¿A qué tecnología pertenece la infección microbiana?
Fuente: Lianchuan Biotechnology Company
Hora: 3/8/2017 9:12:00.
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Título: Las bacterias Fusang inducen la proliferación nuclear de células cancerosas coloreadas y el desarrollo de tumores en ratones activando la señalización del receptor 4 tipo peaje. Factor nuclear LkB, y regula positivamente la expresión de MicroRNA-21
Revista: Gastroenterología
If: 18.392
Antecedentes de la investigación
Alrededor del 20% de los cánceres en todo el mundo están relacionados con infecciones patógenas. Fusobacterium nucleatum puede estimular las células epiteliales para que se transformen en células cancerosas, lo que provoca cáncer, pero el mecanismo específico de este proceso no está claro.
Dos. Métodos de investigación
Selección de muestras: Líneas celulares de cáncer colorrectal: HCT116, HT29, SW480, LoVo.
Información del grupo: Grupo experimental (tratamiento con Fusobacterium nucleatum) y grupo control (tratamiento con PBS)
Método de detección: chip de miARN (chip de miARN microfluídico de Lianchuan)
Tres . Resultados de la investigación
1. Fusobacterium nucleatum promueve la proliferación y migración de células de cáncer colorrectal.
Las células HCT116 y LoVo se trataron con Fusobacterium nucleatum, Escherichia coli y PBS respectivamente. Se descubrió que el tratamiento con Fusobacterium nucleatum promueve significativamente la proliferación celular en ambas líneas celulares tumorales. Se inyectaron Fusobacterium nucleatum, Escherichia coli y HCT116 tratado con PBS en ratones desnudos BALB/C. El tejido tumoral formado por células tratadas con Fusobacterium nucleatum en los ratones era más grande y pesado.
2. Efecto protooncogén de Fusobacterium nucleatum
Se alimentaron ratones mutantes APC con Fusobacterium nucleatum y PBS respectivamente, y se observaron los cambios en los rasgos y el tiempo estadístico de supervivencia de cada grupo. . Los experimentos muestran que los ratones alimentados con Clostridium nucleatum tienen más derrame abdominal, diarrea con sangre, dilatación intestinal, esplenomegalia y un tiempo de supervivencia más corto. La anatomía de los ratones en cada grupo reveló que la cantidad y el diámetro de los tejidos cancerosos intestinales tratados con Clostridium nucleatum eran mayores, la expresión del antígeno nuclear de las células proliferantes en las células cancerosas aumentó y los niveles de factores inflamatorios séricos aumentaron.
3. Fusobacterium nucleatum estimula la alta expresión de miR21 en células CCR.
Se utilizaron Fusobacterium nucleatum y PBS para tratar cuatro líneas celulares de cáncer colorrectal: HCT116, HT29, SW480 y LoVo respectivamente. La detección del chip de miARN* * * identificó 102 miARN expresados diferencialmente, entre los que se encuentra la diferencia en miR21. Fue lo más obvio. Después de reducir la expresión de miR21 (inhibidor de miR21), se inhibieron las capacidades de proliferación y migración celular. Fusobacterium nucleatum infectó ratones miR21a-/- y WT respectivamente. miR21a-/- mostró diarrea y sangre en las heces más tarde, tuvo menos tumores en el intestino, un diámetro tumoral más pequeño y un tiempo de supervivencia más largo.
4.miR21 apunta a RASA1.
Los genes diana conocidos de miR21 incluyen PTEN, RAKE, SPRY1, RHOB 0 y RHOB. A través de la predicción de bases de datos múltiples y experimentos con genes indicadores de luciferasa, se descubrió un nuevo gen diana de miR21, RASA1.
5. El tratamiento con Clostridium nucleatum activa la vía TLR4/MYD88/NFkB en las células CCR.
HCT118 se trató con Fusobacterium nucleatum y PBS respectivamente, y se analizaron los cambios en la expresión génica. El análisis de la vía KEGG y Reactome mostró que la vía TLR4/MYD88/NFkB estaba significativamente enriquecida. Además, después de la infección de las células por Bacillus, aumentó el grado de fosforilación de las subunidades NFkB (P65, P50) y la expresión de los genes TLR y MYD88. Silenciar TLR4 o MYD88 inhibe la activación de NFkB.
6.NFkB promueve la expresión de miR21.
El análisis de la información biológica muestra que existe un sitio de unión del factor de transcripción NFkB en la región promotora aguas arriba del gen que codifica miR21: la eliminación de P65 puede reducir la expresión de miR21 después de una mutación artificial de la secuencia de unión del factor de transcripción; , la expresión de miR21 se ve afectada. Chip demostró que el factor de transcripción NFkB estaba significativamente enriquecido en la región promotora de miR21.
Cuatro. Conclusión de la investigación
Después de que las células se infectan con Fusobacterium nucleatum, la vía TLR4/MYD88/NFKB se activa secuencialmente. NFkB es una vía de señalización del factor de transcripción. La subunidad P65 de NFkB se fosforila y se combina con la activación del. gen que codifica la subregión de miR21 para promover la transcripción de miR21. El miR21 altamente expresado se une a RASA1, inhibe su función supresora de tumores, promueve la proliferación y migración de células cancerosas y acelera el desarrollo del cáncer.