¿Cuál es el mecanismo por el cual la lisozima mata las bacterias?
La lisozima puede hidrolizar eficazmente el peptidoglicano en la pared celular bacteriana. Sus sitios de hidrólisis son los átomos de carbono 65438 del ácido N-acetilmurámico (NAM) y los átomos de carbono de la N-acetilglucosamina (NAG). entre.
El peptidoglicano es el componente principal de la pared celular bacteriana y está formado por NAM, NAG y una "cola" peptídica (compuesta por cuatro residuos de aminoácidos). NAM y NAG están conectados a través de un enlace glicosídico β-1,4, y la "cola" peptídica está conectada al tercer átomo de carbono de NAM a través de un grupo D-lactocarboxilo.
Las colas peptídicas están conectadas mediante puentes peptídicos (enlaces peptídicos o unos pocos aminoácidos). NAM, NAG, colas peptídicas y puentes peptídicos juntos forman la estructura de red multicapa del peptidoglicano, que sirve como esqueleto de la pared celular.
Cristalización directa de la sal:
Agregue una cierta cantidad de sal como yoduro o carbonato a la clara de huevo, ajuste el valor de pH a 9,5-10,0 y la lisozima estará en la forma de cristales Precipita lentamente, mientras que la mayor parte de la proteína permanece en solución.
Después de la ultrafiltración, concentración y desalación, para obtener el producto puro, la solución enzimática se purifica mediante cristalización. Después de la ultrafiltración, se ajusta el pH a 9,5 con NaOH y se elimina mediante centrifugación. Agite el sobrenadante lentamente, agregue NaCl al 5% y déjelo reposar durante una semana para obtener cristales crudos.
Los cristales se disolvieron en agua con ácido acético a pH 4,6 y luego se recristalizaron después de eliminar la materia insoluble. El rendimiento final de cristales fue aproximadamente del 60%. Es decir, se pueden obtener casi 1,3 g de producto recristalizado por kilogramo de clara de huevo y su actividad es de 8000 U/mg.