La cinobupsina es un fármaco antitumoral clásico en mi país. Para explorar el mecanismo de la inyección de cinobufosina contra las células cancerosas del hígado, los investigadores

(1) En el cultivo de células animales, generalmente se agrega una cantidad adecuada de suero al medio sintético para complementar la falta de sustancias en el medio sintético. Para prevenir la contaminación bacteriana en cultivos de células animales, se pueden agregar cantidades apropiadas de antibióticos al medio de cultivo. El propósito de cambiar periódicamente el medio de cultivo es evitar que la acumulación de metabolitos cause daño a las propias células. Al mismo tiempo, también deben garantizarse unas condiciones ambientales adecuadas, como temperatura, pH, oxígeno y dióxido de carbono.

(2) ① RT-PCR es una reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa. El principio fundamental es extraer el ARN total de las células de cáncer de hígado, sintetizar el ADNc bajo la acción de la transcriptasa inversa y luego utilizar el ADNc como plantilla para la amplificación por PCR. Durante el proceso de amplificación por PCR, es necesario agregar cebadores, ADN polimerasa resistente al calor (enzima Taq) y cuatro desoxinucleótidos.

② Se puede ver en el gráfico que cuanto mayor es la concentración de cinobufonina, menor es la expresión del gen Topo ⅱ y el contenido de Topo ⅱ en las células tumorales es significativamente mayor que el de las células normales. Se puede especular que el mecanismo por el cual la inyección de cinobufosina afecta a las células HepG-2 del cáncer de hígado a nivel genético es inhibir la transcripción/expresión del gen Topoⅱ, lo que en última instancia conduce a una reducción en el contenido de Topoⅱ.

Entonces la respuesta es:

(1) Los antibióticos séricos (plasma) evitan que la acumulación de metabolitos dañe el valor del pH de las propias células.

(2)①Primer de transcripción inversa, ADN polimerasa termoestable (enzima Taq) y cuatro desoxinucleótidos.

(2) Inhibe la transcripción del gen Topoⅱ, lo que en última instancia conduce a una disminución en el contenido de Topoⅱ.