¿Qué instalaciones deben incluirse en la sala de amortiguación de un laboratorio de amplificación genética?
En la actualidad, las esquinas interiores yin y yang de las placas de acero de colores principales y los perfiles de aleación de aluminio en el laboratorio están hechos de aleación de aluminio redondeado R50, lo que resuelve los problemas de fácil contaminación, acumulación de polvo y fácil limpieza. La estructura de placa de acero de color es fuerte, simple, hermosa y sellada.
2. Ajuste estándar de la presión del aire en cuatro zonas:
Preparación de reactivos de PCR, preparación de muestras, área de amplificación de PCR y área de detección y análisis de productos, corredor de amortiguación de área completa, cada área experimental independiente Configure una zona de amortiguamiento y el ajuste de la presión del aire se conecta a cada área para evitar que las muestras de reactivo en todo el experimento de PCR se contaminen con aerosoles y reducir la contaminación ambiental de los productos de amplificación.
3. Desinfección:
Instalar lámparas ultravioleta en la parte superior de las cuatro zonas de amortiguamiento y en las ventanas de transmisión de la cuarta área experimental para su desinfección.
El área de preparación de reactivos y el área de preparación de muestras están equipadas con mesas experimentales con lámpara ultravioleta para la desinfección local.
4. Ventana de transmisión de acero inoxidable con cadena mecánica:
Las muestras de reactivo se entregan a través de una ventana de entrega de acero inoxidable con enclavamiento mecánico (se recomienda enclavamiento eléctrico) para garantizar que el proceso de entrega de las muestras de reactivo no está contaminado (logística).
5. Cara
Se recomienda utilizar superficie de membrana de PVC o superficie autonivelante. La integridad facilita la limpieza y resiste la corrosión. Utilice incondicionalmente superficies de terrazo o baldosas cerámicas (al menos 800 mm × 800 mm). Las costuras deben ser de 2 mm.
6. Equipos de iluminación
Las lámparas deben estar depuradas para facilitar la limpieza y la acumulación de polvo.
Además:
Área de trabajo de doble función del laboratorio de PCR: el área de amplificación de ácidos nucleicos y el área de preamplificación incluyen una sala de preparación de reactivos; las dos salas de esta sala de preparación pueden comunicarse entre sí; otros de forma independiente La presión del aire externo de las dos salas está bajo presión; el área de amplificación de ácido nucleico, incluida el área de análisis de productos del área de amplificación, utiliza un instrumento de PCR de fluorescencia en tiempo real y un medidor de carga viral del VIH; El laboratorio combina las dos salas; las dos salas deben tener una comunicación independiente y mutuamente excluyente; la presión del aire externo en el área amplificada está bajo presión negativa.
De acuerdo con las funciones de los instrumentos utilizados, el laboratorio de PCR configura razonablemente cada área de trabajo para adoptar la reacción en cadena de la polimerasa: se configuran cuatro áreas independientes: área de almacenamiento y preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y el área de análisis del producto de amplificación en el área de trabajo, se debe agregar el producto a triturar si se usa PCR de fluorescencia verdadera: el área de amplificación de base y el área de análisis del producto de base se fusionan en el interior; procesamiento de muestras, extracción de ácidos nucleicos y detección de amplificación El principio de combinar el área de preparación de muestras, el área de amplificación y el área de análisis de productos de amplificación con el laboratorio regional de PCR es establecer cinco o cuatro áreas o tres o dos áreas de trabajo independientes.
Antes de la amplificación de ácidos nucleicos, el área de la sala de amplificación de ácidos nucleicos debe cumplir los siguientes requisitos:
Antes de la amplificación de ácidos nucleicos, se instalan dos áreas experimentales en el laboratorio, y los reactivos en la misma ubicación se configuran en Limpiar productos operativos del banco de trabajo en gabinetes de seguridad.
El área de amplificación de ácidos nucleicos utiliza un sistema de detección de amplificación completamente cerrado, un instrumento de PCR de fluorescencia verdadera, etc.
Cada experimentador utiliza sus propios reactivos, consumibles y pipetas para controlar la contaminación.
Antes del experimento se debe limpiar y desinfectar la zona operatoria.
Los reactivos, instrumentos, instrumentos y equipos de cada área se utilizan de manera específica en esa área.
3. Requisitos de flujo de aire y diferencia de presión
La dirección del flujo de aire del laboratorio de PCR debe seguir estrictamente la presión de aire del área de preparación y almacenamiento de reactivos → área de preparación de muestras → área de amplificación. → área de análisis de productos de amplificación La fórmula que disminuye gradualmente evita que los productos de amplificación ingresen al área de preamplificación a lo largo del flujo de aire, causando caos en la velocidad del viento y la dirección del flujo.
Para garantizar la diferencia de presión interna en la habitación y evitar la contaminación, se debe indicar claramente en el panel de aire acondicionado que primero se debe interrumpir el orden de encendido y apagado del ventilador y del extractor. .
La diferencia de presión estática entre el nivel de limpieza del aire y las habitaciones adyacentes debe ser de 5 Pa. La diferencia de presión estática entre la sala (área) limpia y el exterior debe ser de 10 Pa. Se deben equipar y monitorear periódicamente equipos para monitorear las diferencias de presión estática.
En circunstancias normales, la sala de preparación de reactivos y la sala de procesamiento de productos deben estar ligeramente presurizadas para evitar que entre y contamine aire que contiene aerosoles de ácido nucleico. El efecto de presión se logra controlando el volumen de entrada y salida de aire.
La sala de amplificación de ácidos nucleicos y la sala de análisis de productos deben estar en un estado de presión ligeramente negativa para evitar la propagación y contaminación de aerosoles que contienen ácidos nucleicos. Los reactivos y productos deben controlar el volumen de escape al volumen de entrada de aire para lograr un efecto de presión negativa.
Lo ideal es que el laboratorio de PCR amortigue la presión interior establecida para que el aire interior fluya hacia el aire exterior que lleva al laboratorio de PCR interior. La entrada de aire está controlada por el aire acondicionado central original y es necesario instalar la salida de aire del aire acondicionado central en un punto designado.
4. Área de laboratorio y espaciado de equipos
En general, no existen requisitos estrictos para el área de cada sala, se debe poder colocar los instrumentos y equipos necesarios. facilitar la operación del personal. El área de la habitación de un gabinete de seguridad física puede ser de 10 metros cuadrados. Por cada habitación adicional del gabinete de seguridad física, el área de la habitación debe aumentarse en 10 metros cuadrados.
El área de la sala intermedia de cada laboratorio es de 1300*(1300 o 1500) mm, y el área de la sala intermedia puede ser 1/8 del área de la sala del laboratorio.
A la hora de realizar diseño gráfico, primero se deben considerar los lugares donde son propensos a ocurrir explosiones, incendios, fugas de gas, etc. en los laboratorios de seguridad. Al realizar diseño gráfico, trate de mantener el laboratorio bien ventilado y las rutas de escape despejadas. De acuerdo con los estándares internacionales de ingeniería, planeo hacer referencia a:
El banco de pruebas y el banco de pruebas deben estar marcados con canales estándar (el espacio entre canales está representado por L).
L gt500mm funcionamiento de pie;
L gt800mm funcionamiento sentado de lado;
L gt1200mm funcionamiento sentado y de pie
L gt1500mm ambos; lados de la sala de estar;
L gt1800 mm en ambos lados del instrumento en la sala de estar
La plataforma y la plataforma del instrumento deben estar demasiado cerca de la pared, a 400 mm de la pared, lo cual es Peligroso para trabajar y fácil de evacuar. Todos los túneles de la plataforma experimental deberían conducir al corredor. Además, la altura del edificio del laboratorio debe ser de 3,7 m a 4,0 m, y la altura libre debe ser de 2,7 m a 2,8 m. Para requisitos especiales como limpieza, gradiente de presión, temperatura y humedad constantes, etc., la altura libre del laboratorio. El laboratorio debe tener entre 2,5 y 2,7 m (incluido el techo suspendido). El ancho libre del pasillo del laboratorio debe ser de 2,5 a 3,0 m, el ancho de las puertas dobles de laboratorio ordinarias debe ser de 1,1 a 1,5 m (llamadas puertas) y el ancho de una sola puerta debe ser de 0,8 a 0,9 m.
5. Requisitos de limpieza y decoración
La superficie interior de la sala (área) limpia debe ser lisa, agrietada, con juntas herméticas, partículas que se caigan y capaz de resistir la limpieza y desinfección. Las juntas entre paredes y superficies deben ser curvadas o se deben tomar medidas para reducir la acumulación de polvo para facilitar la limpieza.
El diseño e instalación de diversas tuberías, lámparas, salidas de aire e instalaciones públicas en la sala (área) limpia deben evitar piezas que sean fáciles de limpiar.
Las conexiones entre ventanas, cobertizos y tuberías interiores, salidas de aire, lámparas y paredes o cobertizos en la sala (área) limpia deben estar selladas.
6. Requisitos de la ropa de trabajo
Los trabajadores del taller de depuración deberán utilizar ropa de trabajo que cumpla los requisitos. La selección, el estilo y el estilo de uso de la ropa de trabajo deben ser consistentes con los requisitos del nivel de limpieza del aire en las operaciones de producción. La ropa de trabajo limpia debe ser suave, generar electricidad estática y desprender partículas de fibra. Los monos antimicrobianos deben cubrir todo el cabello, la barba y los pies y evitar su caída. La ropa de trabajo con el mismo nivel de limpieza del aire debe lavarse, desinfectarse o esterilizarse. La ropa de trabajo debe lavarse y desinfectarse con partículas adicionales. Se deben establecer ciclos de limpieza.
El acceso a todas las zonas debe ser estrictamente unidireccional. Utilice la misma ropa de trabajo (por ejemplo, del mismo color) en la misma área de trabajo. Los trabajadores deberán dejar puestos los cinturones de su ropa de trabajo.
El laboratorio debe establecer un sistema de gestión para los procedimientos de limpieza de los artistas que ingresan al área limpia, y los procedimientos de limpieza de los artistas deben ser razonables.
Siete. Ruta de flujo y ruta logística
El personal que ingresa al área del laboratorio debe seguir la siguiente ruta:
Zona pública limpia - vestuario (cambio para ropa limpia) - sala de amortiguamiento - área experimental contaminada
El camino para que el personal salga del laboratorio:
Área de prueba de contaminación - sala de amortiguación - cuarto de ducha (establecimiento de condiciones) - vestuario - área limpia pública
Artículo entrada Cuando esté en el área experimental, debe pasar a través de la ventana de transferencia de doble hoja entrelazada y solo después de que la ventana de transferencia haya sido desinfectada podrá ingresar al laboratorio.
Todos los artículos deben pasar por la ventana de transferencia antes de ser transferidos a un área común limpia fuera del laboratorio.
8. Dirección de apertura de la puerta
La altura del edificio del laboratorio debe ser de 3,7 m a 4,0 m, y la altura libre del laboratorio de PCR debe ser de 2,5 m a 2,7 m (incluido). techo suspendido); la altura libre del pasillo del laboratorio debe ser de 2,5 a 3,0 m, el ancho de las puertas dobles en los laboratorios comunes debe ser de 1,1 a 1,5 m (llamadas puertas) y el ancho de las puertas simples debe ser de 1,1 a 1,5 m. ser de 0,8 a 0,9 m.
Laboratorios generales La puerta da principalmente a la habitación peligrosa y el material de la puerta exterior debe ser vidrio a presión.
La dirección de apertura de la cámara de gradiente de presión debe ser hacia el lado de presión;
Teniendo en cuenta la seguridad contra incendios, la puerta de escape principal debe abrirse hacia el área limpia.
9. Consideraciones sobre el equipo básico
(1) Área de preparación de almacenamiento de reactivos
El área experimental se utiliza principalmente para operación, almacenamiento, preparación de reactivos, carga de reactivos y reacciones principales Preparación de la mezcla. Los materiales utilizados para la producción de reactivos deben enviarse directamente a esta área. Las materias primas de los reactivos deben almacenarse en esta área, y los reactivos de almacenamiento requeridos y la presión del flujo de aire deben controlarse en esta área. La presión externa debe mantenerse baja.
Los instrumentos y equipos en el área de preparación de reactivos deben utilizar principalmente un banco de trabajo limpio como plataforma de operación de preparación de reactivos, como alimentadores, refrigeradores, máquinas fuera de máquina de placa plana de baja velocidad, mezcladores, lámparas UV móviles, etc. .
(2) Área de preparación de muestras
Esta área se utiliza principalmente para la conservación de libros de operaciones, extracción y conservación de ácidos nucleicos (ARN, ADN) y su adición a los tubos de reacción de amplificación. Determinar el gradiente de presión en la región de fusión del ADN. Requisito: Se debe evitar la presión relativa a las áreas adyacentes para evitar que las áreas adyacentes entren en la zona de contaminación por aerosol. Además, se debe evitar la contaminación provocada por los aerosoles generados durante las operaciones.
Los instrumentos y equipos de la zona de preparación de muestras deben colocarse principalmente en armarios de seguridad (B2). Además de evitar la contaminación cruzada entre muestras de circulación repetida en la cabina de extracción de ácidos nucleicos, también existen alimentadores, separadores de sobremesa de alta velocidad (congelación y calentamiento), separadores de sobremesa de baja velocidad, termostatos (baños de agua/o baños secos), Frigoríficos, batidora mueve lámpara UV.
(3) Amplificación y análisis de productos de amplificación
En esta área, agregue la plantilla de ADN preparada (del área de preparación) a la mezcla de reacción principal (del área de preparación de almacenamiento de reactivos). ) para preparar la mezcla de reacción, etc. Los requisitos del gradiente de presión en esta área son los siguientes: se debe minimizar la presión negativa relativa a las áreas adyacentes para evitar fugas de aerosol y contaminación por aerosol, y las operaciones de separación necesarias en esta área se deben realizar en un banco limpio.
El instrumento principal en el área de amplificación, el termociclador de amplificación de ácido nucleico (instrumento de PCR, instrumento de fluorescencia verdadera o instrumento ordinario), debe estar especialmente equipado con una fuente de alimentación regulada o UPS para evitar la influencia del voltaje. amplificación y medición de ondas, y equipado con máquina sumadora, mesa ultralimpia, etc. Según las necesidades del trabajo.
Área de análisis de productos: Se pueden agregar instrumentos y equipos utilizados en esta área, como aparato de electroforesis (tanque), aparato de electrotransferencia, horno de hibridación o caja de hibridación, baño maría, secuenciador de ADN, máquina de limpieza de etiquetas enzimáticas, etc.