¿Cuáles son los métodos de prueba microbiológica?
Muestras
Debido a la naturaleza altamente contagiosa de la peste, se deben realizar procedimientos asépticos estrictos al recolectar muestras. Según el tipo de enfermedad, tome líquido de punción de los ganglios linfáticos, líquido tisular del área inflamada, pus, sangre y esputo. La sangre del hígado, el bazo, los pulmones, los ganglios linfáticos enfermos y el corazón se puede obtener de cadáveres humanos y animales. La médula ósea se extrajo de un cadáver viejo. Las muestras recolectadas serán enviadas a laboratorios especializados con estrictas medidas de protección para las pruebas y están prohibidas las operaciones en laboratorios generales.
Baciloscopia directa
Además de las muestras de sangre, generalmente se requieren frotis o impresiones. Después del secado, se fijan con metanol, se tiñen con Gram o Lumeilan y se examinan al microscopio. . Las bacterias varían mucho en tamaño y morfología en diferentes materiales. Además de la morfología típica, las bacterias suelen ser polimórficas y requieren atención.
Aislamiento, cultivo e identidad
Las muestras de sangre deben colocarse primero en caldo para el cultivo de enriquecimiento. Las placas de agar sangre se utilizan generalmente para cultivos de aislamiento. Después de 24 horas a 28°C, se pueden ver colonias de gotas de rocío más pequeñas. Después del cultivo continuo, la colonia aumentará de 1 a 2 mm, con un centro grueso y una periferia gradualmente más delgada. Las colonias sospechosas se identificaron mediante microscopía de tinción de frotis, prueba de lisis de fagos, prueba de aglutinación de suero y tinción con anticuerpos fluorescentes específicos.
Las pruebas séricas
se pueden utilizar para detectar antígenos de Y. pestis o anticuerpos específicos. Los métodos de detección sensibles y específicos incluyen ELISA, radioinmunoensayo en fase sólida, prueba de aglutinación colaborativa SPA, etc.
Detección de ácido nucleico
Utilizar la hibridación de sondas de ADN o PCR para detectar el ácido nucleico de Yersinia pestis es útil en el diagnóstico de la peste. La sensibilidad de la PCR es extremadamente alta y las infecciones por Y. pestis en pulgas se pueden detectar mediante la tecnología de PCR.
Pruebas diagnósticas
Diagnóstico: Dependiendo del historial de exposición del paciente y de la afectación pulmonar, el diagnóstico etiológico depende de la tinción de Gram y el cultivo de esputo, sangre o aspirados de ganglios linfáticos. Si las condiciones lo permiten, la tinción directa con anticuerpos marcados con fluoresceína puede proporcionar un diagnóstico etiológico rápido.