebas de cepas aisladas con susceptibilidad impredecible para probar si los medicamentos antibacterianos tienen efectos inhibidores sobre los microorganismos patógenos in vitro, guiando así la selección de medicamentos terapéuticos. , comprender los cambios en la resistencia a los medicamentos de las bacterias patógenas comunes en la región ayudará con el tratamiento empírico. Las pruebas de sensibilidad a los medicamentos son una habilidad básica en el trabajo clínico veterinario y un vínculo indispensable antes de utilizar medicamentos antibacterianos para el tratamiento.

2. La importancia de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos

1. Puede detectar de forma rápida y eficaz la sensibilidad de las bacterias patógenas a diversos fármacos antibacterianos y guiar el uso racional de los medicamentos en la práctica clínica. Dado que el experimento tiene como objetivo probar la susceptibilidad a los medicamentos de bacterias aisladas in vitro, no requiere portadores biológicos ni animales de experimentación, la operación es relativamente simple y el costo es relativamente bajo. Este es un método rentable.

2. Se pueden realizar seguimientos de encuestas epidemiológicas para controlar y prevenir la prevalencia de cepas resistentes a los medicamentos. Porque con la aparición de nuevas bacterias patógenas, varias bacterias patógenas tienen diferentes sensibilidades a diferentes fármacos antibacterianos, y diferentes cepas de la misma bacteria tienen diferentes sensibilidades a diferentes fármacos antibacterianos. Las pruebas eficaces de susceptibilidad a los medicamentos pueden detectar rápidamente la resistencia a los medicamentos de varias cepas y cepas nuevas, establecer vigilancia para investigaciones epidemiológicas y tomar las medidas correspondientes para controlar y prevenir la prevalencia de cepas resistentes a los medicamentos.

3. Proporcionar referencias de medicación clínica. Porque los resultados correctos de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos pueden servir como referencia para que los veterinarios clínicos y los criadores de ganado seleccionen medicamentos antibacterianos eficaces. Durante mucho tiempo, debido a la aparición de resistencia a los medicamentos de varias bacterias patógenas, la eficacia de varios fármacos antibacterianos de uso común ha disminuido o desaparecido. No entender la susceptibilidad de los medicamentos a las bacterias no sólo desperdicia medicamentos, sino que también retrasa la progresión de la enfermedad y causa grandes pérdidas económicas a los agricultores. En los últimos diez años, para controlar la infección por E. coli y algunas bacterias en la producción de pollos de engorde, se han utilizado a ciegas algunos medicamentos antibacterianos, lo que ha dado como resultado un número cada vez mayor de cepas resistentes a los medicamentos. Una gran cantidad de resultados de pruebas de susceptibilidad a medicamentos muestran que Escherichia coli y Salmonella han desarrollado diversos grados de resistencia a aminoglucósidos y fluoroquinolonas que alguna vez fueron sensibles, y a menudo se encuentran cepas que son insensibles a más de una docena de medicamentos antibacterianos de uso común. Esta es una señal muy peligrosa. Por lo tanto, en la prevención y el tratamiento de enfermedades clínicas, para lograr mejores efectos terapéuticos, se deben ampliar los tipos de medicamentos antibacterianos convencionales para las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, se deben seleccionar medicamentos sensibles en función de los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos y se debe prestar atención. Se debe prestar atención a la alternancia de medicación y administración según el curso del tratamiento, con el fin de evitar lograr mejores efectos terapéuticos.

3. Métodos de prueba de sensibilidad a los medicamentos más utilizados

Hay dos métodos principales de prueba de sensibilidad a los medicamentos que se usan comúnmente en la práctica clínica veterinaria, a saber, el método de difusión y el método de dilución. Entre ellos, el método de difusión es un método de detección manual que determina si las bacterias son sensibles a los fármacos detectando el tamaño de la zona de inhibición en papel farmacológico o vasos Oxford en medios de cultivo sólidos. Los métodos de dilución incluyen la dilución en tubo de ensayo y la microdilución. La concentración mínima inhibidora (CMI) de las bacterias se determina probando su crecimiento en medios que contienen diferentes concentraciones del fármaco.

El método de difusión es simple de operar y de bajo costo, y ha sido adoptado por la mayoría de los laboratorios y unidades de base. Los métodos de difusión incluyen el método del disco de papel, el método de la copa Oxford y el método de perforación, pero el método de la copa Oxford y el método de perforación rara vez se utilizan en la práctica clínica veterinaria. A continuación se ofrece una breve introducción al método del papel.

1. Producción de papel sensible a los medicamentos

El papel sensible a los medicamentos utilizado en el método del papel es vendido actualmente por muchos fabricantes en el mercado. Pero también puedes hacer el tuyo propio según tus necesidades. El método específico para hacerlo usted mismo es el siguiente:

Tome papel de filtro de buena calidad y perfórelo hasta obtener un papel circular con un diámetro de 6 mm utilizando una perforadora común.

Tome 50 trozos de papel redondo y colóquelos en un frasco o plato pequeño limpio y seco, y átelos o envuélvalos con una sola capa de papel kraft. Después de esterilizar en autoclave a 15 libras de presión. 15-20 minutos y colocar en una incubadora o en un horno a 37°C durante varios días para que se seque por completo. Según la capacidad de absorción de agua saturada de cada trozo de papel es de 0,01 ml, agregue 0,5 ml de solución medicinal a un vial que contiene 50 trozos de papel y gírelo de vez en cuando para que el papel de filtro absorba uniformemente la solución medicinal. Generalmente, déjelo en remojo durante 30 minutos. Al mismo tiempo, registre el nombre del fármaco y guárdelo en una incubadora a 37°C durante la noche. El tiempo en la incubadora u horno no debe ser demasiado largo para evitar que algunos antibióticos dejen de ser eficaces. La penicilina y la clortetraciclina deben secarse a baja temperatura y al vacío. Sellar después del secado. Mantener alejado de la humedad. Conservar en un lugar seco y alejado de la luz o en un frigorífico doméstico. El período de validez es de 4 a 6 meses.

2. Preparación del medicamento líquido

Al fabricar papel fotosensible, debes preparar tú mismo el líquido antibacteriano. El diluyente de los antimicrobianos suele ser agua destilada. Generalmente, de acuerdo con los ingredientes en las instrucciones de uso de los medicamentos disponibles comercialmente o la concentración del agua de bebida, cuántos mililitros de agua o miligramos de alimento se deben agregar por 1 g, lo que equivale a la cantidad de mililitros de agua destilada que se agregan cuando preparar la solución medicinal. Por ejemplo, se pueden mezclar 10 g de medicamento con 50 kg de alimento y el método de conversión es: 1 g de este producto más 5000 ml de agua destilada. Esta solución se utiliza para pruebas de susceptibilidad a medicamentos.

3. Método de operación de prueba

En el banco de trabajo ultralimpio o al lado de la lámpara de alcohol, use un hisopo de algodón esterilizado o un asa de inoculación esterilizada por la llama de la lámpara de alcohol para recoger. una cantidad adecuada de objeto de cultivo bacteriano, dibuje líneas y extienda la solución bacteriana uniformemente sobre la superficie del medio de cultivo sólido en el plato. Luego use pinzas estériles para colocar el papel sobre la superficie del medio sólido y presione suavemente para hacer contacto completo entre el papel y la superficie del medio. Para observar con precisión los resultados, se requiere que las hojas de papel sensibles a los medicamentos se distribuyan uniformemente en el medio de cultivo y se coloquen en una posición moderada para evitar la superposición de los círculos de inhibición. Generalmente, los centros de cada trozo de papel deben estar separados por más de 24 mm. Puedes pegar un trozo en el centro del plato y 5 o 6 trozos a distancias iguales alrededor de la periferia. Recuerde el nombre de cada documento de sensibilidad a los medicamentos. Después de 15 minutos, coloque la placa en una incubadora a 37°C durante 16 a 24 horas, observe y registre los resultados. El área sin crecimiento visible alrededor del papel sensible a los fármacos se considera zona de inhibición y la sensibilidad de las bacterias a los fármacos antibacterianos se determina en función del diámetro de la zona de inhibición.

Criterios para juzgar los resultados de las pruebas de susceptibilidad a medicamentos

Sensibilidad del diámetro de la zona de inhibición (mm)

> 20 Extremadamente sensible

15-20 Altamente sensible

Sensible entre 10-14

< 10 Baja sensibilidad

0 Insensible

La práctica ha demostrado que el uso de auto- papel sensible a los medicamentos Al realizar pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, los medicamentos se pueden seleccionar de manera flexible. Los medicamentos relacionados con un determinado patógeno se pueden convertir en papel de susceptibilidad a los medicamentos para su tratamiento en cualquier momento. El fármaco más sensible puede seleccionarse de la gama de fármacos disponibles en el campo o de fármacos fácilmente disponibles en el campo. También puede elegir el mejor medicamento y dosis en un corto período de tiempo, lo que no solo puede acortar el curso de la enfermedad, sino también evitar la medicación ciega y reducir el desperdicio.

4. Según los principios de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos.

Una vez completada la prueba de susceptibilidad a los medicamentos, se deben seleccionar medicamentos con alta sensibilidad, bajo precio, fácil acceso y seguridad para el tratamiento en función de los resultados para reducir las cepas resistentes a los medicamentos. También se deben considerar los siguientes principios. prestó atención a:

1, al seleccionar medicamentos de alta sensibilidad, también se debe considerar la vía de absorción del medicamento. Debido a que las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos implican el contacto directo entre la solución del medicamento y las bacterias, cuando los medicamentos se administran al ganado y a las aves de corral, el cuerpo debe absorberlos para que el medicamento funcione. Por lo tanto, cuando se administran medicamentos a ganado y aves de corral, los medicamentos altamente sensibles deben combinarse con métodos de administración apropiados, dosis suficientes y ciclos de tratamiento suficientes para lograr buenos efectos terapéuticos.

2. Los resultados de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos son solo como referencia clínica para seleccionar medicamentos altamente sensibles. Debido a la influencia del cuerpo del animal y el medio ambiente, la tasa de coherencia entre las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos y los efectos del tratamiento clínico es generalmente del 70 al 80%, y no se puede confiar demasiado en las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos. Si el efecto no es evidente, el apósito debe cambiarse a tiempo.

3. El fármaco de elección determinado mediante pruebas de susceptibilidad a fármacos no es estático. A medida que aumenta el uso de medicamentos y se dispone de nuevos medicamentos especializados, es posible que las bacterias ya no sean sensibles a medicamentos que originalmente eran muy sensibles. Por lo tanto, es necesario realizar pruebas de susceptibilidad a los medicamentos con regularidad para comprender la sensibilidad de las bacterias en este campo a los medicamentos antibacterianos.

4. Para los problemas que los antibióticos de espectro reducido pueden resolver, no elija antibióticos de amplio espectro. Cuando un antibiótico es terapéutico, no utilice dos medicamentos juntos. Cuando se deben utilizar dos antibióticos, se debe elegir una combinación sinérgica.

5. Evitar drogas usadas o similares. Por lo general, no se utilizan los medicamentos utilizados durante la enfermedad.

IV.Factores que afectan los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos

Los siguientes factores afectarán los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos con el método del disco:

1. : En primer lugar, seleccione un medio de cultivo adecuado según los requisitos nutricionales de las bacterias de prueba. La diferencia en la composición del medio de cultivo no sólo afecta el crecimiento y la reproducción de cepas sensibles, sino que también afecta el diámetro de la zona de inhibición. Se puede utilizar agar nutritivo común para bacterias comunes, como Escherichia coli y Staphylococcus aureus; se deben seleccionar placas sin peptona para las pruebas de sensibilidad a las sulfas; se pueden utilizar placas de agar con sangre de oveja para Streptococcus y Pasteurella. En segundo lugar, al verter el tablero, el grosor debe ser el adecuado (unos 5-6 mm) y no demasiado fino. Generalmente, es apropiado verter 18-20 ml de medio de cultivo en una placa de Petri con un diámetro de 90 mm. Deben evitarse en el medio de cultivo las sustancias antagonistas de los fármacos antibacterianos, como los iones de calcio y magnesio, que pueden reducir la actividad antibacteriana de los aminoglucósidos, mientras que la timidina y el ácido paraaminobenzoico (PABA) pueden antagonizar la actividad de las sulfonamidas y el TMP.

2. Volumen de inóculo bacteriano: El volumen de inóculo bacteriano debe ser constante. Si hay demasiada, la zona de inhibición se hará más pequeña y las cepas productoras de enzimas destruirán la actividad antibacteriana del fármaco.

3. Concentración del fármaco: La concentración y la cantidad total del fármaco afectan directamente los resultados de la prueba antibacteriana y requieren una preparación precisa. Los medicamentos disponibles comercialmente deben formularse estrictamente de acuerdo con las dosis terapéuticas recomendadas.

4. Tiempo de cultivo: La temperatura general y el tiempo de cultivo bacteriano son 37°C durante 12-24 horas. Algunos fármacos antibacterianos como la polimixina se difunden lentamente. El medio de cultivo con papel sensible a los medicamentos se puede colocar en un refrigerador a 4 °C durante 2 a 4 horas para esparcir previamente los medicamentos antibacterianos y luego colocar en una incubadora a 37 °C para el cultivo, lo que puede retrasar el crecimiento bacteriano y obtener una zona de inhibición más evidente.

Problemas en las pruebas de sensibilidad a los medicamentos del verbo (abreviatura de verbo)

En la actualidad, todavía existen algunos problemas en las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, que incluyen principalmente los siguientes aspectos:

1.La metodología no está unificada y no existe estandarización.

2. Los medios de cultivo y los papeles sensibles a los medicamentos que se ofrecen en el mercado carecen de un control de calidad estricto y la calidad es difícil de garantizar. Por lo tanto, todavía se recomienda hacer papel fotosensible casero según sea necesario.

Prueba Clínica Veterinaria de Susceptibilidad a Medicamentos

Prueba Clínica Veterinaria de Susceptibilidad a Medicamentos

En la actualidad, las enfermedades causadas por diversas bacterias han supuesto grandes retos para la industria ganadera y avícola. Las graves pérdidas económicas han obstaculizado el rápido desarrollo de la industria ganadera y avícola. Por tanto, el uso de fármacos antibacterianos para prevenir y tratar enfermedades bacterianas se ha convertido en una tarea importante en la cría de ganado y aves de corral. Sin embargo, debido al mal uso ciego y no científico de los medicamentos antimicrobianos durante el proceso de reproducción, el problema de la resistencia bacteriana se ha vuelto cada vez más prominente y muchas cepas resistentes a los medicamentos pueden tolerar múltiples antibióticos. El daño causado por esto es muy grave, no solo reduce la eficacia de los medicamentos antibacterianos, prolonga el curso del tratamiento, aumenta la mortalidad y aumenta los costos del tratamiento. Esto no sólo trae enormes pérdidas económicas a la industria de la acuicultura, sino que las cepas resistentes a los medicamentos pueden transferir genes de resistencia de los animales a los humanos, lo que representa una amenaza potencial para la salud humana. Por lo tanto, los antibióticos deben usarse racionalmente en la práctica clínica para evitar o reducir la aparición de resistencia a los medicamentos. Una parte importante del uso racional de los antibióticos para prevenir y tratar enfermedades del ganado y las aves de corral es guiar la medicación clínica a través de pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, a fin de guiar la medicación clínica a través de pruebas de susceptibilidad a los medicamentos. aprovechar al máximo la eficacia de los antibióticos y reducir sus efectos adversos.

1. ¿Qué son las pruebas de susceptibilidad a medicamentos?

Las pruebas de susceptibilidad a los antibacterianos (AST), conocidas como pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, se refieren a la detección de cepas aisladas con susceptibilidad impredecible y a la prueba de si los antibióticos tienen efectos inhibidores sobre los microorganismos patógenos in vitro, guiando así el desarrollo de tratamientos La selección de medicamentos y la comprensión de los cambios en la resistencia a los medicamentos de las bacterias patógenas comunes en la región ayudarán con el tratamiento empírico. Las pruebas de sensibilidad a los medicamentos son una habilidad básica en el trabajo clínico veterinario y un vínculo indispensable antes de utilizar medicamentos antibacterianos para el tratamiento.

2. La importancia de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos

1. Puede detectar de forma rápida y eficaz la sensibilidad de las bacterias patógenas a diversos medicamentos antibacterianos y guiar el uso racional de los medicamentos en la práctica clínica. Dado que el experimento prueba la susceptibilidad a los medicamentos de bacterias aisladas in vitro, no requiere portadores biológicos ni animales de experimentación, por lo que la operación es relativamente simple y el costo es relativamente bajo. Este es un método rentable.

2. Se pueden realizar seguimientos de encuestas epidemiológicas para controlar y prevenir la prevalencia de cepas resistentes a los medicamentos. Porque con la aparición de nuevas bacterias patógenas, varias bacterias patógenas tienen diferentes sensibilidades a diferentes fármacos antibacterianos, y diferentes cepas de la misma bacteria tienen diferentes sensibilidades a diferentes fármacos antibacterianos. Las pruebas eficaces de susceptibilidad a los medicamentos pueden detectar rápidamente la resistencia a los medicamentos de varias cepas y cepas nuevas, establecer vigilancia para investigaciones epidemiológicas y tomar las medidas correspondientes para controlar y prevenir la prevalencia de cepas resistentes a los medicamentos.

3. Proporcionar referencias de medicación clínica.

Porque los resultados correctos de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos pueden servir como referencia para que los veterinarios clínicos y los criadores de ganado seleccionen medicamentos antibacterianos eficaces. Durante mucho tiempo, debido a la aparición de resistencia a los medicamentos de varias bacterias patógenas, la eficacia de varios fármacos antibacterianos de uso común ha disminuido o desaparecido. No entender la susceptibilidad de los medicamentos a las bacterias no sólo desperdicia medicamentos, sino que también retrasa la progresión de la enfermedad y causa grandes pérdidas económicas a los agricultores. En los últimos diez años, para controlar la infección por E. coli y algunas bacterias en la producción de pollos de engorde, se han utilizado a ciegas algunos medicamentos antibacterianos, lo que ha dado como resultado un número cada vez mayor de cepas resistentes a los medicamentos. Una gran cantidad de resultados de pruebas de susceptibilidad a medicamentos muestran que Escherichia coli y Salmonella han desarrollado diversos grados de resistencia a aminoglucósidos y fluoroquinolonas que alguna vez fueron sensibles, y a menudo se encuentran cepas que son insensibles a más de una docena de medicamentos antibacterianos de uso común. Esta es una señal muy peligrosa. Por lo tanto, en la prevención y el tratamiento de enfermedades clínicas, para lograr mejores efectos terapéuticos, se deben ampliar los tipos de medicamentos antibacterianos convencionales para las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, se deben seleccionar medicamentos sensibles en función de los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos y se debe prestar atención. Se debe prestar atención a la alternancia de medicación y administración según el curso del tratamiento, para evitar lograr mejores efectos terapéuticos.

3. Métodos de prueba de sensibilidad a los medicamentos más utilizados

Hay dos métodos principales de prueba de sensibilidad a los medicamentos que se usan comúnmente en la práctica clínica veterinaria, a saber, el método de difusión y el método de dilución. Entre ellos, el método de difusión es un método de detección manual que determina si las bacterias son sensibles a los fármacos detectando el tamaño de la zona de inhibición en papel farmacológico o vasos Oxford en medios de cultivo sólidos. Los métodos de dilución incluyen la dilución en tubo de ensayo y la microdilución. La concentración mínima inhibidora (CMI) de las bacterias se determina probando su crecimiento en medios que contienen diferentes concentraciones del fármaco.

El método de difusión es simple de operar y de bajo costo, y ha sido adoptado por la mayoría de los laboratorios y unidades de base. Los métodos de difusión incluyen el método del disco de papel, el método de la copa Oxford y el método de perforación, pero el método de la copa Oxford y el método de perforación rara vez se utilizan en la práctica clínica veterinaria. A continuación se ofrece una breve introducción al método del papel.

1. Producción de papel sensible a los medicamentos

El papel sensible a los medicamentos utilizado en el método del papel es vendido actualmente por muchos fabricantes en el mercado. Pero también puedes hacer el tuyo propio según tus necesidades. El método específico para hacerlo usted mismo es el siguiente:

Tome papel de filtro de buena calidad y perfórelo hasta obtener un papel circular con un diámetro de 6 mm utilizando una perforadora común. Tome 50 trozos de papel redondo y colóquelos en un frasco o plato pequeño limpio y seco, y átelos o envuélvalos con una sola capa de papel kraft. Después de esterilizar en autoclave a 15 libras de presión. 15-20 minutos, colocar en una incubadora o en un horno a 37°C durante varios días para que se seque por completo. Según la capacidad de absorción de agua saturada de cada trozo de papel es de 0,01 ml, agregue 0,5 ml de solución medicinal a un vial que contiene 50 trozos de papel y gírelo de vez en cuando para que el papel de filtro absorba uniformemente la solución medicinal. Generalmente, déjelo en remojo durante 30 minutos. Al mismo tiempo, registre el nombre del fármaco y guárdelo en una incubadora a 37°C durante la noche. El tiempo en la incubadora u horno no debe ser demasiado largo para evitar que algunos antibióticos dejen de ser eficaces. La penicilina y la clortetraciclina deben secarse a baja temperatura y al vacío. Sellar después del secado. Mantener alejado de la humedad. Conservar en un lugar seco y alejado de la luz o en un frigorífico doméstico. El período de validez es de 4 a 6 meses.

2. Preparación del medicamento líquido

Al fabricar papel fotosensible, debes preparar tú mismo el líquido antibacteriano. El diluyente de los antimicrobianos suele ser agua destilada. Generalmente, de acuerdo con los ingredientes en las instrucciones de uso de los medicamentos disponibles comercialmente o la concentración del agua de bebida, cuántos mililitros de agua o miligramos de alimento se deben agregar por 1 g, lo que equivale a la cantidad de mililitros de agua destilada que se agregan cuando preparar la solución medicinal. Por ejemplo, se pueden mezclar 10 g de medicamento con 50 kg de alimento y el método de conversión es: 1 g de este producto más 5000 ml de agua destilada. Esta solución se utiliza para pruebas de susceptibilidad a medicamentos.

3. Método de operación de prueba

En el banco de trabajo ultralimpio o al lado de la lámpara de alcohol, use un hisopo de algodón esterilizado o un asa de inoculación esterilizada por la llama de la lámpara de alcohol para recoger. una cantidad adecuada de objeto de cultivo bacteriano, dibuje líneas y extienda la solución bacteriana uniformemente sobre la superficie del medio de cultivo sólido en el plato. Luego use pinzas estériles para colocar el papel sobre la superficie del medio sólido y presione suavemente para hacer contacto completo entre el papel y la superficie del medio. Para observar con precisión los resultados, se requiere que las hojas de papel sensibles a los medicamentos se distribuyan uniformemente en el medio de cultivo y se coloquen en una posición moderada para evitar la superposición de los círculos de inhibición. Generalmente, los centros de cada trozo de papel deben estar separados por más de 24 mm. Puedes pegar un trozo en el centro del plato y 5 o 6 trozos a distancias iguales alrededor de la periferia. Recuerde el nombre de cada documento sobre sensibilidad a los medicamentos. Después de 15 minutos, coloque la placa en una incubadora a 37°C durante 16 a 24 horas, observe y registre los resultados. El área sin crecimiento visible alrededor del papel sensible a los fármacos se considera zona de inhibición y la sensibilidad de las bacterias a los fármacos antibacterianos se determina en función del diámetro de la zona de inhibición.

Criterios para juzgar los resultados de las pruebas de susceptibilidad a medicamentos

Sensibilidad del diámetro de la zona de inhibición (mm)

> 20 Extremadamente sensible

15-20 Altamente sensible

Sensible entre 10-14

< 10 Baja sensibilidad

0 Insensible

La práctica ha demostrado que el uso de auto- papel sensible a los medicamentos Al realizar pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, los medicamentos se pueden seleccionar de manera flexible. Los medicamentos relacionados con un determinado patógeno se pueden convertir en papel de susceptibilidad a los medicamentos para su tratamiento en cualquier momento. El fármaco más sensible puede seleccionarse de la gama de fármacos disponibles en el campo o de fármacos fácilmente disponibles en el campo. También puede elegir el mejor fármaco y dosis en un corto período de tiempo, lo que no sólo puede acortar el curso de la enfermedad, sino también evitar la medicación ciega y reducir el desperdicio.

4. Según los principios de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos.

Una vez completada la prueba de susceptibilidad a los medicamentos, se deben seleccionar medicamentos con alta sensibilidad, bajo precio, fácil acceso y seguridad para el tratamiento en función de los resultados para reducir las cepas resistentes a los medicamentos. También se deben considerar los siguientes principios. prestó atención a:

1, al seleccionar medicamentos de alta sensibilidad, también se debe considerar la vía de absorción del medicamento. Debido a que las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos implican el contacto directo entre la solución del medicamento y las bacterias, cuando los medicamentos se administran al ganado y a las aves de corral, el cuerpo debe absorberlos para que el medicamento funcione. Por lo tanto, cuando se administran medicamentos a ganado y aves de corral, los medicamentos altamente sensibles deben combinarse con métodos de administración apropiados, dosis suficientes y ciclos de tratamiento suficientes para lograr buenos efectos terapéuticos.

2. Los resultados de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos son solo como referencia clínica para seleccionar medicamentos altamente sensibles. Debido a la influencia del cuerpo del animal y el medio ambiente, la tasa de coincidencia entre las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos y los efectos del tratamiento clínico es generalmente del 70 al 80%, y no se puede confiar demasiado en las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos. Si el efecto no es evidente, el apósito debe cambiarse a tiempo.

3. El fármaco de elección determinado mediante pruebas de susceptibilidad a fármacos no es estático. A medida que aumenta el uso de medicamentos y se dispone de nuevos medicamentos especializados, es posible que las bacterias ya no sean sensibles a medicamentos que originalmente eran muy sensibles. Por lo tanto, es necesario realizar pruebas de susceptibilidad a los medicamentos con regularidad para comprender la sensibilidad de las bacterias en este campo a los medicamentos antibacterianos.

4. Para los problemas que los antibióticos de espectro reducido pueden resolver, no elija antibióticos de amplio espectro. Cuando un antibiótico es terapéutico, no utilice dos medicamentos juntos. Cuando se deben utilizar dos antibióticos, se debe elegir una combinación sinérgica.

5. Evitar drogas usadas o similares. Por lo general, no se utilizan medicamentos utilizados durante la enfermedad.

IV.Factores que afectan los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos

Los siguientes factores afectarán los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos con el método del disco:

1. : En primer lugar, seleccione un medio de cultivo apropiado según los requisitos nutricionales de las bacterias de prueba. La diferencia en la composición del medio de cultivo no sólo afecta el crecimiento y la reproducción de cepas sensibles, sino que también afecta el diámetro de la zona de inhibición. Se puede utilizar agar nutritivo común para bacterias comunes, como Escherichia coli y Staphylococcus aureus; se deben seleccionar placas sin peptona para las pruebas de sensibilidad a las sulfas; se pueden utilizar placas de agar con sangre de oveja para Streptococcus y Pasteurella. En segundo lugar, al verter la placa, el espesor debe ser el adecuado (unos 5-6 mm) y no demasiado fino. Generalmente, es apropiado verter 18-20 ml de medio de cultivo en una placa de Petri con un diámetro de 90 mm. Deben evitarse en el medio de cultivo las sustancias antagonistas de los fármacos antibacterianos, como los iones de calcio y magnesio, que pueden reducir la actividad antibacteriana de los aminoglucósidos, mientras que la timidina y el ácido paraaminobenzoico (PABA) pueden antagonizar la actividad de las sulfonamidas y el TMP.

2. Cantidad de inóculo bacteriano: La cantidad de inóculo bacteriano debe ser constante. Si hay demasiada, la zona de inhibición se hará más pequeña y las cepas productoras de enzimas destruirán la actividad antibacteriana del fármaco.

3. Concentración del fármaco: La concentración y la cantidad total del fármaco afectan directamente los resultados de la prueba antibacteriana y requieren una preparación precisa. Los medicamentos disponibles comercialmente deben formularse estrictamente de acuerdo con las dosis terapéuticas recomendadas.

4. Tiempo de cultivo: La temperatura general y el tiempo de cultivo bacteriano son 37°C durante 12-24 horas. Algunos fármacos antibacterianos como la polimixina se difunden lentamente. El medio de cultivo con papel sensible a los medicamentos se puede colocar en un refrigerador a 4°C durante 2 a 4 horas para esparcir previamente los medicamentos antibacterianos, y luego colocarse en una incubadora a 37°C para el cultivo, lo que puede retrasar el crecimiento bacteriano y obtener una zona de inhibición más evidente.

Problemas en las pruebas de sensibilidad a los medicamentos del verbo (abreviatura de verbo)

En la actualidad, todavía existen algunos problemas en las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, que incluyen principalmente los siguientes aspectos:

1.La metodología no está unificada y no existe estandarización.

2. Los medios de cultivo y los papeles sensibles a los medicamentos que se ofrecen en el mercado carecen de un control de calidad estricto y la calidad es difícil de garantizar. Por lo tanto, se recomienda fabricar su propio papel fotosensible según sea necesario.

3. Debido a que las bacterias deben aislarse y cultivarse primero, informar los resultados de las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos lleva mucho tiempo y existe una falta de comunicación entre las pruebas y la práctica clínica.

Para las estaciones veterinarias de base o las granjas de cría, los resultados de sensibilidad a los medicamentos no pueden cumplir con los requisitos para el tratamiento clínico y es fácil retrasar las oportunidades de tratamiento. Sin embargo, según informes pertinentes, también se pueden realizar pruebas sencillas de susceptibilidad a los medicamentos. El método es el siguiente: tomar asépticamente parte del hígado, el bazo y otros tejidos del ganado y las aves de corral muertos, añadir solución salina fisiológica en una proporción de 1:5, triturar hasta obtener una suspensión, dejar reposar durante 5 minutos, utilizar un recipiente esterilizado. Paja para absorber la suspensión y agregue dos gotas de nutrición. Distribuya uniformemente sobre la placa de agar, pegue papel de prueba de susceptibilidad a los medicamentos después de 5 minutos, incube y observe el tamaño de la zona de inhibición.

4. Algunas bacterias o microorganismos con altos requerimientos nutricionales, como Streptococcus y Mycoplasma, son difíciles de cultivar clínicamente, lo que limita la aplicación de pruebas de susceptibilidad a medicamentos.

5. Algunas granjas o estaciones veterinarias de base carecen de la conciencia necesaria para realizar aislamientos bacterianos, cultivos y pruebas de sensibilidad a los medicamentos. La gran mayoría de agricultores o técnicos utilizan antimicrobianos sin un diagnóstico microbiológico claro. Cuanto más pequeña es la granja, menos cultivos bacterianos y pruebas de sensibilidad a los medicamentos se realizan. Algunas granjas utilizan a su vez una variedad de medicamentos antibacterianos sin realizar cultivos bacterianos ni pruebas de susceptibilidad a los medicamentos, lo que resulta en una eficacia deficiente, retrasos en las oportunidades de tratamiento y desperdicio de medicamentos. En algunos casos, las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos no se realizan antes de la medicación, pero el cultivo bacteriano y las pruebas de susceptibilidad a los medicamentos se realizan solo cuando una gran cantidad de medicamentos antibacterianos no tienen un efecto obvio. En este momento, las bacterias se han vuelto resistentes a múltiples medicamentos antibacterianos.