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La baja capacidad de la línea celular de tejo para sintetizar paclitaxel y su paso inestable son las principales razones que limitan su cultivo a gran escala. Hasta ahora, la producción de paclitaxel mediante cultivo de células de tejo ha alcanzado el nivel piloto, pero para lograr una producción a gran escala, la clave es aumentar el rendimiento del cultivo y el contenido de paclitaxel y seleccionar líneas celulares de alto rendimiento. Por lo tanto, el establecimiento de líneas celulares estables y de alto rendimiento y su tecnología de conservación estable son requisitos previos para la producción industrial.
La escasa capacidad de los clones de tejo para integrar paclitaxel y su incapacidad para transmitirse de forma estable son las principales razones que limitan su cultivo a gran escala. Hasta ahora, la producción de paclitaxel a partir de clones de tejo ha alcanzado el nivel piloto, pero para lograr una producción a gran escala, la clave es aumentar la producción de cultivo y paclitaxel seleccionando clones de alto rendimiento. Por lo tanto, el requisito previo para la producción industrial es el establecimiento de líneas celulares estables de alto rendimiento y una tecnología de almacenamiento estable.
El propósito de este estudio fue detectar líneas celulares productoras de paclitaxel mediante adición de precursores y mutagénesis UV. Los principales resultados son los siguientes:
El propósito de este estudio es detectar líneas celulares de paclitaxel de alta producción a partir de mutagénesis UV mediante el aumento de la detección de precursores. Los principales resultados obtenidos son los siguientes:
(1) Las células de tejo tienen una alta tolerancia al precursor fenilalanina, con acción lenta y larga duración. Cuando la concentración de fenilalanina alcanzó 4,0 mmol/L, el subcultivo ya no creció. Por lo tanto, la concentración óptima de detección es 3,0 mmol/L
(1). Las células de tejo tienen un nivel relativamente alto de tolerancia al precursor fenilalanina y se ven afectadas con bastante lentitud y durante mucho tiempo. Cuando la concentración de fenilalanina alcanza 4,0 mmol/l, el subcultivo no puede crecer, por lo que la concentración óptima para la filtración es 3,0 mmol/L
(2) Tolerancia de las células de tejo al precursor benzoato de sodio Baja potencia, acción rápida y de corta duración. Cuando la concentración de benzoato de sodio es de 0,5 mmol/L, las células crecen bien, pero el efecto de promoción no es obvio. Cuando la concentración de benzoato de sodio es de 1,5 mmol/L, las células no pueden crecer. Cuando la concentración de benzoato de sodio es de 1,0 mmol/L, el subcultivo no puede volver a crecer. Cuando la concentración de benzoato de sodio es de 0,5 mmol/L, el subcultivo puede volver a crecer. Por lo tanto, la concentración de detección óptima es de aproximadamente 0,5 mmol/L.
(2) La tolerancia de las células de tejo al precursor benzoato es relativamente baja y se ve afectada rápidamente y por un corto período de tiempo. Cuando la concentración de benzoato es de 0,5 mmol/L, las células crecen bien, pero el efecto de promoción no es evidente. Cuando la concentración de benzoato alcanza 1,5 mmol/L, las células dejan de crecer. Cuando la concentración de benzoato alcanza 1,5 mmol/L, el subcultivo no puede crecer y crece a 0,5 mmol/L. Por lo tanto, la concentración es de aproximadamente 0,5 mmol/L. L
(3) Es factible utilizar mutagénesis ultravioleta combinada con precursores para detectar líneas celulares de tejo de alto rendimiento. Cuando el benzoato de sodio es de 0 mmol/L, las células de tejo comienzan a crecer. Pero es aleatorio hasta cierto punto, por lo que no es seguro.
Es posible obtener líneas celulares de tejo de alto rendimiento combinando mutagénesis ultravioleta con detección de precursores, porque cuando la concentración de ácido benzoico es de 0 mmol/L, crecen nuevas células de tejo, sin embargo, debido a la aleatoriedad, es posible; Todavía es posible obtener una línea celular de tejo de alto rendimiento. No confirmado.