Rutina de semen
Según los "Estándares normales de semen" del "Manual de examen de laboratorio de semen humano" publicado por la OMS en 2010, los "estándares normales de semen" son los siguientes:
Tiempo de licuefacción: en 60 minutos a temperatura ambiente, generalmente sin exceder los 15 minutos.
Aspecto normal: blanco lechoso uniforme, semilíquido.
Volumen de esperma: más de 1,5ml.
Valor de PH: superior a 7,2
Densidad espermática: superior a 150.000/ml.
Recuento total de espermatozoides: nada menos que 39 millones por eyaculación.
Motilidad espermática: superior al 58%
Motilidad espermática: superior al 40% (a+b+c), o superior al 32% (a+b)
Forma estándar: más del 4%
Glóbulos blancos: menos de 1 × 10/ml.
Pasos del examen
Examen físico: Durante el examen físico se debe prestar atención al desarrollo de los caracteres sexuales secundarios y de los genitales externos. Si el volumen testicular es inferior a 10 ml y la textura es anormalmente blanda, a menudo indica una función testicular deficiente. Palpe el epidídimo y el conducto deferente en busca de anomalías y nódulos.
2. Examen bioquímico del semen: Actualmente se utilizan ampliamente la fructosa, la fosfatasa ácida, el ácido cítrico, las proteínas, los oligoelementos y la lactato deshidrogenasa X. Al realizar el examen bioquímico del semen, la muestra de semen debe colocarse en un baño de agua a entre 35 °C y 37 °C. Después de la licuefacción, se deben centrifugar de 1,2 a 1,5 ml de semen masculino durante 15 minutos y se debe tomar el plasma seminal superior. para determinación bioquímica.
3. Examen inmunológico: puede determinar si existe autoinmunidad y si existe anomalía cromosómica mediante análisis de cariotipo. La medición de FSH, LH, T y PRL séricas es un método importante para detectar infertilidad espermática anormal en hombres con oligozoospermia y también es útil para distinguir la falla testicular primaria de la falla testicular secundaria.
4. Ultrasonido B testicular: se pueden encontrar lesiones macroscópicas en los testículos y la biopsia testicular puede proporcionar una base más confiable para el diagnóstico y el tratamiento.
Edite esta sección para recoger muestras
El objetivo del examen de semen es principalmente comprobar las causas de la infertilidad después del matrimonio. Además de las causas femeninas, es igualmente importante determinar si la calidad y cantidad del esperma masculino son normales.
Parece una pregunta muy sencilla, ¿por qué los candidatos no recogen y transfieren semen de forma estandarizada, lo que afecta directamente a la precisión de los resultados de las pruebas? Por lo tanto, indique a los candidatos los métodos correctos de recogida y transferencia.
1. Tiempo de recogida de semen: dentro de las 48 horas, preferiblemente abstinencia dentro de los 7 días.
2. Método de recolección: Método de masturbación, inyectar directamente el semen en una botella limpia y seca. En algunos casos especiales, cuando no puedes masturbarte para recolectar semen, puedes usar condones especiales para recolectar semen. Los condones comunes no se pueden usar porque pueden contener sustancias químicas que inhiben la actividad de los espermatozoides y afectan la supervivencia de los espermatozoides. No es aconsejable interrumpir las relaciones sexuales para recoger semen porque existe un alto riesgo de perder la parte inicial del semen eyaculado con mayor densidad de espermatozoides.
3. Recolecte el semen y envíelo para su examen a tiempo, no más de 1 hora, de lo contrario afectará la motilidad y la tasa de actividad de los espermatozoides.
4. Durante el proceso de envío de semen al laboratorio, la temperatura debe ser superior a los 20°C. Pero no exceda los 40 ℃. [1]
Edite el contenido de la inspección en este párrafo 1. Volumen de semen.
[Valor normal de referencia] 2-5ml.
[Importancia clínica]
1. Si no hay eyaculación durante varios días consecutivos y el volumen de semen es inferior a 1,5 m1, significa que es anormal e indica que hay una enfermedades en la vesícula seminal o en la próstata; si el volumen del semen se reduce a unas pocas gotas, o incluso la imposibilidad de descargarlo, se denominan azoospermia y se observan en infecciones específicas del sistema reproductivo, como tuberculosis, gonorrea e inflamación inespecífica. , etc.
2. Si el volumen de semen es demasiado grande (más de 8m1 a la vez), los espermatozoides se diluirán y reducirán en consecuencia, dificultando la fertilidad.
2. Comprobación de coloración
[Valor de referencia normal] Gris o blanco lechoso, puede ser amarillo claro si hace tiempo que no eyaculas.
[Importancia clínica]
1. Semen purulento amarillo o marrón: visto en vesiculitis seminal o prostatitis, etc.
2. Semen sanguinolento de color rojo brillante o rojo oscuro: se encuentra en inflamación, tuberculosis y tumores del sistema reproductivo.
3. Prueba de viscosidad y licuefacción
[Valor de referencia normal] La gelatina espesa se licuará sola en 30 minutos.
[Importancia clínica]
1. La baja viscosidad del semen, como la sopa de arroz, puede ser causada por un recuento reducido de espermatozoides y puede observarse en la inflamación del sistema reproductivo.
2. Si el tiempo de licuación es demasiado largo o no se licua, puede inhibir la actividad de los espermatozoides y afectar la fertilidad, lo cual es común en la prostatitis.
4. Detección de la tasa de motilidad de los espermatozoides
[Valor de referencia normal] La motilidad normal de los espermatozoides está generalmente por encima del nivel III (buena fluidez, velocidad de movimiento moderada, pero más fluctuaciones), capacidad de movimiento. al nivel III o superior dentro de 1 hora después de la eyaculación. 0,60.
[Importancia clínica] Si los espermatozoides del nivel 0 (espermatozoides muertos, inmóviles, todavía inmóviles después del calentamiento) y del nivel I (inmóviles, espermatozoides girando en su lugar, balanceándose o temblando, movimiento lento) están dentro de 0,40 el Los anteriores son a menudo una de las razones importantes de la infertilidad masculina.
5. Prueba de motilidad espermática
[Valor de referencia normal]
Espermatozoides con motilidad superior al nivel III 30-60 minutos después de la eyaculación>: 0,80 < /p >
Espermatozoides con nivel de motilidad III o superior dentro de los 120 minutos posteriores a la eyaculación>: 0,60;
Los espermatozoides con 0,25-0,60 aún pueden moverse 120 minutos después de la eyaculación.
[Importancia clínica] Los espermatozoides inactivos o inactivos son una de las causas importantes de infertilidad. Las infecciones no específicas como la infección por Escherichia coli, algunos fármacos metabólicos, fármacos antipalúdicos, estrógenos, mostaza de óxido nítrico y otras enfermedades comunes en el varicocele y el sistema genitourinario también pueden reducir la motilidad de los espermatozoides.
6. Recuento de espermatozoides
[Valor de referencia normal] (100-150)×109/L o el número total de semen primario es (4-6)×108.
[Importancia clínica]
1. El recuento de espermatozoides es inferior a 20 × 109/L o la cantidad total de espermatozoides descargados al mismo tiempo es inferior a 1 × 108, que es anormal y se observa en varicocele, metales, contaminación industrial dañina como plomo, altas dosis de radiación y los efectos de ciertos medicamentos.
2. La azoospermia es causada por fallas repetidas en la detección de espermatozoides, debido principalmente a una baja función espermatogénica testicular, defectos congénitos de los conductos deferentes y las vesículas seminales u obstrucción de los conductos deferentes. No debe haber espermatozoides en el semen 2 meses después de la vasectomía, de lo contrario la operación fracasará.
3. El recuento de espermatozoides de las personas mayores comienza a disminuir a partir de los 50 años, o incluso desaparece gradualmente.
7. Examen de morfología espermática
[Valor de referencia normal]
Espermatozoides anormales:
Espermatozoides inmaduros:
p >Importancia clínica
1. El aumento de espermatozoides anormales en pacientes con varicocele indica que los espermatozoides han ingresado al semen en una etapa inmadura o que la temperatura escrotal es demasiado alta debido a un retorno venoso deficiente. y el tejido testicular carece de oxígeno, o sangre que transporta metabolitos tóxicos desde los riñones o las venas suprarrenales a los testículos, son perjudiciales para la morfología de los espermatozoides.
2. Un aumento de espermatozoides aglutinados en el semen indica infección del tracto reproductivo o función inmune anormal.
3. Cuando la función espermatogénica de los túbulos seminíferos testiculares se ve afectada o dañada por fármacos u otros factores, pueden aparecer en el semen más espermatozoides inmaduros patológicos.
8. Examen de espermatozoides
[Valor de referencia normal]
Glóbulos blancos (WBC):
Glóbulos rojos (RBC) ): 0- Ocasionalmente/HP.
[Importancia clínica]
1. El aumento de leucocitos en el semen es común en la vesiculitis seminal, la prostatitis y la tuberculosis.
2. El aumento de glóbulos rojos en el semen es común en la tuberculosis de vesícula seminal y el cáncer de próstata.
3. Si se encuentran células cancerosas en el semen, tiene importancia diagnóstica para el cáncer de línea germinal.
9. Comprobación del valor del pH del semen
[Valor de referencia normal] 7,2-8,0.
[Importancia clínica]
1. Valor de pH del semen
2. Valor de pH del semen >8,0, común en infecciones agudas, como vesiculitis seminal y prostatitis.
10. Determinación del índice de fertilidad
[Fórmula de cálculo]
I=M(N×V)/(A×106)
donde I es el índice de fertilidad masculina; m es el porcentaje de espermatozoides activos; n es el número de espermatozoides por mililitro; v es la velocidad de movimiento de los espermatozoides;
[Valor de referencia normal] Índice de fertilidad de una persona normal>;l.
[Importancia clínica]
1. .
2. El índice de fertilidad está entre 0 y 1, lo que indica la existencia de diversos grados de trastornos de la fertilidad.
11. Prueba de función espermática
Además de la concentración y cantidad de espermatozoides, la combinación esperma-óvulo también debe tener una buena función de motilidad, lo que afecta al moco cervical, la corona del óvulo. radiata, zona pelúcida y óvulo. La penetración de la membrana celular es uno de los principales indicadores para evaluar la función de los espermatozoides. Se informa que alrededor del 18% de los espermatozoides que son normales en el examen de semen de rutina no pueden penetrar el moco cervical. Por lo tanto, comprobar la función de los espermatozoides es de gran valor para estudiar el movimiento de los espermatozoides, la capacidad de fertilización y las causas de la infertilidad masculina. Las pruebas más utilizadas son las siguientes:
1. Prueba de penetración in vivo: también llamada prueba poscoital. Verifique la cantidad, la tasa de supervivencia y la motilidad de los espermatozoides viables en el moco cervical dentro de un cierto período de tiempo después de las relaciones sexuales durante la ovulación para evaluar la capacidad de los espermatozoides para penetrar el moco cervical. Las personas normales pueden ver >50 espermatozoides con actividad normal del HPF. Cuando el moco cervical es anormal o hay anticuerpos antiespermatozoides, la capacidad de los espermatozoides para penetrar en el cuerpo se debilita o se pierde. Los resultados también se ven afectados por diversos factores como la secreción de estrógenos.
2. Prueba de penetración in vitro (prueba de penetración in vitro)
(1) Prueba en portaobjetos simplificada: Poner una gota de moco cervical en el portaobjetos positivo, alisarlo con un cubreobjetos, y use un batidor para encerar perlas de vidrio para controlar el grosor entre las dos piezas. Se coloca una gota de semen en ambos lados del portaobjetos de vidrio para hacer que los bordes del cubreobjetos entren en contacto. El semen se mueve hacia el cubreobjetos a través de la acción capilar. , para que haya una interfaz de contacto clara entre el moco cervical y el semen. Incubar los óvulos a 37 grados centígrados durante 30 minutos. Los espermatozoides forman protuberancias en forma de dedos en la interfaz de contacto y se extienden hacia el moco. Los espermatozoides ingresan al semen a través de proyecciones en forma de dedos y luego se abren en abanico. Los indicadores de observación de este experimento son: ① El resultado normal es cuando los espermatozoides espesos penetran y más del 90% de los espermatozoides móviles tienen un movimiento lineal claro ② Los espermatozoides penetran en el moco, pero abandonan la superficie de contacto entre el moco y el líquido; /p>
Este experimento a menudo implica un cierto grado de subjetividad, ya que es imposible estandarizar completamente el tamaño y la forma de la superficie de contacto del moco de esperma sobre un vidrio plano, ya que la interacción del moco de esperma se puede evaluar cualitativamente.
(2) Prueba de contacto entre el esperma y el moco cervical (SCMC): el propósito de esta prueba es probar si hay ASAB en el semen y el cuello seco que afecten la motilidad de los espermatozoides y el alcance del daño. Mezcle cantidades iguales de esperma cerca del período de ovulación con moco cervical, coloque los espermatozoides a una temperatura fuerte durante 30 minutos, cuente los espermatozoides oscilantes bajo un microscopio y averigüe la tasa de aparición (%). Comparación de la motilidad de los espermatozoides mediante microscopía de gota de esperma única. Se dice que el ASAB daña más gravemente la motilidad de los espermatozoides, como se muestra en la tabla 11-1.
Tabla 11-1 Daño de la motilidad de los espermatozoides por ASAB
Los resultados de SCMC mostraron que el 100% de la motilidad de los espermatozoides estaba dañada.
Menos 0-25 Ninguno
p>
El positivo débil 26-50 es leve (sospechoso)
El positivo 51-75 es obvio.
Fuertemente positivo 76-100 = grave
Aquellos que dan positivo en la prueba en portaobjetos y en la prueba SCMC se pueden realizar pruebas cruzadas con semen o moco seco del cuello de otros donantes para determinar la fuente de ASAB. Líquido claro o moco seco en el cuello.
(3) La prueba de penetración de esperma en óvulos de hámster Zoefree (ZFHESPT) es una prueba biológica muy estricta con tecnología compleja y muchos factores que influyen. Si se puede reforzar el control de calidad, se pueden utilizar otras pruebas objetivas, como la motilidad del esperma, como función y base para el juicio.
El método incluye los siguientes pasos: Capacitar los espermatozoides en medio de cultivo BWW a 37 grados centígrados, luego mezclarlo con hámsters que han sido tratados externamente con tripsina para eliminar la zona pelúcida, y continuar la incubación hasta completar la proceso de fertilización. Luego se contaron la tasa de fertilización y el índice de fertilización de los óvulos utilizando un microscopio de contraste de fases.
Tasa de fertilización (%) = número de óvulos fertilizados/número total de óvulos × 100 %
Debido a que se ha eliminado la zona pelúcida, varios espermatozoides pueden penetrar un óvulo. FI es la relación entre el número total de espermatozoides que penetran en los óvulos y el número total de óvulos, que refleja la penetración de los espermatozoides y la reacción nucal en su conjunto.
Cuanto mayor sea el FI, mayor será la capacidad del espermatozoide para fertilizar.
FI=número de espermatozoides que penetran en el óvulo/número total de óvulos.
[Valor de referencia] Tasa de fertilización ≥10%
[Importancia clínica] La prueba de penetración de óvulos de esperma de hámster puede medir la capacitación del esperma humano, la reacción de fertilización y la penetración de los óvulos, refleja de manera integral la capacidad fecundante de los espermatozoides. Los resultados de esta prueba muestran que el 82% de los hombres con fertilidad normal son normales y sólo el 2% de los pacientes infértiles son normales, por lo que tiene un alto valor de aplicación en el diagnóstico de infertilidad. Los espermatozoides con alto poder de penetración se pueden utilizar para la inseminación artificial con una alta tasa de éxito.
Editar prueba bioquímica 1 y determinación de fructosa refinada en este párrafo.
[Valor normal de referencia] 9,11-17,67 mmol/l.
[Importancia clínica]
1. La fructosa del semen es 0, lo que se puede observar en ausencia bilateral congénita de conductos deferentes y vesículas seminales, obstrucción completa de los conductos deferentes bilaterales o eyaculación retrógrada. .
2. La reducción de la fructosa en el semen es común en la vesiculitis seminal y en la secreción insuficiente de andrógenos, lo que puede provocar una energía insuficiente para el movimiento de los espermatozoides e incluso dificultades en la concepción.
2. Determinación de fosfatasa ácida
[Valor normal de referencia]
Método Guinness: >255nmol s-1/L
[ Importancia clínica]
1. El aumento del contenido de fosfatasa ácida en plasma seminal es común en pacientes con hipertrofia prostática o tumores malignos de próstata en etapa temprana.
2. El nivel de fosfatasa ácida plasmática seminal está reducido, lo cual es común en pacientes con prostatitis.
3. La detección de fosfatasa ácida en plasma seminal es el método más sensible para la identificación forense del semen.
3. Determinación de la actividad enzimática del acrosoma
[Valor de referencia normal] 36,72 21,43 U/L/L
[Importancia clínica] Actividad de la enzima acrosómica en el espermatozoide Es se correlaciona positivamente con la densidad de los espermatozoides y la tasa de integridad del acrosoma de los espermatozoides, y su actividad insuficiente puede provocar infertilidad masculina.
4. Determinación de lactato deshidrogenasa
[Valor de referencia normal]
Actividad absoluta de LDH-X: 2620 1340 U/L;
La actividad relativa de LDH-X: ≥0,426.
[Importancia clínica] LDH-X tiene especificidad tisular para los testículos y los espermatozoides, y es una enzima clave que es buena en la motilidad. La detección de LDH-X puede utilizarse como un indicador valioso para el diagnóstico de infertilidad masculina. LDH-X se reduce o desaparece en pacientes con atrofia testicular. La LDH-X no se produce cuando los espermatozoides son defectuosos y la actividad de la LDH-X se reduce en pacientes con oligozoospermia o azoospermia. Tomar gosipol también puede inhibir la actividad de esta enzima.
5. Determinación de carnitina en plasma seminal
Analizar la diferencia y significado clínico de los niveles de L-carnitina en el plasma seminal de hombres fértiles normales y mujeres infértiles con astenozoospermia. Métodos A través del estudio B se estableció un método de cromatografía líquida de alta resolución para la determinación de L-carnitina en plasma seminal humano, y se analizó la diferencia en los niveles de L-carnitina en el plasma seminal de hombres fértiles normales y pacientes infértiles con astenozoospermia y su Se analizó la importancia clínica.
Edite este párrafo para inmunoensayo y determinación de anticuerpos anti-espermatozoides.
[Valor de referencia normal] Negativo.
[Importancia clínica] La detección de ASAB tiene una importancia clínica importante para el examen de las causas de la infertilidad. Los AsAb existen en el suero o en las secreciones del tracto reproductivo, lo que puede inhibir la actividad de los espermatozoides, interferir con el movimiento de los espermatozoides, dificultar la penetración de los espermatozoides y la combinación espermatozoides-óvulos y dificultar la fertilización. Incluso si se ha producido la fertilización, puede afectar al embrión en desarrollo y provocar un aborto espontáneo inmunológico. La tasa positiva de AsAb entre parejas infértiles es del 25% al 30%. Cuando se bloquea el conducto de salida de los espermatozoides, se producen daños testiculares, inflamación, epidídimo y otras infecciones del sistema reproductivo, se producen autoanticuerpos por el escape de los espermatozoides.
Notas sobre la edición de este párrafo
Se prohíbe a los sujetos tener relaciones sexuales dentro de los 5 a 7 días posteriores a un período de eyaculación frecuente (el intervalo entre la última eyaculación y la recolección de la muestra no debe ser Menos de 100 horas); preparar un recipiente limpio y seco con boca grande y tapa, masturbarse para recoger el semen, inyectarlo todo en el recipiente de una vez, tapar la tapa, registrar el tiempo fuera del cuerpo del ejemplar conservarlo; cerca del cuerpo y manténgalo caliente, y envíelo al laboratorio dentro de los 30 minutos para su examen. El personal brinda tiempo para la extracción de la muestra. Observación de rutina del semen: volumen total de semen (ml), motilidad de los espermatozoides, densidad de los espermatozoides (uno/ml), tiempo de licuefacción del semen (tiempo desde la extracción de la muestra hasta la licuefacción del semen), células espermáticas (un campo de alto poder), etc.
Los espermatozoides sólo se pueden distinguir mediante tinción: espermatozoides inmóviles, espermatozoides muertos, espermatozoides inmaduros, etc.
Si no se encuentran espermatozoides, se deben centrifugar y analizar. Si aún no se encuentran espermatozoides antes de informar sobre azoospermia. Después de tres pruebas de muestreo, no se pudo encontrar esperma, lo que confirma la azoospermia.