Pasos de la terapia celular dirigida mediante ingeniería genética

Al conectar fragmentos del código genético del ADN de un organismo con las hebras de ADN de otro organismo y recombinar el ADN, podemos diseñar nuevo material genético y crear nuevos tipos de organismos según los deseos humanos. Este tipo de ingeniería genética generalmente incluye cuatro pasos: obtener un fragmento de ADN que cumpla con los requisitos humanos, llamado "gen diana"; construir un vector de expresión para el gen; introducir el gen diana en la célula receptora; y detectar e identificar el gen diana; . Sólo mediante la detección e identificación se puede saber si el gen diana puede mantener y expresar de manera estable sus características genéticas después de ser introducido en las células receptoras. Este es un paso hacia la prueba del éxito de la ingeniería genética.

En primer lugar, es necesario detectar si el gen diana está insertado en el ADN del cromosoma del organismo genéticamente modificado. El método consiste en utilizar tecnología de hibridación molecular de ADN, es decir, extraer el ADN genómico de organismos genéticamente modificados, marcar el fragmento de ADN que contiene el gen objetivo con isótopos radiactivos y utilizarlo como sonda para hibridar la sonda con el ADN genómico. Si aparece una banda de hibridación, indica que el gen diana se ha insertado en el ADN cromosómico. Este método recibió el nombre de "Sello del Sur" en honor a su descubridor.

En segundo lugar, también es necesario detectar si el gen diana ha transcrito ARNm. El método de detección también es una tecnología de hibridación molecular. La diferencia con el método anterior es que necesita extraer el ARNm de organismos genéticamente modificados y etiquetarlo para su detección. Este método se llama impresión "Norte" debido a su nombre.

Finalmente, se comprueba si el gen diana se traduce en proteína. Este método consiste en extraer proteínas de organismos genéticamente modificados y realizar una hibridación antígeno-anticuerpo con los anticuerpos correspondientes. Si aparece una banda de hibridación, significa que el gen objetivo ha formado un producto proteico. Este enfoque se convirtió en una huella "occidental".