Análisis bioinformático de genes relacionados con enfermedades u otros genes de interés
Además, a veces la expresión de los genes de susceptibilidad a enfermedades no cambia en sí misma, sino que desempeña un papel regulando otros genes. Por tanto, la búsqueda de genes causantes de enfermedades debe partir de muchos aspectos.
Si hay alguna falacia en mis puntos de vista, por favor dímelo. Gracias, muy bien hermano. Mi primer paso podría ser simplemente cambiar el perfil de expresión. Si tuviera la oportunidad de hacer esto, como dijiste, debería considerar todos los aspectos. Mi idea actual es utilizar la tecnología de chips genéticos de perfiles de expresión para proporcionar información general sobre las diferencias en los perfiles de expresión genética entre pacientes y personas normales. Como le dijo maxon, encontrar un nuevo gen relacionado con una enfermedad puede ser posible o no. Creo que es al menos un aspecto (no sé si es correcto). Lo único en lo que puedo pensar ahora es en cómo organizar mis pensamientos y venir a hacer bien este trabajo. Todavía quedan algunas preguntas por hacer:
1. En cuanto al método para establecer una biblioteca de genes, por ejemplo, en un artículo se seleccionaron 1118 genes para la investigación, que se dividieron en genes conocidos, secuencias conocidas, y genes desconocidos esperan. Con BLAST, no entiendo cómo lo seleccionaron a partir de una biblioteca de genes (transcripción inversa a partir de ARNm de células completas). (¿O lo encontraste en otros lugares?), entiendo que parece estar directamente secuenciado. ¿Cómo encontrar (aislar) estos genes del banco de genes y secuenciarlos uno por uno?
2. ¿Cómo utilizar BLAST? Por ejemplo, ¿cómo encontrar la secuencia genética del perfil de expresión de 1118 células trabeculares que se ha determinado en el mismo artículo? ¿Puedes explicármelo? ¡Muchas gracias!
¿Notaste algún problema? Los chips genéticos sólo pueden detectar genes o secuencias conocidas, pero no pueden detectar los desconocidos. Andrew tiene razón, pero la cantidad de genes en el chip aumenta a medida que se profundiza en la investigación genética. Para la investigación general se pueden incluir básicamente los principales canales conocidos. Gracias por tu consejo. ¿Alguien puede responder a mi pregunta anterior? Todavía no entiendo. No he entendido la información después de leerla durante un día.
Me gustaría preguntar: si personalizo un chip (que incluye 1118 genes) de la población normal y encuentro que un gen está regulado negativamente o no se expresa en la hibridación con la muestra de ADNc del paciente, ¿qué ¿la razón? ¿De verdad no tienes expresión o algo así?
Gracias. Gracias. ¿Las muestras son consistentes? Por ejemplo, las células sanguíneas, ¿son comparables sus subpoblaciones celulares?
¿Hay alguna comparación? La muestra fue aleatoria y las células trabeculares fueron células endoteliales homogéneas. Por control, ¿se refiere a control negativo, control positivo o control interno de la transcripción?
Sé muy poco y puedo cometer errores estúpidos. Por favor dame tu consejo. Además de los errores en los experimentos y en los chips de ADN, en la hibridación con la muestra de ADNc del paciente se encontró que un gen estaba regulado negativamente o no se expresaba, lo que debe ser verificado mediante RT-PCR. La regulación negativa o la falta de expresión puede deberse a la regulación de sus genes ascendentes o puede deberse a cambios en la estructura del gen mismo, como mutaciones sin sentido, donde se puede detectar una expresión reducida. Una vez que estos genes se confirman mediante RT-PCR, es necesario secuenciarlos para ver si hay alguna anomalía estructural en estos genes. Con la ayuda diaria del webmaster y mis camaradas, finalmente pasé de no saber nada sobre el tema que estoy solicitando a tener algunos conocimientos sobre él y terminé de escribir la solicitud para el Fondo de Ciencias Naturales. Antes de mañana se enviará la aplicación que hemos condensado el sudor y la sabiduría de todos. Me gustaría expresar mi más sincero agradecimiento por vuestra ayuda estos días. Aunque es la primera vez que escribo una aplicación de este tipo, todavía siento que he aprendido mucho y he hecho muchos buenos amigos, aunque esto es casi imposible.
Adjunto el texto de esta solicitud. Espero que los amigos interesados puedan echarle un vistazo y dar algunas opiniones valiosas, porque creo que todavía vale la pena abordar un tema así, aunque es posible que no tengamos la oportunidad o la capacidad de hacerlo.
¡Gracias de nuevo!
88411-.doc lt/A gt; (76.5k) ¡Felicitaciones por su solicitud exitosa! ! Gracias a los webmasters por su orientación diaria y gracias a todos los camaradas.
Recientemente han comenzado las solicitudes de fondos para investigación científica y el jefe está solicitando urgentemente el proyecto. Como soy nuevo en la fundación, me gustaría preguntarle al webmaster y a mis compañeros.
Actualmente, 1 ha detectado una enfermedad rara de un solo gen (epilepsia) y no hay informes clínicos ni básicos en China. Se han completado los trabajos clínicos, incluida la recogida de muestras de sangre.
Desde 1998 se ha localizado y clonado el gen causante, pero existe heterogeneidad genética y los sitios de mutación de un mismo gen causante también son diferentes. Se han publicado muchos artículos en revistas autorizadas como Nature Heredity. Las últimas investigaciones muestran que existen otros genes desconocidos que causan enfermedades.
3 Los laboratorios colaboradores tienen experiencia en la localización y clonación exitosa de genes que causan enfermedades.
El propósito de nuestra aplicación es localizar y clonar genes que causan enfermedades, con la esperanza de descubrir nuevos genes que causan enfermedades.
Me gustaría preguntarle:
1. ¿Puedo presentar una solicitud únicamente utilizando datos clínicos en este momento?
2¿Qué más trabajo queda por hacer?
Si es así, ¿cuáles son las posibles razones por las que la solicitud falló?
¡Gracias, espero tus consejos! Gracias. Si se trata de una enfermedad de un solo gen, depende del pedigrí familiar que recopile. También está la cuestión de si su diagnóstico clínico es correcto. No soy una persona clínica y este diagnóstico clínico significa mucho. Si algunos de ellos se diagnostican o tipifican erróneamente, es probable que no se encuentren enfermedades monogénicas. Las estrategias técnicas en esta área están muy maduras y hay muchos documentos de referencia. También hay muchas instituciones de investigación en el país. Quiero estudiar la relación entre los SNP genéticos y las enfermedades. Hay informes en el extranjero de que existen dos vínculos. Entonces, ¿debería hacer un análisis RFLP o un análisis SNP? Hola chicos, actualmente estoy mapeando genes relacionados con enfermedades en una familia genética ligada al cromosoma X. Ahora he escaneado dos loci del genoma con marcadores (STR), pero tengo dificultades con el análisis de ligamiento. Estoy usando enlace (versión 5.1). Me gustaría preguntarle ¿cuál es la diferencia entre los parámetros genéticos del enlace neutro y el enlace autosómico en el análisis de ligamiento? Espero tus consejos, muchas gracias! Quiero estudiar la relación entre los SNP genéticos y las enfermedades. Hay informes en el extranjero de que existen dos vínculos. Entonces, ¿debería hacer un análisis RFLP o un análisis SNP?
RFLP es el marcador genético más temprano (primera generación). Con el desarrollo de la genética y el creciente número de fragmentos de secuenciación, han surgido marcadores genéticos de segunda y tercera generación. El RFLP se analiza mediante digestión enzimática, que es sencilla y barata, pero tiene poca especificidad y se elimina fácilmente. El posicionamiento de SNP es claro y relativamente costoso, y puede analizarse mediante secuenciación, instantáneas, sondas fluorescentes, chips SNP y otros métodos.
El análisis RFLP o análisis SNP específico depende de sus objetivos de investigación y su solidez financiera. Por favor, sea muy bueno, ¿puede presentar una pequeña secuencia (instantánea)?
Recientemente quiero probar la relación entre un gen y una enfermedad. Hay muchos exones (20) y han aparecido puntos críticos de mutación en otras enfermedades (exones 9, 11, 13 y 17), pero la enfermedad que quiero estudiar aún no se ha informado. ¿Debo secuenciar todos los exones? Kou Dan escribió:
Muy bien, por favor, ¿puedes presentarnos la pequeña secuencia (instantánea)?
Recientemente quiero probar la relación entre un gen y una enfermedad. Hay muchos exones (20) y han aparecido puntos críticos de mutación en otras enfermedades (exones 9, 11, 13 y 17), pero la enfermedad que quiero estudiar aún no se ha informado. ¿Debo secuenciar todos los exones?
Snapshot es una pequeña reacción de secuenciación. Su principio es simplemente amplificar una plantilla de ADN que contiene SNP, luego purificar el producto de la PCR, agregar ddNTP y una sonda intermedia con diferente fluorescencia (la llamada sonda intermedia es The. secuencia oligonucleotídica de aproximadamente 20 pb de SNP, la sonda y el ddNTP se combinan de acuerdo con la secuencia plantilla (debido a que es ddNTP, el ddNTP unido reacciona con el SNP), y luego se purifican y se someten a electroforesis, de modo que el SNP correspondiente pueda juzgarse en función de la diferencia en el genotipo de fluorescencia.
Este método es adecuado para la confirmación de alelos SNP conocidos y tiene bajos requisitos de sondas; sin embargo, existen muchos pasos operativos y es difícil de aplicar a gran escala (la carga de trabajo es relativamente pequeña cuando se usa); métodos de secuenciación capilar, como la serie de secuenciadores ABI3100).
Para detectar la relación entre un gen y una enfermedad, existen muchos exones (20), y otras enfermedades tienen puntos calientes de mutación (exones 9, 11, 13 y 17). Se recomienda que primero investigue estos loci. Por supuesto, si la secuencia del gen es muy corta, también se puede secuenciar directamente, porque los SNP o mutaciones encontrados actualmente son solo aproximadamente 2 de los valores esperados.
Te deseo buena suerte, muchas gracias :)
He estado ocupado defendiendo mi tesis recientemente. Soy un completo novato en esta área, pero mi jefe me dijo que innovara y mis compañeros me dieron esta idea.
Se ha extraído y genotipado el ADN. Pero quiero estar seguro mediante la secuenciación. La instantánea mencionada anteriormente es una secuenciación a pequeña escala. He identificado el sitio de la mutación y el fragmento tiene aproximadamente 300 pb. ¿Puedo ordenarlos todos?
Además, ¿es posible secuenciar todas las muestras o seleccionar solo unos pocos heterocigotos y homocigotos para su verificación? ¿De dónde vino esta información? Todavía soy un novato: (no tengo nada que hacer más que mirar a mi alrededor y escribir:
Muchas gracias:)
He estado ocupado defendiendo mi tesis recientemente. Soy un completo novato en esta área, pero mi jefe me dijo que innovara y mis compañeros me dieron esta idea.
Se ha extraído y genotipado el ADN. Pero quiero estar seguro mediante la secuenciación. La instantánea mencionada anteriormente es una secuenciación a pequeña escala. He identificado el sitio de la mutación y el fragmento tiene aproximadamente 300 pb. ¿Puedo ordenarlos todos?
Además, ¿es posible secuenciar todas las muestras o simplemente seleccionar algunos heterocigotos y homocigotos para demostración? ¿De dónde vino esta información? Todavía soy un novato: (
Si solo hay 300pb y no hay muchas muestras, es mejor secuenciar directamente, porque no solo se pueden identificar los genotipos de SNP conocidos, sino que también se pueden identificar algunos no reportados. Por cierto, también se puede descubrir, lo que significa que es necesario secuenciar todas las muestras.
Si solo desea genotipar los SNP conocidos, puede utilizar el método de instantánea. Por supuesto, también puede utilizar RFLP. , pero la especificidad es menor y las bandas obtenidas no necesariamente coinciden con el objetivo. Los diferentes alelos de SNP están relacionados y pueden cortarse en otras regiones del cromosoma.
No hay información cierta en esta área. Después de hacerlo, entenderemos gradualmente qué tipo de tecnología se debe utilizar según las condiciones locales.
Para detectar la relación entre un gen y una enfermedad, existen muchos exones (20) y otras enfermedades. tiene puntos calientes de mutación (exones 9, 11, 13 y 17). Por supuesto, si la secuencia del gen es muy corta, también se puede secuenciar directamente, porque se encuentra el SNP o la mutación. hasta ahora es solo alrededor de 2 del valor esperado.
Gracias, muy bien señor. La región codificante del gen que estudié tiene 2930 pb y el ARNm tiene 5084 pb, la longitud total del gen. es de 80 kb. Planeé secuenciarlo directamente, pero había 18 casos en el grupo de pacientes (parafina) y 20 casos en el grupo de control (¿qué tal el ADN de sangre periférica?), ¡así que ahora quiero cambiarlo por PCR-SSCP plus! secuenciación de bandas anormales ¿Estás de acuerdo? verygood escribió:
Si solo hay 300 pb y no hay muchas muestras, es mejor secuenciarlas directamente, porque no solo se puede identificar el genotipo SNP conocido, sino también. también se puede descubrir por cierto. Algunos no se informan, es decir, se deben secuenciar todas las muestras.
Si solo se desea genotipar los SNP conocidos, se puede utilizar el método de instantánea, y por supuesto. Por supuesto, también se puede utilizar RFLP, pero es más específico. Las bandas obtenidas no están necesariamente relacionadas con diferentes alelos del SNP objetivo y se pueden cortar en otras regiones del cromosoma. No hay información cierta al respecto, y debe comprenderse gradualmente después de hacerlo. ¿Qué tipo de tecnología se utiliza para detectar mutaciones después de la secuenciación? ¿Existen libros de bioestadística especiales? su método debería ser factible.
Nada que hacer:
Después de la secuenciación, las mutaciones se seleccionan principalmente mediante comparación de secuencias, que se puede realizar a través de Blast. Sin embargo, es necesario tener cautela para determinar si efectivamente se trata de una mutación y ampliar la muestra para la investigación de tipificación. Para la investigación relacionada con enfermedades, hay muy pocos casos y controles. Generalmente, las revistas nacionales cuestan entre 200 y 200 y las revistas extranjeras cuestan entre 400 y 500 a 500. Las revistas de primera clase suelen tener al menos entre 1.000 y 1.000. Como no tiene fondos suficientes para realizar la secuenciación, simplemente elija un sitio conocido. Debido a que este gen está relacionado con muchas enfermedades, significa que está muy conservado y puede estar relacionado con la enfermedad que estás estudiando. Incluso si no es relevante, siempre puede utilizar la edad, el sexo y los factores de riesgo de enfermedades para analizar y publicar artículos de manera exhaustiva.
La búsqueda de SNP en genes relacionados con enfermedades se realiza actualmente principalmente mediante secuenciación directa (ADN extraído de sangre periférica, en lugar de tejido), comparando las secuencias genéticas de pacientes y personas normales (personas sin enfermedad). Busque SNP. La explosión mencionada por verygood en realidad no se aplica.
Se puede diseñar un par de cebadores 1 para la región donde se encuentra el SNP objetivo de modo que el SNP esté ubicado dentro de él y la longitud de la PCR sea de aproximadamente 500 pb. Al mismo tiempo, se diseñó un par de PRIMER2 en el área cubierta por PRIMER1. La base del extremo 3' de un cebador del Cebador 2 debe ser complementaria a la base normal del sitio SNP objetivo, de modo que si el paciente tiene una mutación en este sitio, un par de cebadores del Cebador 2 no se amplificarán. Además, la distancia entre el cebador 2 y el cebador 1 es de al menos 100 BP, y el producto del cebador 2 es mayor que 200 BP. De esta forma, cuando estos dos pares de cebadores se ponen en una reacción de PCR al mismo tiempo, se pueden obtener cuatro fragmentos (al diseñar los cebadores, las longitudes de estos cuatro fragmentos deben ser diferentes para facilitar la diferenciación durante la electroforesis), mientras que los Si un individuo con el SNP objetivo solo tiene tres fragmentos, se puede determinar si el individuo tiene una mutación mediante electroforesis.
Olvidé el nombre específico de este método. Espero que esto ayude. Markson escribió:
La búsqueda de SNP en genes relacionados con enfermedades se realiza actualmente principalmente mediante secuenciación directa (ADN extraído de sangre periférica, en lugar de tejido), comparando pacientes con personas normales (personas sin la enfermedad). Secuencia genética para encontrar SNP. La explosión mencionada por verygood en realidad no se aplica.
Se puede diseñar un par de cebadores 1 para la región donde se encuentra el SNP objetivo de modo que el SNP esté ubicado dentro de él y la longitud de la PCR sea de aproximadamente 500 pb. Al mismo tiempo, se diseñó un par de PRIMER2 en el área cubierta por PRIMER1. La base del extremo 3' de un cebador del Cebador 2 debe ser complementaria a la base normal del sitio SNP objetivo, de modo que si el paciente tiene una mutación en este sitio, un par de cebadores del Cebador 2 no se amplificarán. Además, la distancia entre el cebador 2 y el cebador 1 es de al menos 100 BP, y el producto del cebador 2 es mayor que 200 BP. De esta forma, cuando estos dos pares de cebadores se ponen en una reacción de PCR al mismo tiempo, se pueden obtener cuatro fragmentos (al diseñar los cebadores, las longitudes de estos cuatro fragmentos deben ser diferentes para facilitar la diferenciación durante la electroforesis), mientras que los Si un individuo con el SNP objetivo solo tiene tres fragmentos, se puede determinar si el individuo tiene una mutación mediante electroforesis.
Olvidé el nombre específico de este método. Espero que esto ayude.
Jaja, quise usar blast para facilitar la comparación de secuencias. Por supuesto, los biosistemas aplicados tienen mejor software, pero es difícil de conseguir sin comprar el equipo correspondiente.
En cuanto al número de ejemplares, cuantos más mejor. Para un sitio patógeno con un riesgo relativo de 2, la eficiencia de detección de 1000 casos y controles puede llegar a 100, y la eficiencia de detección disminuirá a medida que disminuya el número de casos. Pero para la investigación preliminar, no está claro si el sitio está relacionado con la enfermedad que se está estudiando, por lo que una inversión a gran escala puede no generar ganancias.
Para referencia. Hoy, Ji Kang sugirió que secuenciara las muestras directamente para formar un "grupo" para el examen y ahorrar dinero. Su sugerencia inicial fue formar un "grupo" de pacientes normales y pacientes respectivamente, y luego usar TAG MAN (una nueva tecnología) de la compañía para detectar SNP a gran escala, pero no tengo tantas muestras de pacientes. Así que sólo tenemos que ordenarlo.
¿Puedes echarle un vistazo a esto? Si divido a 25 pacientes en 6 "grupos", ¿se pueden clasificar y luego analizar?
Gracias de antemano. Markson escribió:
La búsqueda de SNP en genes relacionados con enfermedades se realiza actualmente principalmente mediante secuenciación directa (ADN extraído de sangre periférica, en lugar de tejido), comparando pacientes con personas normales (personas sin la enfermedad). Secuencia genética para encontrar SNP. La explosión mencionada por verygood en realidad no se aplica.
Se puede diseñar un par de cebadores 1 para la región donde se encuentra el SNP objetivo de modo que el SNP esté ubicado dentro de él y la longitud de la PCR sea de aproximadamente 500 pb. Al mismo tiempo, se diseñó un par de PRIMER2 en el área cubierta por PRIMER1. La base del extremo 3' de un cebador del Cebador 2 debe ser complementaria a la base normal del sitio SNP objetivo, de modo que si el paciente tiene una mutación en este sitio, un par de cebadores del Cebador 2 no se amplificarán. Además, la distancia entre el cebador 2 y el cebador 1 es de al menos 100 BP, y el producto del cebador 2 es mayor que 200 BP. De esta forma, cuando estos dos pares de cebadores se ponen en una reacción de PCR al mismo tiempo, se pueden obtener cuatro fragmentos (al diseñar los cebadores, las longitudes de estos cuatro fragmentos deben ser diferentes para facilitar la diferenciación durante la electroforesis), mientras que los Si un individuo con el SNP objetivo solo tiene tres fragmentos, se puede determinar si el individuo tiene una mutación mediante electroforesis.
Olvidé el nombre específico de este método. Espero que esto ayude.
Jaja, gracias. Lo que vi en la literatura relevante es que se diseñaron dos cebadores (mutados y no mutados), y los otros cebadores antisentido eran los mismos. Los cebadores diseñados para el grupo de control normal son muy similares al PROMER2 que mencionaste. Quiero saber por qué hago esto. verygood escribió:
Nada que hacer:
Después de la secuenciación, las mutaciones se detectan principalmente mediante comparación de secuencias, que se puede realizar a través de Blast. Sin embargo, es necesario tener cautela para determinar si efectivamente se trata de una mutación y ampliar la muestra para la investigación de tipificación.
Definitivamente es imposible sacar una conclusión, sólo plantear una perspectiva. Después de la secuenciación, puede utilizar el software SEQUENCEMAN para el análisis, pero quiero agregar un RFLP más adelante, según informes de la literatura relevante. Este análisis parece estar respaldado por más datos. Kou Dan escribió:
Hoy, Ji Kang sugirió que secuenciara las muestras directamente para formar un "grupo". Su sugerencia inicial fue formar un "grupo" de pacientes normales y pacientes respectivamente, y luego usar TAG MAN (una nueva tecnología) de la compañía para detectar SNP a gran escala, pero no tengo tantas muestras de pacientes. Así que sólo tenemos que ordenarlo.
¿Puedes echarle un vistazo a esto? Si divido a 25 pacientes en 6 "grupos", ¿se pueden clasificar y luego analizar?
Gracias de antemano.
Jaja, ¿tú también trabajaste en Jikang? Parece que utilizan sondas para detectar SNP. Escuché que la precisión de las sondas no es tan buena como la de la secuenciación directa. ¿Me pregunto qué consejo te dieron? :) Markson escribió:
Para la investigación relacionada con enfermedades, hay muy pocos casos y controles. Generalmente, las revistas nacionales cuestan entre 200 y 200 y las revistas extranjeras cuestan entre 400 y 500 a 500. Las revistas de primera clase suelen tener al menos entre 1.000 y 1.000. Como no tiene fondos suficientes para realizar la secuenciación, simplemente elija un sitio conocido. Debido a que este gen está relacionado con muchas enfermedades, significa que está muy conservado y puede estar relacionado con la enfermedad que estás estudiando. Incluso si no es relevante, siempre puede utilizar la edad, el sexo y los factores de riesgo de enfermedades para analizar y publicar artículos de manera exhaustiva.
5555555, pero no puedo aceptar tantos casos y mis fondos son limitados.
¿Qué significa crear directamente un sitio conocido? Además, ¿has leído algún libro sobre bioestadística? Escuché que puede consultarlo para análisis relacionados. ¿Qué biblioteca o librería en Shanghai lo tiene? Olvidé el método específico. La estadística se refiere principalmente a dos tipos de pruebas T y métodos de análisis del polimorfismo X2:
Primero, basado en el análisis familiar, se utiliza principalmente el método del desequilibrio de ligamiento.
En segundo lugar, basado en casos y controles, como dijo maxon, principalmente prueba t y X2. Sin embargo, se debe prestar atención a si el control es representativo de la población muestreada. Los resultados falsos positivos debidos a errores de muestreo abundan en la literatura antigua, lo que gradualmente ha atraído la atención de todos.
Nada se dio la vuelta y escribió:
Jaja, ¿tú también lo hiciste en Ji Kang? Parece que utilizan sondas para detectar SNP. Escuché que la precisión de las sondas no es tan buena como la de la secuenciación directa. ¿Me pregunto qué consejo te dieron? :)
Parece que no hacer nada es muy similar a mí, ¡así que puedo comunicarme más!
Jikang Company propuso que debería haber 25 personas en cada grupo y 25 personas en el grupo de control (solo se reunieron 25 personas, un grupo de 4 personas formaría un "grupo", por lo que utilizaron PCR). para amplificar los exones y secuenciarlos directamente. (Ahorre dinero)
Shenneng recomienda que cada paciente sea amplificado y secuenciado directamente para compararlo con el genbank (excluyendo el grupo de control, el costo es de 18.000 yuanes/10 casos).
Compañía Beijing Dingguo: PCR-SSCP, (normal, 25 pacientes en cada grupo)
Por favor, pregunte a verygood, maxon y otros camaradas para discutir cuál es factible.
Pide ayuda a Bamboo. Kou Dan escribió:
Parece que no hacer nada es muy similar a mí, ¡así que podemos comunicarnos más!
Jikang Company propuso que debería haber 25 personas en cada grupo y 25 personas en el grupo de control (solo se reunieron 25 personas, un grupo de 4 personas formaría un "grupo", por lo que utilizaron PCR). para amplificar los exones y secuenciarlos directamente. (Ahorre dinero)
Shenneng Company recomienda la secuenciación de amplificación directa para cada paciente y compararla con genbank (excluyendo el grupo de control, el costo es de 18.000 yuanes/10 casos).
Compañía Beijing Dingguo: PCR-SSCP, (normal, 25 pacientes en cada grupo)
Por favor, pregunte a verygood, maxon y otros camaradas para discutir cuál es factible.
Pide ayuda a Bamboo.
Tengo 30 casos, frente a 12. La sugerencia de la gente es secuenciar directamente. Quiero hacer un RFLP después de la secuenciación. Debido a que necesito escribir un artículo, no puede faltar el contenido.