¿Se degradará la proteína si el tejido del ratón se mantiene a 4 grados Celsius durante unas horas?

Cuando el tejido del ratón se deja a temperatura ambiente durante la noche, tanto la proteína como el ARN se degradan

Se requieren inhibidores de proteasa y tampón de lisis para extraer la proteína total. Generalmente se prepara en una proporción de 1:1. El tampón de lisis que utilizamos es RIPA. El tejido se trituró en pedazos usando nitrógeno líquido y luego se añadió la solución de lisis en consecuencia. El volumen celular fue de aproximadamente 100 microlitros cuando se elevó a la potencia de 107. Lise en un baño de hielo durante 20 minutos (agite ocasionalmente). Luego centrifugar a 12000 rpm a 4 grados centígrados durante 15 minutos.

El tejido pancreático contiene muchos tipos de células. Para extraer ARN de las células del islote A, primero se deben separar las células del islote A de la población celular del tejido pancreático. Puede utilizar citometría de flujo o clasificación con perlas magnéticas, etc. Después de obtener células de los islotes A de alta pureza, simplemente use TRIZOL o un kit de extracción de ARN para extraer su ARN.