Tecnología de cultivo de Lingzhi, producción de vacunas y materiales relacionados
Un método de cultivo de Ganoderma lucidum
(1) Cultivo en botella:
Preparación de materias primas para el cultivo en botella de Ganoderma lucidum:
1 Material de sierra 78, salvado de trigo 20, azúcar 1, yeso 1, pH natural, contenido de humedad 65.
2. Cáscara de semilla de algodón 65, superfosfato 3, yeso 2, pH natural, contenido de humedad 65.
3. Paja 70, salvado de trigo 25, azúcar 1, yeso 2, superfosfato 2, pH natural y contenido de humedad 65.
Después de mezclar los ingredientes anteriores, póngalos en una botella, preferiblemente blanca de boca ancha, y póngala en el cuello de la botella. Aplanar la superficie con un gancho de hierro, lavar el medio de cultivo contaminado dentro y fuera de la pared de la botella, taparlo con un tapón de algodón y esterilizarlo.
Método de esterilización: esterilización a alta presión, con una presión de 1,5 libras y se puede mantener durante 1 hora. Esterilizar por método local, conservar el agua durante 6-8 horas después de hervir e inocular después de enfriar.
Desinfectar la sala de inoculación de la caja de inoculación con una mezcla de 10 ml de aldehído potásico y 6 g de permanganato potásico por metro cuadrado. Podrás vacunarte en 30 minutos. Al inocular, retire la capa superficial de la materia prima y luego inocule las semillas del material de cultivo en el frasco esterilizado. Esta tensión es aproximadamente del tamaño de un dedo. Generalmente, cada frasco de semilla original se puede inocular con alrededor de 100 a 130 frascos de semillas de producción, y luego de la inoculación, se dividen en 25 frascos para su colocación. Cuando las hifas crezcan hasta la mitad de su tamaño, aparecerán yemas en la superficie del medio de cultivo y las yemas se expandirán gradualmente. En este momento, la luz debe intensificarse. Cuando los brotes bacterianos crecen hasta convertirse en el tampón, el tampón debe retirarse a tiempo y se deben fortalecer medidas como la ventilación, la protección de la luz, la preservación del calor y la hidratación. Madurará en aproximadamente un mes.
(2) Cultivo en maceta y en bolsa:
Los métodos de cultivo en maceta y en bolsa de Ganoderma lucidum y la preparación de las materias primas son básicamente los mismos que los del cultivo en botella mencionado anteriormente. . El método de encapsulado consiste en mezclar las materias primas anteriores de manera uniforme, colocarlas en una maceta de 3 a 4 pulgadas de espesor, aplanar la superficie del medio de cultivo, sellarlo con una película plástica y realizar una esterilización a alta temperatura. Los métodos de esterilización son los mismos que para el cultivo en botella. Inoculación: Se pueden inocular de 4 a 5 orificios en la superficie de cada maceta y luego sellar para el cultivo. Si aparecen cuerpos fructíferos, retirar inmediatamente la película plástica y reforzar el manejo.
El Ganoderma lucidum se suele cultivar en bolsas de plástico, de 30cm de largo y 15cm de diámetro. Después de llenarla, ate bien la bolsa y desinféctela. El método es el mismo que el anterior. Inoculación: La inoculación de Ganoderma lucidum cultivado en bolsas no requiere injertos de orificios. Es mejor utilizar injertos en ambos extremos. Generalmente, una botella de semilla original puede injertar entre 60 y 70 bolsas. Después de la inoculación, cultivar a 25-28°C. Cuando el micelio haya crecido hasta una profundidad de aproximadamente 2 pulgadas en el medio, suelte los extremos de la bolsa para fomentar la formación temprana de cuerpos fructíferos. Además de la temperatura adecuada, los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum son muy sensibles a la luz y al aire durante la etapa de crecimiento. Los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum generalmente crecen en la dirección de la luz. Incluso si está deformado, si las condiciones del aire son malas, se deformará. No habrá sombrero, sólo el tallo. Por lo tanto, especialmente cuando se cultiva Ganoderma lucidum en interiores, se debe prestar atención a satisfacer las necesidades de luz y aire.
(3) Cultivo seccional de madera
1. Selección y recolección de especies de árboles. Además del pino, el abeto, el ciprés, el alcanfor y otras especies de árboles que contienen sustancias bactericidas, la mayoría de los árboles de hoja ancha se pueden cultivar con Ganoderma lucidum. Generalmente la inoculación se realiza desde mediados de febrero hasta principios de marzo. Es mejor talar el árbol 15 días antes de la inoculación, con un diámetro de árbol de 6-15 cm.
2. Cortar y empaquetar. Después de talar los árboles, córtelos en trozos cortos de madera de 15 cm de largo y la superficie de los trozos de madera debe ser lisa. Los bloques de madera gruesos pueden ser de 1 pieza por bolsa, y los bloques de madera delgados se atan en manojos con cables. El diámetro de cada paquete depende del tamaño de la bolsa de plástico. La superficie de la sección del paquete debe estar nivelada y sujeta con pequeños bloques de madera o bloques de madera partidos. Los troncos agrupados caben en cada bolsa. Cuando la madera esté demasiado seca, puede poner una pequeña cantidad de agua en la bolsa y luego atarla firmemente para esterilizarla. El método de esterilización es el mismo que el del "sustituto de hongos".
3. Vacúnate. Una vez que la bolsa de bacterias se haya enfriado, inocúlela en la caja de inoculación o en la sala de inoculación.
El método de desinfección es el mismo que el de la "generación de hongos". Al inocular, abra la boca de la bolsa, inserte el bloque de bacterias y luego ate bien la boca de la bolsa. La bolsa pequeña solo puede aceptar una cepa y la bolsa grande debe permitir que cada pieza de madera acepte la cepa.
4. Cultivo. Después de la inoculación, mueva la bolsa de hongos a una sala de cultivo seca y ventilada para el cultivo, y mantenga la temperatura ambiente a 22-25 °C para el cultivo. Cuando el micelio crezca sobre la bolsa del hongo, abra ligeramente la boca de la bolsa o haga agujeros en el cuerpo de la bolsa para aumentar el oxígeno y promover que las hifas coman madera. Generalmente, el tiempo de cultivo es de 2 a 2,5 meses, y puede ser más largo cuando la temperatura es baja.
5. Elige tierra para enterrar en el suelo. Elija un lugar con fácil drenaje, terreno abierto, buena ventilación, tierra suelta y fuentes de agua convenientes, cerca del área de cultivo de hongos, y el tiempo de uso es generalmente de 2 a 3 años. Excave el sitio a una profundidad de 30 cm, retire las malas hierbas y las piedras y coloque el lecho después de la exposición. El ancho del marco suele ser de 1 a 1,5 m y la longitud no está limitada. Se deben cavar zanjas de drenaje alrededor del sitio y se debe construir un cobertizo arqueado por encima del límite, cubierto con una película plástica y sombreado. Elija un día soleado cuando la temperatura se mantenga estable por encima de los 20°C y entierre la tierra. Primero, cava una zanja en el borde terminado a una profundidad de 20 cm. Primero, espolvorea un poco de termiticida en el fondo de la zanja y luego cúbrela con una fina capa de tierra suelta. Luego, coloque el extremo inoculado de un trozo de madera hacia abajo en la zanja a una distancia de 5 a 8 cm, cúbralo con 1 a 2 cm de tierra y luego cúbralo con paja o 1 cm. Después de enterrar la tierra, rocíe agua.
6. El foco de la gestión posterior al entierro es la temperatura, la humedad, la ventilación y la luz.
Bajo (1) temperatura, si se mantiene a 25-28 °C, el cuerpo fructífero no crecerá bien. La diferencia excesiva de temperatura hará que la tapa se deforme y afecte la calidad.
(2) Rocíe agua para mantener la humedad relativa en el cobertizo entre 80 y 90 para que la tierra quede suelta y húmeda. La calidad del agua rociada debe ser limpia. Elija una boquilla con puntos de niebla finos para rociar en el espacio de modo que los puntos de niebla caigan libremente.
(3) Ventilación. Se debe proporcionar ventilación durante todo el día cuando la temperatura sea normal. Cuando la temperatura es alta, preste atención a reducir la humedad y aumentar la ventilación. La ventilación se puede realizar cuando la temperatura sea baja al mediodía.
(4) Iluminación. Ganoderma necesita algo de luz dispersa para crecer, pero se debe evitar la luz solar directa.
Producción de cepas de Ganoderma lucidum:
La calidad de las cepas de Ganoderma lucidum tiene una gran relación con la velocidad de formación del cuerpo fructífero y el rendimiento. Los cuerpos fructíferos se pueden formar en más de 20 días después de la inoculación de cepas excelentes. Los cuerpos fructíferos son grandes, de buena apariencia y pueden pesar hasta 15 g cada uno. Las cepas pobres sólo pueden formar cuerpos fructíferos más de 30 días después de la inoculación, y la mayoría de ellos son pequeños e incompletos, y cada cepa pesa sólo entre 7 y 8 g.
1. Separación de especies madre: (1) PDA es el medio de cultivo.
(2) Método de aislamiento y cultivo: se puede utilizar el método de aislamiento de esporas o el método de aislamiento de tejido. Las esporas de Ganoderma tienen paredes gruesas y una germinación lenta. El micelio recién crecido es delgado y tiene una vitalidad débil. El método de aislamiento de esporas rara vez se utiliza. El micelio obtenido mediante el método de aislamiento de tejido es espeso, fácil de cultivar y tiene poca variación interespecífica, por lo que se utiliza con frecuencia. Método: Los cuerpos fructíferos de Ganoderma lucidum se lignifican después de la madurez y tienen poca capacidad para restaurar el crecimiento vegetativo. Por lo tanto, para la separación de tejidos, se deben seleccionar cuerpos fructíferos jóvenes que no estén lignificados, es decir, el sombrero aún no se ha formado y solo se separan mejor los tallos y las yemas leonadas. Limpie los brotes con agua esterilizada y envíelos a la sala estéril. Realice la desinfección de la superficie según procedimientos asépticos. Utilice un bisturí para cortar la piel de los tallos y corte el tejido en el extremo frontal en trozos pequeños de aproximadamente 0,2 centímetros cúbicos. luego inocularlos en medio inclinado en la oscuridad a 25-28 grados Celsius. En condiciones de luz, el micelio se convierte rápidamente en cuero. Después de 3 a 4 días, se pueden ver nuevas hifas blancas alrededor del bloque de tejido. A los 7 a 10 días, las hifas están cubiertas con la pendiente y las hifas están cerca de la superficie del medio de cultivo. se mezclan con amarillo claro y pueden usarse como especie madre.
2. Preparación de semillas originales y semillas cultivadas:
(1) Medio: Se pueden utilizar las fórmulas (2) y (3) del ítem A050108186.
(2) Biberón y esterilizar: Mezcle el material de cultivo uniformemente según la fórmula, colóquelo en un frasco para cepas de 750 ml, únalo usando métodos convencionales y esterilícelo.
(3) Inoculación: Enfriar el material de cultivo esterilizado a 30 grados Celsius y enviarlo a la sala de inoculación para operación aséptica. Si se prepara la semilla original, inocular la semilla madre. Si se preparan semillas cultivadas, inocular las semillas originales.
(4) Cultivo: Después de la inoculación, enviarlo a la sala de cultivo bacteriano y cultivarlo en la oscuridad a 25-28 grados Celsius durante 15-20 días. La botella estará lista para usar cuando el micelio esté listo. lleno.