¿Qué son los residuos de monosacáridos?

Compuestos de polisacáridos

El polisacárido es uno de los componentes químicos contenidos en Ganoderma lucidum. Se ha demostrado que el polisacárido de Ganoderma lucidum tiene efectos antitumorales, inmunomoduladores, hipoglucemiantes, hipolipidémicos, antioxidantes y antienvejecimiento. Por lo tanto, el polisacárido de Ganoderma lucidum es el principal ingrediente activo de Ganoderma lucidum. Los ensayos clínicos también han confirmado que el polisacárido de Ganoderma lucidum se puede utilizar como una terapia adyuvante eficaz para la quimioterapia y radioterapia tumoral. La investigación sobre el aislamiento, la purificación y la confirmación de la estructura de los polisacáridos de Ganoderma lucidum está en ascenso y sigue siendo un tema importante en el país y en el extranjero.

1. Aislamiento, purificación e identificación de polisacáridos de Ganoderma lucidum

Los métodos y pasos para el aislamiento, purificación y confirmación de la estructura de polisacáridos de Ganoderma lucidum se pueden resumir de la siguiente manera: extracción con agua caliente y la precipitación fraccionada se usa comúnmente para aislar polisacáridos de Ganoderma lucidum. Los polisacáridos purificados se pueden obtener mediante procesamiento adicional, como cromatografía en columna de celulosa DEAE, cromatografía en columna Sephadex G75, filtración en gel como filtración en gel Sepharose Cl-4B, electroforesis de alto voltaje y poliacrilamida. electroforesis en gel. La composición de monosacáridos de estos últimos puede determinarse mediante hidrólisis ácida, cromatografía en papel y cromatografía de gases, y la estructura de los anómeros puede detectarse mediante hidrólisis enzimática. El modo de conexión y la estructura química básica de los polisacáridos se pueden determinar mediante tecnología de metilación, degradación de Smith, cromatografía de gases, cromatografía de gases-espectrometría de masas, análisis espectroscópico ultravioleta e infrarrojo, resonancia magnética nuclear y otros métodos. El peso molecular de los polisacáridos se puede determinar mediante cromatografía en columna de gel, como la cromatografía en columna Sephade AXG-100, ultracentrifugación y medición del coeficiente de sedimentación. En términos generales, el peso molecular promedio se puede obtener después de determinar el rango de peso molecular.

2. Propiedades físicas y químicas de los polisacáridos de Ganoderma lucidum

Debido a los diferentes tipos, orígenes y métodos de extracción de Ganoderma lucidum, las propiedades físicas y químicas, el peso molecular, la composición y conexión de los monosacáridos Los métodos de los polisacáridos de Ganoderma lucidum son diferentes y la actividad también es diferente. Según Hiroshi et al. (1985), se obtuvieron dos polisacáridos, A y B, a partir del extracto en agua caliente de los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum después de concentración, diálisis y cromatografía en serie. El peso molecular del polisacárido A de Ganoderma lucidum es 9300 y la rotación óptica [α] d+58,8. El peso molecular del polisacárido B de Ganoderma lucidum es 3600 y la rotación óptica [α]+33,3. ratones. Posteriormente, aislaron dos ingredientes hipoglucemiantes activos, los polisacáridos B y C de Ganoderma, de los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum. Ambos son glicopéptidos con pesos moleculares de 7.400 y 5.800 respectivamente. Los estudios físicos y químicos muestran que el polisacárido B de Ganoderma lucidum contiene una cadena principal de glucopiranosilo β-1→3 y una cadena lateral β-1→6, y el polisacárido C de Ganoderma lucidum contiene enlaces D-glucopiranosilo β-1→3 y β-1→6. y D-galactopiranosil α-65438. Mizuno Ayaka et al (1986) informaron que los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum se extrajeron con 85% de etanol (80°C), agua caliente (100°C), 3% de oxalato de amonio (100°C) y 5% de hidróxido de sodio (30). °C), y el residuo se extrajo con reutilización de hidróxido de sodio al 5%. A y B se separaron con etanol, se precipitaron con ácido acético y se filtraron en gel con Sepharose CL-4B para obtener cuatro tipos de β-glucanos, de los cuales I y II provinieron de A, III y IV provinieron de B, y quitosano (V ) se separó de c. , I-V se puede tratar con ácido fórmico al 80 % (85 °C) para obtener los polisacáridos formilados correspondientes y los polisacáridos de bajo peso molecular. I-IV se compone principalmente de glucosa y una pequeña cantidad de ácido urónico, xilosa y manosa, con una cadena principal de β-(1→3)-D-glucano y una cadena lateral de β-(1→6)glucosilo. son 330.000, 60.000, 160.000 y 6.544 respectivamente. La diferencia es que la vía intravenosa no contiene xilosa pero sí un 1,2% de proteína. Después de la hidrólisis ácida, V contiene principalmente glucosamina y una pequeña cantidad de glucosa, que se demuestra que es quitosano mediante análisis de espectro infrarrojo y rayos X. Los ratones inyectados por vía intraperitoneal con ésteres de formiato de ⅱ, ⅲ y ⅲ y polisacáridos de bajo peso molecular de ⅰ-ⅳ mostraron actividad antitumoral mediada por el huésped, con tasas de inhibición tumoral media (ID50) de 42,5 mg/kg y 34,1 mg/kg respectivamente. , 70,2 mg/kg, 22,4 mg/kg, 17,0 mg/kg. Mizuno Ayaka et al. (1985) informaron que después de extraer los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum con agua, el residuo se extrajo con una solución de oxalato de amonio al 3% (100 °C) y una solución de hidróxido de sodio al 5% (30 °C) para obtener dos soluciones acuosas. Polisacáridos insolubles A y B. a. Concentración al vacío, diálisis, liofilización y filtración en gel Shepharose CL-48 para obtener el componente principal C. B. Neutralizar con ácido acético a pH 5-6 para obtener heteropolisacárido ácido D. Precipitar con etanol para obtener glicoproteína E y otro heteropolisacárido.

c está compuesto de β-D-glucano ácido, que contiene 77% de glucosa, 10,3% de ácido glucurónico y una pequeña cantidad de fructosa, xilosa, manosa y galactosa, con un peso molecular de 10.000 a 30.000. El procedimiento de separación de D es el mismo que el de A. Contiene dos componentes principales: G y H. G y H son ambos heteropolisacáridos ácidos, que contienen 92% y 95% de glucosa, 9,7% y 65,438+03,0% de ácido glucurónico respectivamente. Y una pequeña cantidad de fructosa, xilosa, manosa y lactosa, con un peso molecular de 70.000 ~ 65.438+000.000. La inyección intraperitoneal de A-H en ratones mostró actividad antitumoral contra S180, y la dosis antitumoral del 50% fue (6,3 ~ 26,3) mg/kg, pero la administración oral fue ineficaz. De 1989 a 1994, Li Rongzhi y He Yunqing informaron que los polisacáridos de Ganoderma BN3A, BN3B, BN3C y GL-A, GL-B y GL-C se obtuvieron de los cuerpos fructíferos de Ganoderma mediante extracción con agua caliente, precipitación por fraccionamiento con etanol, diálisis y desproteinización. Además, a través de cromatografía en columna de celulosa DEAE, hidrólisis enzimática, hidrólisis ácida, oxidación de peryodato, generación de ácido fórmico, degradación de Smith, cromatografía de gases, cromatografía líquida de alta presión y análisis espectroscópico, de BN3B, BN3C, GL-A, GL-B 65,438+08 Se aislaron e identificaron polisacáridos de Ganoderma lucidum a partir de GL-C, de los cuales se integraron 5 peptidoglicanos, 4 glucanos y el resto.

Tabla 6-4 Estructura química y peso molecular del polisacárido de Ganoderma lucidum

Integral unánime

Composición química

Peso molecular

BN3B

BN3B1

β(1→6)β(1→3)

Dextrano

3.50×104

BN3B2

β(1→6)β(1→3)

Arabinogalactano

4.00×104

p >

BN3C

BN3C1

β(1→6)β(1→3)

Glucano

1,62×104

BN3C2

β(1→6)β(1→3)

Peptidoglicano

2,45×104

< El ácido p>γ-linolénico

GLA2

Peptidoglicano

0,93×104

GLA4

están todos dominados. por β(1→3).

Heteropolisacárido

1,33×104

GLA6

Contiene una pequeña cantidad de β(1→6) y β(1→4 ).

Peptidoglicano

1,28×104

GLA7

Principalmente galactosa y glucosa.

Heteropolisacárido

1,20×104

GLA8

Peptidoglicano

1,48×104

GLB

GLB2

β(1→4) es dominante, β(1→6) todavía existe.

Dextrano

0,71×104

GLB3

β(1→4) es dominante, β(1→6) raro.

Mannoglucano

0,77×104

GLB4

β(1→4)

Heteropolisacárido

0,90×104

GLB6

β(1→4) contiene un grupo acetilo.

Heteropolisacárido

0,88×104

GLB7

β(1→4) es dominante, β(1→6) sigue siendo existir.

Heteropolisacárido

0,90×104

GLB9

β(1→4) es dominante.

Galactoglucano

0,93×104

GLB10

β(1→4)β(1→6) contiene acetilo.

Heteropolisacáridos

0,68×104

Cromatografía gas-líquido

GLC1

β(1→4 ) Una pequeña cantidad de β(1→6)

Peptidoglicano

0,57×104

GLC2

Una pequeña cantidad de β(1 →4) β(1→6) contiene un grupo acetilo.

Dextrano

0,60×104

Mizuno Ayaka et al. (1982) extrajeron con agua caliente, precipitaron con etanol y sometieron a cromatografía de intercambio iónico y pH. -El componente polisacárido A dependiente se obtuvo a partir de micelio de Ganoderma lucidum cultivado artificialmente mediante tratamiento con acetato de etilo, filtración en gel y purificación por cromatografía de afinidad Con A-Sepharose GL-4B. La estructura química del polisacárido se estudió más a fondo mediante metilación, RMN, oxidación del periodato, degradación de Smith y descomposición de la β-D-glucanasa. El componente α-glucano tiene una cadena principal de glucósido α(1→4), y cada 9 a 12 residuos de la cadena principal están conectados a ramas α(1→6). Tiene sólo una actividad antitumoral débil. El componente β-glucano tiene una cadena principal de glucósido β(1→3), y cada 12 residuos de la cadena principal están conectados a una rama de glucósido monosacárido a través de β(1→6). Uno de ellos mostró una actividad anti-ratón S180 significativa con una dosis antitumoral del 50% de 0,74 mg/kg.

Ayaka Mizuno y Miyazaki extrajeron polisacáridos con actividad antitumoral de Ganoderma lucidum, ganoderma rojo y ganoderma púrpura respectivamente. y determinó su estructura química básica.

En términos de actividad antitumoral, no existen diferencias entre especies en los polisacáridos de Ganoderma lucidum. Al igual que los polisacáridos obtenidos de otros hongos, tienen las siguientes tres características:

1. El peso molecular de la estructura primaria es superior a 3×105.

2. El polímero está conectado por la cadena principal del residuo β-1-3-D y los residuos de la cadena lateral de β-1-6-D-glucosa. Sin embargo, el polisacárido β-1-6-D-glucosa extraído de diferentes hongos tiene diferentes grados de ramificación. La proporción de residuos de la cadena principal y residuos de la cadena lateral del polisacárido de Ganoderma lucidum es de 5:2, es decir, cada residuo de la cadena principal rodea. dos residuos de β-glucosa. El 1-3-β glucano sin cadena lateral 1-6β no tiene actividad antitumoral.

3. La estructura helicoidal tridimensional del polisacárido interviene en su actividad antitumoral, y la destrucción de esta estructura afectará a su actividad.