Recolección correcta y precauciones para muestras de examen microbiológico

Recogida correcta y precauciones de las muestras microbianas.

La recogida correcta de muestras microbianas clínicas afecta directamente a los resultados de la identificación del cultivo microbiano. Los resultados confiables de las pruebas pueden guiar el diagnóstico y el tratamiento clínicos, proporcionar una base para la medicación científica clínica y el control exitoso de las infecciones, y son el primer y más importante paso para usar los medicamentos antimicrobianos de manera correcta y racional, retrasar la resistencia bacteriana, reducir el abuso de los medicamentos antimicrobianos y monitorear las infecciones hospitalarias. Un paso importante. El siguiente es el conocimiento que les traigo sobre la recolección correcta y las precauciones de las muestras de pruebas microbiológicas. Bienvenido a leer.

1. Recogida de muestras de sangre

1. Método de recogida

(1) Limpiar la piel local con alcohol al 75%.

(2) Después de que la piel esté seca, use 2%-2,5% de yodo para desinfectar comenzando desde el centro del punto de punción. El rango no debe ser inferior a 5 cm (diámetro) y el área desinfectada. no se puede tocar con los dedos.

(3) Después de secar la piel con yodo (aproximadamente 1 minuto), punción y extracción de sangre. El volumen de sangre es de 5 a 10 ml para adultos y de 1 a 5 ml para bebés y niños pequeños.

(4) Inmediatamente después de la extracción de sangre, inocule el frasco de cultivo al lado de la cama, agítelo rápida y suavemente y mezcle bien para evitar la coagulación, pero no lo agite violentamente para evitar la hemólisis.

2. Precauciones

(1) Si se sospecha bacteriemia, se debe extraer sangre lo antes posible cuando la temperatura corporal aumenta (38,5 ℃) puede aumentar la tasa positiva. , pero también es necesario evitar Retrasar la oportunidad.

(2) Para aquellos que ya han usado medicamentos antibacterianos pero no pueden dejar de tomarlos, se debe extraer sangre antes de la siguiente dosis. No tome muestras de sangre de la vena donde se administran medicamentos antimicrobianos por vía intravenosa, ni extraiga sangre de catéteres venosos y cánulas arteriales.

(3) La proporción entre el medio de cultivo y la sangre es preferiblemente de 10:1 para diluir antibióticos, anticuerpos y otras sustancias bactericidas en la sangre. Algunas personas recomiendan que, para los pacientes que reciben tratamiento con medicamentos antibacterianos, se utilice el medio de cultivo y; El volumen de extracción de sangre debe ser La proporción puede ser 20:1 o mayor que esta proporción.

(4) Estudios recientes han demostrado que cambiar la aguja antes de inyectar sangre en el medio de hemocultivo puede provocar fácilmente una contaminación.

(5) Se debe extraer sangre de cada caso al menos dos veces, con un intervalo de 0,5 a 1 hora, para aumentar la tasa de positivos y distinguir las bacterias infecciosas de las contaminantes.

(6) Para pacientes con sospecha de endocarditis bacteriana y brucelosis, es aconsejable extraer sangre de la arteria cubital o de la arteria femoral. Además de la extracción de sangre durante el período de fiebre, la extracción de sangre debe realizarse varias veces. (24 horas 3-4 veces) y aumentar el volumen de extracción de sangre (se puede aumentar en 10 ml).

(7) Envíe la sangre para su análisis inmediatamente después de su extracción. Si no se puede enviar para su análisis inmediatamente, colóquela a temperatura ambiente en lugar de en el refrigerador.

(8) Si las manifestaciones clínicas son muy similares a la sepsis y el hemocultivo es negativo varias veces, se sugiere considerar la posibilidad de bacterias anaeróbicas e infección por hongos.

2. Recogida de médula ósea

1. Método de recogida

Extraer 1ml de médula ósea tras una estricta desinfección en el lugar de la lesión o en la ilíaca anterior (posterior) cresta e inyectar en frascos de hemocultivo.

2. Precauciones

(1) La médula ósea contiene una gran cantidad de células del sistema monocitos-macrófagos, por lo que el cultivo de médula ósea es superior al hemocultivo en el diagnóstico de la fiebre tifoidea. pacientes.

(2) Para pacientes con sospecha de osteomielitis bacteriana.

3. Recolección de muestras de catéter intravenoso

1. Método de recolección

(1) Desinfección cutánea de rutina del sitio del catéter.

(2) Retire el catéter intravenoso del paciente utilizando un método estéril, corte 5 cm de la punta del catéter y colóquelo en un frasco esterilizado.

(3) Enviar a inspección inmediatamente (dentro de los 15 minutos) para evitar que la muestra se seque.

2. Precauciones

(1) Inocular inmediatamente el catéter cortado en una placa de sangre para aumentar la tasa de positividad.

(2) El caldo se lava repetidamente en la luz del catéter y el líquido de lavado se utiliza para el cultivo cuantitativo.

(3) Alguien coloca el catéter cortado en una solución de enriquecimiento de caldo o en un frasco de cultivo. Este método no puede distinguir las bacterias que infectan el catéter de una pequeña cantidad de bacterias colonizadas.

(4) El Ministerio de Salud estipula en los "Estándares de Diagnóstico para Infecciones Médicas" (Ensayo) (implementado el 3 de enero de 2001): El método de inoculación para el cultivo de la punta del catéter debe ser tomar 5 cm del punta del catéter e inocularlo en la placa de sangre. La superficie rueda hacia adelante y hacia atrás una vez.

Las bacterias ≥15 ufc/placa se consideran positivas.

IV.Vías respiratorias

1. Muestras de esputo

(1) Método de recolección

① Enjuáguese la boca con agua fría después de la extracción. levantarse por la mañana Una vez, para eliminar una gran cantidad de bacterias diversas en la boca, tose el esputo purulento en lo profundo de los pulmones y colóquelo en un recipiente limpio y seco para su inspección.

②Para aquellos con muy poco esputo, se pueden atomizar aproximadamente 25 ml de solución de cloruro de sodio al 3%-10% a 45 ℃. En el caso de los niños pequeños que expectoran poco, puede comprimir suavemente la tráquea por encima del esternón y utilizar un hisopo de algodón esterilizado para recolectar muestras después de expectorar.

③Para pacientes con tos débil o coma, se puede usar un tubo de succión de esputo para aspirar el esputo a través de la cavidad nasal o la cavidad oral a través de la cavidad traqueal y enviarlo para su examen.

④ Los pacientes con traqueotomía pueden introducirse profundamente en el orificio de ventilación para recoger el esputo.

⑤ El broncoscopio se puede utilizar para recolectar bacterias patógenas en alta concentración directamente del sitio de la lesión.

⑥Inserte un catéter estéril en el broncoscopio a través de la cavidad nasal, inyecte lentamente 5 ml de agua destilada estéril y retire el catéter. Recoja el esputo tosido por el paciente en un plazo de 3 horas y colóquelo en un recipiente esterilizado para su inspección.

⑦El método para recolectar flema del estómago. Pacientes tuberculosos asintomáticos. A veces, la flema se puede tragar por error en el estómago, por lo que el lisado del estómago se puede utilizar para el cultivo de tuberculosis. El resultado positivo es aproximadamente un 10% mayor que el de la expectoración. Este método se realiza por la mañana con el estómago vacío insertando un tubo gástrico esterilizado. tubo a través de la cavidad nasal, colóquelo en el estómago y use una jeringa de 20 ml para extraer el jugo gástrico.

(2) Precauciones

① La recolección de muestras de esputo se basa en el esputo de la mañana, cuando los pacientes tienen más esputo y contienen más bacterias.

② Las muestras deben enviarse para inspección inmediatamente después de su recolección. Si no se pueden enviar para inspección a tiempo, se pueden almacenar temporalmente en un refrigerador a 2-8 ℃. Si se inocula 1 o 2 horas después, las bacterias cáusticas se perderán y las bacterias gramnegativas crecerán en exceso.

③Muestras aceptables: esputo; líquido de lavado bronquial, cepillo bronquial, biopsia bronquial y biopsia de pulmón; Muestras inaceptables: saliva; esputo retenido durante 24 horas (excepto cultivo de Mycobacterium tuberculosis);

④ Evaluación de la calidad de las muestras de esputo: (Pantalla con un microscopio) A baja potencia, verifique las células epiteliales escamosas, al menos 10 campos de visión, enfóquese en las áreas con glóbulos blancos. Las muestras calificadas son blancas. células sanguíneas y epitelio escamoso La proporción de células es superior a 2:1.

2. Hisopo nasal

(1) Utilice un hisopo húmedo (solución salina normal)

(2) Insértelo en ambas fosas nasales

(3) Profundice aproximadamente 3,3 cm y gire 4-5 veces

(4) Lo anterior se utiliza para diagnosticar portadores nasales durante un brote de Staphylococcus aureus.

3. Hisopo de garganta, hisopo oral

(1) Método de recolección (vaya a la sala de bacterias para tomar un hisopo especial)

①Después de que el paciente se enjuague boca con agua, el examinador saca la lengua hacia afuera y usa un hisopo de algodón para limpiar la pared posterior de la faringe o la parte posterior de la úvula varias veces

② En casos de amigdalitis supurativa y candidiasis oral, directamente Utilice un hisopo de algodón para limpiar el área de la lesión

③Insértelo en el medio de transporte y envíelo para inspección inmediatamente para evitar que se seque.

(2) Precauciones

① Los hisopos de algodón deben evitar tocar la lengua, la mucosa oral y la saliva.

② No utilizar desinfectantes varias horas antes de recoger las muestras. Enjuagar; boca o tocar el área afectada.

5. Tracto gastrointestinal

1. Heces

(1) Método de recogida

Seleccione 2-3 g de pus, sangre y moco heces, tomar 1-2 ml de flóculo de heces líquidas. Guárdelo en botellas esterilizadas o cajas de papel encerado y envíelo a inspección lo antes posible.

(2) Precauciones

① Las muestras deben recolectarse frescas; las muestras viejas afectarán la tasa de detección positiva

② No mezclar heces y orina <; /p >

③Si desea aislar la ameba, la muestra debe enviarse para su examen inmediatamente y mantenerla caliente

④El transporte del medio de cultivo puede aumentar la tasa positiva

⑤Aislar Clostridium; difficile es necesario elegir heces informes o acuosas

⑥ La diarrea causada por la infección por Vibrio cholerae y Escherichia coli Ο157 es heces acuosas o con sangre

⑦ La muestra se encuentra en la etapa inicial; de patología O recolectado antes del tratamiento

⑧ Generalmente se cree que tres días después de usar medicamentos antibacterianos, el cultivo de la muestra será negativo para bacterias patógenas.

2. Hisopo anal

Si no se pueden obtener heces, se puede insertar un hisopo anal humedecido con agua glicerinada o solución salina esterilizada en el ano 4-5 cm (para niños pequeños) 2 -3 cm), gire y limpie suavemente la mucosidad de la superficie rectal, sáquela y colóquela en un medio de transporte para su inspección.

6. Tracto urinario

Según el aviso "Estándares de diagnóstico de infecciones médicas" (ensayo) del Ministerio de Salud, el diagnóstico clínico del sistema urinario es: el paciente orina con frecuencia, urgencia, disuria y otros síntomas del tracto urinario. Síntomas de irritación o sensibilidad en la parte inferior del abdomen, dolor por percusión en el área del riñón, con o sin fiebre, y una de las siguientes condiciones:

(1) Análisis de orina. glóbulos blancos ≥5/campo de alto aumento para hombres y ≥10 para mujeres por campo de alto aumento, los pacientes con cateterismo urinario deben combinarse con urocultivo

(2) La infección del tracto urinario se ha demostrado clínicamente; diagnosticada o se ha confirmado que la infección del tracto urinario es efectiva con tratamiento antibacteriano.

1. Orina de sección media

(1) Método de recolección

① Las mujeres deben enjuagar su vulva con agua jabonosa o una solución de permanganato de potasio al 0,1% antes de tomar la muestra. use los dedos para orinar por separado de vagina a vagina, deseche la orina del frente, no deje de orinar y guarde 10 ml de la orina del medio en un recipiente esterilizado.

② En el caso de los hombres, limpie la abertura uretral con agua jabonosa o desinféctela con una solución de yodóforo al 0,1 %, séquela con una gasa esterilizada, levante el prepucio, deseche el segmento anterior de orina y consérvelo. la orina sin dejar de orinar. Dispensar 10 ml de orina de sección media en un recipiente esterilizado.

(2) Precauciones

①Aunque el cateterismo puede reducir la contaminación, el cateterismo repetido puede causar infección retrógrada, por lo que en los últimos años se utiliza principalmente la orina de la sección media.

②Para pacientes femeninas, es mejor utilizar la posición de litotomía de la vejiga y pedirle a la enfermera que recoja la muestra para reducir la contaminación.

③Lo mejor es recoger muestras de la primera orina de la mañana.

④ Después de recolectar la muestra, si no se puede enviar para inspección dentro de 1 hora, colóquela temporalmente en un refrigerador a 4 ℃, pero no más de 8 horas. Si la muestra de orina se deja a temperatura ambiente durante más de 2 horas, incluso si los resultados de la inoculación y el cultivo muestran que el recuento bacteriano es ≥104 ufc/ml o 103 ufc/ml, no se puede utilizar como base para el diagnóstico, y se debe tomar una nueva muestra y enviarla para su examen.

⑤Cuando se sospecha uretritis, los primeros 3-4ml de orina se pueden recoger en un recipiente esterilizado. Incluso si hay algunas bacterias en la orina, si se detecta la misma bacteria repetidamente, debe considerarse una bacteria patógena.

⑥En la mayoría de los casos, no basta con que los niños se enjuaguen únicamente la vulva, por lo que es difícil recoger muestras. Si hay un aumento significativo de bacterias en la orina, se puede sospechar altamente de una infección del tracto urinario, pero se puede negar si es estéril.

⑦Si los resultados del cultivo bacteriano muestran dos o más tipos de bacterias, se debe considerar la posibilidad de contaminación y se recomienda recolectar nuevas muestras para su inspección.

⑧ No se deben agregar conservantes a la orina; de lo contrario, los desinfectantes afectarán la tasa de detección positiva.

2. Método de recolección por cistocentesis

Es muy difícil evitar la contaminación cuando los resultados del cultivo no coinciden con la condición, o cuando se cultivan bacterias anaeróbicas en la orina, o cuando es difícil. Para recolectar la orina de la sección media de bebés y niños pequeños, la orina se puede recolectar mediante punción suprapúbica en la vejiga.

3. Método de recolección para pacientes con catéter urinario permanente

Retire la bolsa de recolección de orina de drenaje cerrada, deseche la orina en la sección frontal del catéter y deje 10 ml de orina no contaminada en la vejiga Enviar para inspección. No recolecte muestras del extremo inferior de la bolsa recolectora de orina.

7. Líquido cefalorraquídeo

1. Método de recogida

Los médicos recogen de 3 a 5 ml de líquido cefalorraquídeo de forma estéril (1 ml para bacterias, 2 ml para hongos, 2 ml para bacilos ácido-alcohol resistentes, 1 ml de virus) en un tubo de ensayo o vial estéril y enviarlo inmediatamente para su inspección.

2. Precauciones

(1) Envíe la muestra para su examen inmediatamente después de su recolección, porque Neisseria meningitidis se autoliza rápidamente después de ser aislada del cuerpo, y Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae también son fáciles de morir

(2) Cuando se sospecha la infección bacteriana mencionada anteriormente, se debe prestar atención a mantenerla caliente y no refrigerada ni almacenada a bajas temperaturas.

8. Bilis

1. Método de drenaje duodenal

Bajo operación aséptica, trague el catéter duodenal en el duodeno En el pezón (a 65-70 cm del diente ), recolecte el líquido A (del conducto biliar común, que es de color naranja o dorado) y luego inyecte 40 ml de solución de sulfato de magnesio al 25%. Después de 1 a 2 minutos, recolecte el líquido B (de la vesícula biliar, que es de color amarillo parduzco). -verde), y luego recoger el líquido C (del conducto hepatobiliar, de color limón. Generalmente se cree que el líquido B es de mayor importancia para el cultivo bacteriano).

2. Método de punción de la vesícula biliar

Durante la colecistografía se puede recolectar bilis al mismo tiempo.

3. Método de recogida quirúrgica.

Perforar directamente el colédoco y la vesícula biliar para recoger la bilis.

Las muestras recolectadas anteriormente deben enviarse para su examen inmediatamente; de ​​lo contrario, deben colocarse en un refrigerador a 4°C. Se debe tener cuidado durante la recolección para evitar la contaminación bacteriana por la saliva y el líquido duodenal.

9. Muestras de líquido de punción

El líquido de punción incluye derrame pleural, líquido ascítico, líquido pericárdico, líquido sinovial y líquido de la vaina.

1. Método de recogida

El médico realiza la extracción por punción. Recoja de 5 a 10 ml de líquido torácico y ascítico, de 2 a 5 ml de líquido pericárdico y de líquido sinovial, colóquelos en tubos de ensayo o viales estériles que contengan anticoagulantes, mezcle bien y envíelos para su examen inmediatamente. Anticoagulante Sal disódica de EDTA al 10%, la proporción entre muestra y anticoagulante es de 10:1.

2. Precauciones

⑴ La recolección de muestras debe realizarse antes de que el paciente tome el medicamento o 1-2 días después de suspender el medicamento

⑵ Si no se puede enviar; para examen inmediato, 4 Almacenar en un refrigerador a ℃

⑶ El líquido sinovial de pacientes con sospecha de artritis gonorreica debe enviarse para examen inmediatamente después de su recolección, o es mejor cultivarlo junto a la cama <; /p>

⑷ No lo empape con hisopos de algodón. Envíe las muestras para su inspección.

10. Pus y secreciones de lesiones

1. Heridas

⑴ Métodos y precauciones para la recolección de hisopos de heridas superficiales

① Limitado a la piel y tejido subcutáneo, incluidas incisiones quirúrgicas, úlceras de decúbito, onfalitis neonatal y abscesos infantiles.

②Use solución salina estéril o alcohol al 75% para limpiar el exudado en la superficie de la lesión.

③Use un hisopo de algodón esterilizado para limpiar las secreciones de pus más profundas o el envío del tejido para su inspección;

④ Al recolectar muestras de úlcera de decúbito, se deben recolectar secreciones purulentas del borde de la úlcera de decúbito y el hisopo se debe colocar en el medio de transporte y enviar para inspección inmediatamente. superficie de la herida.

⑵ Métodos y precauciones para recolectar tejido de heridas, abscesos, tractos sinusales y gangrena.

① Para abscesos atrésicos, use yodo y alcohol para desinfectar la piel, y luego use un recipiente esterilizado. jeringa para pinchar y extraer todo el pus. Si se sospecha una infección anaeróbica, retire el aire del tubo de la aguja e inserte la aguja en el tapón de goma esterilizado para su inspección.

② Si hay pus y exudado en la herida; , use un hisopo de algodón esterilizado, limpie profundamente en varios tractos sinusales, raspe con un cuchillo, punción, aspiración o escisión quirúrgica para obtener muestras de heridas profundas

③Cuando la herida sangra, aplique el medicamento dentro de 2 horas y quémelo dentro de 2 horas; Se deben recolectar muestras durante 12 horas cuando las posibilidades de obtener un resultado positivo sean escasas.

④ A la hora de recoger muestras hay que prestar atención a las propiedades, color, olor, etc. del pus y las secreciones. Puede proporcionar una base para la identificación cultural.

　⑶Heridas por quemaduras

①Las heridas por quemaduras requieren secreciones purulentas, la escara se separa rápidamente y se vuelve marrón, negra o violeta, y los bordes de la quemadura están edematosos. El paciente tiene fiebre >38°C o hipotermia <36°C, combinada con hipotensión.

②Enjuague la herida con solución salina esterilizada.

③Dado que las diferentes partes de la herida tienen diferentes tipos de bacterias, se deben usar hisopos de algodón esterilizados para recolectar las áreas inflamadas de varias partes para su inspección.

④ Recoja los bordes oscuros o degenerados del área no saludable o el líquido de drenaje debajo de la costra para cultivo cuantitativo y biopsia de tejido.

2. Hisopos anaeróbicos para heridas

⑴Se pueden usar hisopos de algodón especiales anaeróbicos o varillas de vidrio para tocar el pus profundo.

⑵Se puede usar una jeringa para aspirar y drenar; lejos Si hay aire en el tubo de la aguja, inserte la aguja en el tapón de goma esterilizado y envíelo para inspección

⑶Envíelo para inspección inmediatamente y debe mantenerse en condiciones anaeróbicas durante el proceso de inspección;

⑷No es adecuado para cultivos de bacterias anaeróbicas, esputo, hisopos de garganta, hisopos nasofaríngeos, hisopos de encías, hisopos rectales, vaginales y cervicales, efluentes de íleon y colostomía, contenido de estómago, intestino delgado y intestino grueso, etc.

3. Hisopo de secreción uretral

⑴ Los hombres deben limpiar y limpiar la abertura uretral con una gasa esterilizada y luego tomar las secreciones purulentas que rebosan de la abertura uretral