¿Cómo extraer exosomas y analizar su idoneidad?

El método de extracción de exosomas depende del propósito específico del estudio, el tipo de muestra fuente y las capacidades experimentales y la experiencia del investigador. Los siguientes son algunos métodos de extracción de exosomas comúnmente utilizados y su análisis de aplicabilidad como referencia:

1.

Principio: Los restos celulares y las partículas grandes se precipitan gradualmente mediante diferentes velocidades de centrifugación y finalmente se aíslan los exosomas con un diámetro de entre 30 y 150 nm.

Ventajas: Sencillo y fácil, no requiere equipo especial.

Desventajas: La eficiencia de extracción no es alta y requiere múltiples centrifugaciones para eliminar las impurezas.

Aplicabilidad: Adecuado para la extracción de exosomas de fluidos corporales (como plasma, orina).

2. Centrifugación en gradiente de densidad.

Principio: Mediante centrifugación en gradiente de densidad (como glucosa, sacarosa, etc.), los exosomas se separan en capas de diferente densidad.

Ventajas: La pureza de extracción es alta y se pueden separar subpoblaciones de exosomas de diferentes densidades.

Desventajas: La operación es relativamente compleja y requiere un largo tiempo de centrifugación.

Aplicabilidad: Adecuado para la extracción de exosomas a partir de fluido o suero de cultivo celular.

3. Cromatografía de exclusión por tamaño.

Principio: Las moléculas de la muestra se separan mediante una columna de cromatografía de exclusión molecular y los exosomas se separan de los componentes macromoleculares.

Ventajas: La pureza de extracción es alta y se pueden separar exosomas de diferentes tamaños simultáneamente.

Desventajas: Requiere equipo especial y operación compleja.

Aplicabilidad: Adecuado para la extracción de exosomas a partir de fluido o suero de cultivo celular.

4. Kit de enriquecimiento de exosomas (ExoQuick).

Principio: Utilice un material polimérico especial para enriquecer los exosomas en un pequeño volumen.

Ventajas: La operación es sencilla y rápida, y se pueden extraer exosomas de fluidos corporales sin centrifugación.

Desventajas: La eficiencia de extracción es relativamente baja.

Aplicabilidad: Adecuado para el enriquecimiento rápido de exosomas a partir de fluidos corporales (como plasma, orina).

La elección del método de extracción de exosomas debe determinarse en función de los requisitos experimentales y las características de la muestra para obtener los mejores resultados.