Análisis farmacéutico del extracto de regaliz
Propósito: Este método utiliza espectrofotometría de función ortogonal para determinar el contenido de ácido glicirrícico en el extracto líquido de regaliz.
Este método es adecuado para el análisis de materias primas y preparados.
Método: La muestra se adsorbió en una columna de alúmina y el contenido de ácido glicirrícico en el extracto de regaliz se determinó mediante espectrofotometría de función ortogonal.
Reactivos:
1. Acetato de etilo (pureza química)
2. Metanol (pureza cromatográfica)]
3. (Químicamente puro)
4. Óxido de aluminio
Instrumento y equipo: espectrofotómetro WZF-800D2.
Preparación de la muestra:
1. Preparación de la muestra
Pesar con precisión 6 gramos de regaliz en polvo. Disolver el extracto, agregar 50 ml de agua para disolver, agregar etanol para diluir hasta la marca, agitar bien, filtrar, desechar el filtrado inicial, medir con precisión 10 ml del filtrado continuo, agregar 6 gotas de solución de prueba de amoníaco, vaporizar en un baño maría hasta que quede una pasta espesa, agregar agua Disolver 10 ml, agregar lentamente 2 ml de ácido clorhídrico (5-10) y colocar en agua helada. Lavar el recipiente con 5 ml de agua y precipitar, centrifugar, retirar el sobrenadante, lavar hasta que el sobrenadante esté casi incoloro, calentar con etanol para disolver el precipitado, filtrarlo en un matraz aforado de 50 ml, luego lavar el tubo de centrífuga con etanol caliente y filtrar hasta que el líquido de lavado sea incoloro, enfriar a temperatura ambiente, diluir a volumen con etanol, mezclar bien, extraer con precisión 1 ml de líquido, usar alúmina como columna en blanco. Usando glicirricinato monoamónico como agente revelador, no se detectaron manchas de ácido glicirrícico bajo la lámpara UV de 254 nm, lo que indica que no hubo pérdida de ácido glicirrícico cuando se eluyó con 10 ml de agua, y el ácido glicirrícico se pudo eluir completamente con 10 ml de solución de prueba de agua con amoníaco. .
2. Preparación de la solución de control negativo de ácido glicirrícico
Mida con precisión 5 ml de la solución de muestra, séquela en un baño de agua, agregue 0,5 ml de agua para disolverla y colóquela sobre sílice. gel GF254.
3. Preparación de la solución problema
Poner 100 mg de la muestra problema en un matraz aforado de 10 mL y agregar con precisión 3 ml de cloroformo-acetato de etilo-metanol (1:1). : 1). Remojar en frío durante la noche, realizar ultrasonidos durante 40 minutos, centrifugar, tomar el sobrenadante, secar con nitrógeno y disolver con metanol como solución de prueba.
Pasos de la operación:
1. Dibujo de la curva estándar
Dibuje con precisión 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5 ml de solución estándar y colóquela en un recipiente de 10 ml. matraz volumétrico, agregue agua para diluir hasta la marca, agite bien, mida la absorbancia en los seis puntos de prueba seleccionados, calcule el valor P2, tome P2 como ordenada y la concentración como abscisa, dibuje una curva estándar y obtenga la regresión ecuación de P2 = 6,655.
2. Determinación de la muestra
Extraiga con precisión 5 ml de la solución de prueba anterior, colóquelos en un matraz volumétrico de 10 ml, agregue agua para diluir hasta la marca y diluya el blanco hasta la marca. mismo volumen. Usando el blanco como referencia, mida la absorbancia de seis puntos de prueba, calcule P2 y calcule el contenido de ácido glicirrícico mediante la ecuación de regresión.
Referencias: Wei Youliang, Dang Chuangshi, Determinación del contenido de ácido glicirrícico en extracto de regaliz y extracto líquido de regaliz mediante espectrofotometría de función ortogonal, Journal of Basic Chinese Medicine, 1998, 12 (2): 29-30.