En el examen inmunomorfológico de la leucemia, la tasa positiva de CD5 es del 20% y la tasa positiva de otros es del 0%. ¿Es esto leucemia?
Leucemia mieloide aguda; leucemia mieloide aguda poco diferenciada; morfología celular; inmunofenotipo
Número de clasificación de la Biblioteca de China R733171 Código de identificación del documento A
El propósito del estudio sobre las características morfológicas e inmunológicas de las segundas células diferenciadas de la leucemia mieloide aguda es explorar las características morfológicas, histoquímicas e inmunológicas de las segundas células diferenciadas de la leucemia mieloide aguda y su importancia diagnóstica. Wrigt2Giemsa y tinción histoquímica se realizaron en frotis de médula ósea de 2 casos de AML2Mo. Inmunofenotipado mediante citometría de flujo. Los resultados mostraron que ambos casos fueron negativos para la tinción de mieloperoxidasa, positivos para partículas finas de PAS, positivos para CD33/CD13 y negativos para CD2/CD3/CD 10/CD 19/CD22. Conclusión: La morfología, histoquímica e inmunofenotipo del frotis de médula ósea son la principal base diagnóstica de AML2Mo. La tinción con múltiples anticuerpos monoclonales puede mejorar la precisión.
Palabras clave leucemia mieloide aguda; Lección 2 leucemia mieloide aguda diferenciada; morfología celular; tipo inmune
J Ex p Hematol 200311 (4): 429 - 431
Con la aparición de cada vez más anticuerpos monoclonales (McAb), tenemos una comprensión más profunda de la heterogeneidad de las células leucémicas. La leucemia aguda (AML2Mo) es difícil de identificar morfológicamente y puede diagnosticarse mediante métodos histoquímicos e inmunológicos.
Caso y Método
Ejemplo
Caso 1, 50 años, acudió a nuestro hospital para recibir tratamiento el 11 de noviembre de 2001 por mareos, cansancio y tos. durante 20 días. Examen físico: el estado general es bueno, los ganglios linfáticos superficiales no son grandes en todo el cuerpo, no hay sensibilidad en el esternón recién tocado y el bazo está 1 cm por debajo de la costilla, sin manchas amarillas ni puntos sangrantes; se encuentran en la piel y la esclerótica; los glóbulos blancos de sangre periférica son 3,2×109/L, hemoglobina 69/L, plaquetas 69×109/L. Examen morfológico: 66. La tasa de detección de células blásticas en frotis de sangre periférica fue del 0%. Examen de médula ósea: la proliferación fue claramente activa, con un 78,5% de células blásticas aumentadas significativamente, mientras que los granulocitos y las células eritroides disminuyeron significativamente. Diagnóstico de AML2Mo. El caso 2, una mujer de 59 años, estuvo ingresada en el hospital durante dos semanas debido a fiebre y dolor de garganta. La amígdala derecha se hinchó gradualmente hace dos semanas y el departamento de odontología le diagnosticó amigdalitis. Los síntomas no mejoraron después del tratamiento antiinflamatorio. Ella desarrolló mareos, fatiga, náuseas y vómitos, y fue enviada a nuestro hospital para un examen de emergencia. Los glóbulos blancos eran 4,0 × 109/L, la hemoglobina 80/L y las plaquetas eran 76 × 109/L. El examen físico reveló una apariencia anémica. Pequeños ganglios linfáticos superficiales en todo el cuerpo, dolor en el esternón y enfermedad hepática. No se tocaron el bazo ni las costillas, y la piel y la esclerótica no tenían manchas amarillas ni puntos de sangrado. Examen morfológico:76. Los blastos representaron el 0% en el frotis de sangre periférica; la médula ósea mostró proliferación activa, con un aumento significativo del 86,5% de los blastos, mientras que los granulocitos y las células eritroides disminuyeron significativamente. Diagnóstico de AML2Mo.
Métodos
Examen morfológico: Se tiñeron frotis de médula ósea y sangre periférica con la mezcla de Ritchie 2 Giemsa, y se clasificaron 200 y 100 células nucleadas, respectivamente. Una persona con experiencia en morfología determina. el tipo. En todos los casos se realizaron exámenes citoquímicos de forma rutinaria, incluida la prueba de mieloperoxidasa (POX), esterasa específica (NSE) y NSE más inhibición por fluoruro de sodio (NSE+NaF), fosfatasa alcalina de granulocitos (NAP); etc.
Examen inmunológico: utilice un medio de separación de linfocitos con una densidad relativa de 1 para separar las células mononucleares de la médula ósea. 007. Los glóbulos rojos mezclados se tratan con solución de lisis de glóbulos rojos, luego se etiquetan y tiñen según las instrucciones del reactivo, y se detectan usando el citómetro de flujo FACSort de la American BD Company. Se utilizó más del 20% de las células positivas a la fluorescencia como criterio para juzgar la positividad del antígeno correspondiente. Los anticuerpos monoclonales de superficie celular utilizados incluyen: CD10, CD19, CD20 y CD22 de las series B CD2, CD5 y CD7 de las series t Marcadores mieloides CD 13, CD 14, CD 15 y CD33 Marcadores de megacariocitos CD41 y CD62 Marcadores de células madre CD34, CD38 y HLA -2dr .
Resultados
Caso 1, morfología y citoquímica: El número de células primitivas de la médula ósea aumentó significativamente, las células se distribuyeron de manera más uniforme y hubo menos células azules. La forma celular es similar a la del sistema linfático, con cuerpos celulares pequeños y redondos, cromatina reticular espesa, nucléolos grandes y evidentes (1-2) y citoplasma rico, de color gris azulado, sin gránulos. Examen histoquímico: POX (-), NSE (+), NAP (-), PAS (+) mostraron partículas finas (tabla adjunta). Células positivas para anticuerpos CD34: 87,6%; CD38: 99,6%; CD33: 95,7%; CD41: 0,8%; 5% CD3 y CD5, CD10, CD19, CD20 y CD22 fueron todos negativos. Ejemplo 2, Morfología y Citoquímica: Las células primitivas del paciente no se clasifican fácilmente morfológicamente. Las células son más grandes, el citoplasma es diferente, de color gris azulado y la cromatina nuclear es más espesa. Se puede observar gemación nuclear, los nucléolos son grandes y evidentes, 1-2, y algunos tienen vacuolas. El examen histoquímico mostró que POX (-), NSE (-), NAP (-) y PAS (+) eran partículas finas/gruesas. Células positivas para anticuerpos: CD34: 93,3%; CD38: 20,1%; CD33: 76,19%; CD41: 3,9%; el 4% CD3, CD5, CD7, CD10, CD19, CD20 y CD22 fueron todos negativos.
Discusión
AML2Mo es una forma rara de leucemia mieloide aguda. Generalmente, el agrandamiento del hígado, el bazo y los ganglios linfáticos no es evidente y el sangrado subcutáneo es raro. El cuadro sanguíneo de la mayoría de los pacientes mostró leucopenia y trombocitopenia. La morfología celular de AML2Mo es difícil de clasificar claramente según los estándares FAB, y es difícil diagnosticar AML2Mo únicamente a través de la morfología. La inmunología y la histoquímica juegan un papel importante en el diagnóstico. Las condiciones de diagnóstico para AML2MO se propusieron por primera vez en 1919 y se enumeran por tipo de componente cooperativo de la FAB. Los blastos tipo 1 + tipo 2 en la médula ósea representan >:90% de las células no eritroides. La morfología no se ajusta a ningún tipo de clasificación FAB y no hay cuerpos de Auer. Tinción citoquímica de rutina: POX y SBB tienen una tasa negativa o positiva <3%, PAS y NSE son negativos o débilmente positivos. El inmunofenotipo no presenta antígenos de diferenciación linfoide, pero al menos uno de los antígenos de diferenciación mieloide CD 13, CD 14, CD 15 y CD33 es positivo, o la ultramicromieloperoxidasa (MPO) y la peroxidasa plaquetaria son positivos.
Este artículo informa que los fenotipos de 2 pacientes fueron positivos para CD33, CD13, CD34 y CD38, lo que indica la expresión significativa de los marcadores específicos del linaje celular correspondiente, lo cual es una base importante para el diagnóstico de AML2Mo. . La expresión positiva de los marcadores de células progenitoras hematopoyéticas mieloides CD34/CD38 puede excluir el linfoma y los linfocitos inmaduros y mejorar la tasa de diagnóstico de AML2Mo. cd3/CD5/CD 10/CD 19/CS20/CD22 son negativos y pueden excluirse. El caso 1 fue CD7 positivo, lo que indica que las células leucémicas son muy heterogéneas. Células CD14/CD41 positivas <20%, excepto la leucemia megacarioblástica y la leucemia monocítica, ambos pacientes fueron débilmente positivos para MPO. Los grupos de diferenciación se dividen básicamente en dos categorías: antígenos específicos del linaje celular y antígenos asociados a etapas de diferenciación. Para una célula, determinar la composición de estos dos antígenos determina su linaje y grado de diferenciación. La expresión de estos antígenos es compleja. Hay una variedad de antígenos en la membrana celular, el citoplasma y el núcleo, que se expresan secuencialmente y pueden desaparecer uno tras otro a medida que las células se diferencian. Por tanto, sólo mediante la detección conjunta y el análisis exhaustivo de múltiples anticuerpos monoclonales se puede realizar un diagnóstico inmunofenotípico correcto.
Examen histoquímico: tasa positiva de tinción de enolasa específica de neuronas
Tabla 2 Examen histoquímico de leucemia aguda poco diferenciada (omitido) Nota: ※Gránulos finos, ※Gránulos finos/gruesos.
Bajo, las sustancias positivas están principalmente dispersas y difusas, lo que indica que aunque las células AML2Mo están poco diferenciadas, algunas células han formado NSE, mostrando una reacción positiva débil, pero sin tinción PAS en partículas finas en AML2Mo; pacientes, positivo en partículas gruesas o perlas. Según la distribución dispersa de muchas partículas finas y medianas, se puede ver que las perlas y los aglomerados son positivos. A diferencia de todas las partículas positivas, son pequeñas, gruesas, limpias y claras. . Como una de las bases para el diagnóstico diferencial con otras leucemias agudas, POX(-) y NAP(-) son de gran importancia para el diagnóstico y el diagnóstico diferencial de AML2Mo.
Hasta la fecha, el análisis morfológico sigue siendo la base para el diagnóstico y clasificación de la leucemia.
El análisis morfológico es obviamente limitado en los siguientes casos: ① La tinción morfológica y citoquímica no puede determinar la serie de clasificación de las células leucémicas; ② Leucemia mixta aguda ③ Ambas morfológicamente, pero carecen de especificidad del sistema linfático; ④ La el antígeno de superficie de las células leucémicas ha cambiado, pero la morfología no ha cambiado; ⑤ Clasificación de la leucemia linfocítica T y B. El inmunotipado es un medio importante para distinguir los tipos de leucemia, especialmente cuando la morfología no puede emitir un juicio correcto, y juega un papel clave en el diagnóstico final. A veces, la expresión cruzada y la especificidad de los marcadores inmunológicos no son fuertes, lo que aumenta la dificultad del diagnóstico. El nivel de diferenciación celular reflejado por el fenotipo inmunológico de las células leucémicas está relacionado con la clasificación morfológica de las células FAB, pero no es necesariamente completamente consistente. Las pruebas inmunofenotípicas proporcionan más información que la morfología de las células leucémicas y la tinción histoquímica tradicionales.
Mejor ve al hospital.