¿Cuáles son los factores técnicos que afectan los resultados de los experimentos con animales?
Seleccionar animales de experimentación adecuados para la investigación es un paso importante para obtener resultados experimentales correctos y exitosos. Se deben seleccionar los animales apropiados de acuerdo con los requisitos de los diferentes experimentos. Si realiza una investigación sobre tumores, debe saber qué animales son especies con alto índice de cáncer, cuáles son especies con bajo nivel de cáncer y cuál es la tasa de incidencia de tumores espontáneos en varios animales. Por ejemplo, los ratones de la cepa A, la cepa y la cepa ⅱ son cepas altamente cancerígenas, y la cepa /He tiene entre un 80 y un 100% de cáncer de mama espontáneo en ratones hembra. Los ratones AKR de 8 a 9 meses tienen enfermedades hematológicas espontáneas. La cepa C57BL, la cepa Jinbai ⅰ y otros ratones son cepas con bajo nivel de cáncer. Aunque diferentes animales a menudo responden de manera similar a los mismos factores, a menudo se encuentran respuestas específicas de cada animal. Por ejemplo, las perras mayores de 5 años a menudo desarrollan tumores de glándula mamaria espontáneos. Si se les inyecta progesterona, es más probable que se induzcan tumores de glándula mamaria. El estrógeno también tiende a causar anemia en los perros, lo cual es poco común en otros animales de laboratorio. Cómo elegir un buen animal de experimentación se puede ver en la selección y aplicación de animales de experimentación.
Segunda temporada experimental
Muchas funciones de los organismos cambian regularmente con las estaciones. Actualmente existe una gran cantidad de datos que muestran que las respuestas de los animales a las sustancias químicas también se ven afectadas por la estación. Por ejemplo, a 10 ratas se les inyectó una cierta cantidad de barbitúricos en las cuatro estaciones: primavera, verano, otoño e invierno, y se descubrió que el tiempo para conciliar el sueño era más corto en primavera. El otoño es el más largo, pero el tiempo de sueño es todo lo contrario, siendo la primavera la más larga y el otoño el más corto (ver Tabla 11-19).
Tabla 11-19 Cambios estacionales en la respuesta de las ratas a los barbitúricos.
Tiempo de sueño estacional (minutos) tiempo de sueño (minutos)
Primavera 56.1.1.0470 34,0
Verano 93,5 11,3 242 14,3
Otoño 120,0 19,0 190 18,7
Invierno 66,5 8,2 360 33,0
En diferentes estaciones experimentales, la reactividad de los animales cambia hasta cierto punto. Por ejemplo, las diferentes estaciones influyen en los efectos de la radiación. La sensibilidad a la radiación de los conejos aumenta en primavera y verano y disminuye en otoño e invierno. En experimentos con perros, la mortalidad después de la exposición en primavera y verano fue mayor que en otoño e invierno. La sensibilidad a la radiación de los ratones aumentó significativamente en invierno y verano y disminuyó a principios de verano y verano. No hubo fluctuaciones estacionales significativas en la sensibilidad a la radiación de las ratas. Por lo tanto, se debe prestar atención a esta fluctuación estacional al realizar experimentos crónicos entre estaciones.
En tercer lugar, el proceso circadiano
Algunas funciones del cuerpo también cambian regularmente durante el día y la noche. Por ejemplo, a los ratones se les inyectaron repetidamente por vía subcutánea 0,2 ml de una solución de tetracloruro de carbono al 40% y luego los animales fueron sacrificados en diferentes momentos del mismo día para observar la dinámica mitótica de las células hepáticas y comprender la reparación de la degeneración de las células hepáticas. Los resultados se enumeran en la Tabla 11-20. Los datos mostraron que los cambios diarios en la mitosis de las células hepáticas de ratón eran muy obvios.
Tabla 11-20 Cambios diurnos en el coeficiente mitótico (‰) de células hepáticas de ratón
Agrupa la hora del día y la noche
0 2 4 6 7 8 9 10
El grupo experimental es 2,4 1,22 6 1.21.02 0.17 4.1.27 0.26 0.06 1.36 0.25 0.66.
El grupo de control es 2,8 1,862 6 0,160,2 06,3 1,48 0,46 0,07 0,26 0,07 0,97 0,05 0,66 0,04.
La sensibilidad de los animales a la radiación varía de día y de noche, y esta sensibilidad se observa en ratones y ratas de diferentes géneros, cepas y edades. La sensibilidad a la radiación disminuye durante el día (menos muertes, mayor LD50/30, menos pérdida de peso, menos daño hepático) y aumenta durante la noche. Al mismo tiempo, en experimentos con ratones y ratas, además del pico durante la noche (de 21 a 24 horas), también se encontró que el daño aumentaba durante el día (de 9 a 12 horas para los ratones y de 15 a 24 horas). en punto para las ratas). La sensibilidad de disparo es más baja por la tarde y después de medianoche. A diferencia de los ratones, la sensibilidad a la radiación de las ratas fluctúa significativamente del día a la noche, pero no mucho.
Se ha demostrado mediante experimentos que la temperatura corporal, el azúcar en sangre, la tasa metabólica basal y la secreción de hormonas endocrinas de los animales de experimentación experimentan cambios en el ritmo circadiano. Por lo tanto, las observaciones de dichos experimentos deben contrastarse en consecuencia y se debe prestar atención al impacto de los resultados temporales de ciertos tratamientos en el experimento. Para obtener resultados experimentales comparables, todos los animales del grupo experimental deben recibir radiación u otros tratamientos al mismo tiempo.
En cuarto lugar, la concentración de la anestesia.
En los experimentos con animales, a menudo es necesario anestesiar a los animales antes de realizar diversas operaciones y experimentos. Se requiere que la concentración de anestésico sea moderada y permanezca constante durante todo el experimento. Por lo tanto, se debe utilizar el mismo anestésico según los requisitos experimentales y el tipo de animal (o cepa), y los anestésicos no se deben utilizar indiscriminadamente. Debido a que diferentes anestésicos tienen diferentes efectos farmacológicos y efectos secundarios, deben seleccionarse y usarse adecuadamente de acuerdo con los requisitos experimentales y las especies animales. El control de la concentración del anestésico es la garantía para completar con éxito el experimento y obtener resultados experimentales correctos. Si la anestesia es demasiado profunda, el animal se encontrará en un estado de supresión de la concentración o incluso de muerte, y se inhibirán las diversas reacciones normales del animal y no se producirán resultados experimentales confiables. Una anestesia demasiado superficial, una cirugía o experimentos con animales provocarán una fuerte estimulación dolorosa y provocarán cambios en todo el cuerpo, especialmente en las funciones respiratoria, circulatoria y digestiva del animal. Por ejemplo, una estimulación dolorosa puede detener la secreción pancreática durante mucho tiempo. Por tanto, la concentración del anestésico debe ser la adecuada. A partir de esto, no es difícil entender cuán necesario es mantener constante la concentración del anestésico durante todo el experimento, porque los cambios en la concentración del anestésico harán que los resultados experimentales sean inconsistentes y dificultarán el análisis de los resultados experimentales.
5. Habilidades quirúrgicas
En los experimentos con animales, no sólo debemos prestar atención a la selección de los animales de experimentación adecuados, la pureza de los reactivos utilizados, la sensibilidad de los instrumentos y la precisión de los métodos, pero también preste atención a las habilidades quirúrgicas, es decir, dominio de las técnicas operativas. La operación especializada puede reducir la estimulación y el trauma a los animales.