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Métodos de muestreo de piel y nariz adecuados para la recolección de muestras de individuos sanos

I. Preparación del material

Etiqueta etiquetada; ?

Tubo de ensayo con tapa de rosca de 2 ml (espiral externa), que contiene 750 μL de MoBioBuffer ?

Toallita de muestreo estéril; ?

Solución estéril de SCF-1 (tampón Tris 50 mM [pH 7,6], EDTA 1 mM [pH 8,0], Tween-20 0,5) para remojar los hisopos antes del muestreo;?

Bolsa de plástico con cierre para recoger los tubos de muestreo; Caja de hielo portátil (contiene cubitos de hielo).

II. Estudio de la condición de la piel

1. Los criterios de exclusión de sujetos son los siguientes:

① Haber tenido alguna condición de la piel en la cara, cuello, brazos o Sujetos que hayan recibido antibióticos tópicos o esteroides en las manos. (La detección y el muestreo pueden retrasarse cuando los sujetos cumplen con el período de exclusión para el uso de antibióticos o esteroides);?

② El acné no debe aparecer en la cara, el pecho, la espalda o los hombros;?

③ Múltiples ampollas, pústulas, quemaduras, abscesos, quistes o úlceras en el cuero cabelludo, cara, brazos, antebrazos o manos;

④ ¿Una sola ampolla, pústula, quemadura, absceso, infección, úlcera, costra, incisión, grieta o mancha rosa/pigmentación o parche dentro de los 4 cm del punto de muestreo?

⑤ Múltiples manchas rosadas/manchas rojas escamosas/manchas en cualquier parte del cuerpo (psoriasis o eccema);

⑥ Aparece piel muerta uniformemente engrosada, agrietada y sequedad excesiva en ambas palmas y/o pies;?

⑦ ¿Usar un champú anticaspa de venta libre con ingredientes desconocidos todos los días durante dos semanas?

⑧ Erupción que se propaga (que aparece en varias partes del cuerpo o se extiende a otras partes del cuerpo; la mayor parte del cuerpo).

2. Condiciones de prueba:?

La inspección de la piel debe realizarse en buenas condiciones de iluminación, incluida la inspección general de la piel local (todo el cuerpo) y la inspección detallada del sitio de muestreo.

3.

3. Estándares de prueba adicionales:

① Inspeccione cuidadosamente las arrugas detrás de las orejas (detrás de las orejas izquierda y derecha) y las fosas cubitales (dentro de los codos) de ambos brazos a través de inspección visual;?

② Cualquier ampolla, pústula, quemadura, absceso, infección, úlcera, costra, corte, fisura o mancha o parche rosado/pigmentado que esté a más de 4 cm del sitio de muestreo es todavía se considera una lesión cutánea visible. Condiciones para su inclusión en el estudio.

III. Método de recolección de muestras

Instrucciones:

① Todas las muestras deben recolectarse utilizando técnicas asépticas (consulte el apéndice para obtener más detalles).

② Los guantes de látex estériles que se usan solo se pueden usar para recolectar muestras de piel de un sujeto y se debe tener cuidado para evitar contaminar los guantes.

③ Si utiliza las manos enguantadas para estirar la piel para tomar la muestra y entra en contacto con el sitio de muestreo, debe cambiarse los guantes antes de tomar la muestra en el siguiente sitio.

Secuencia de recolección de muestra:

①¿Arrugas detrás de las orejas (recogidas por separado de detrás de las orejas y de los lados izquierdo y derecho)?

② ¿Fosa cubital (dentro del codo, recogida por separado de los lados izquierdo y derecho)?

③Fosa nasal anterior (los lados izquierdo y derecho se pueden juntar)

Notas: Es más ventajoso que el sujeto se recueste cómodamente durante el proceso de muestreo.

1. Pliegue postauricular

Pliegue postauricular: Comienza desde donde la parte superior de la oreja se conecta con la cara y se extiende hasta donde el lóbulo de la oreja se conecta con la cara.

① Utilice un hisopo de algodón de recogida de muestras para recoger muestras de piel y empaparlas con solución SCF-1.

② Para llegar a esta zona, utiliza una mano para doblar la oreja hacia adelante, dejando al descubierto el pliegue.

③ Mantenga el eje del hisopo paralelo a la superficie de la piel con la otra mano y presiónelo constantemente a lo largo del pliegue inverso unas 50 veces (completa 50 hisopos en aproximadamente 30 segundos).

④ Inserte la cabeza del hisopo en el tubo de recogida, corte de forma estéril la cabeza del hisopo del mango y vuelva a atornillar la tapa en su lugar.

Nota:

Para obtener la mejor muestra de la superficie de la piel, los puntos clave de la técnica de muestreo son: uso de hisopos húmedos, aplicación de presión constante y consistencia de la fricción (durante el muestreo 50 viajes de ida y vuelta en 30 segundos)?

Los lados izquierdo y derecho se muestrean, marcan y guardan respectivamente. Coloque los tubos en una bolsa ziplock, congélelos y envíelos al laboratorio dentro de 2 horas para su almacenamiento.

2. Fosa cubital (interior del codo)

Fosa cubital (interior del codo): la unión del brazo y el antebrazo por encima de la curva interna del codo.

① Utilice un hisopo de recogida de muestras para recoger muestras de la superficie de la piel y humedecerlas con una solución SCF-1 estéril.

② Use una mano para estirar la piel del codo y sostenga el hisopo con la otra mano de modo que el eje del hisopo quede paralelo a la superficie de la piel. Frote el hisopo hacia adelante y hacia atrás a lo largo de los pliegues antecubitales unas 50 veces. y aplique presión constante (aproximadamente 30 segundos para completar 50 frotaciones).

③ Inserte el hisopo en el tubo de recolección, inserte el cabezal del hisopo en el tubo de recolección, corte el cabezal del hisopo del mango bajo operación aséptica y luego vuelva a atornillar la tapa en su lugar.

NOTA:

Para un muestreo óptimo de la superficie de la piel, la clave de la técnica de muestreo es: usar un hisopo húmedo, aplicar presión constante y fricción constante (durante el muestreo) Hacer clic y frotar hacia adelante y hacia atrás 50 veces durante 30 segundos).

Los lados izquierdo y derecho se muestrean, marcan y guardan respectivamente. Coloque los tubos en una bolsa ziplock, congélelos y envíelos al laboratorio dentro de 2 horas para su almacenamiento.

3. Fosa nasal anterior

① Limpie suavemente la superficie mucosa de la fosa nasal con un hisopo esterilizado y realice un movimiento giratorio. Utilice el mismo hisopo para limpiar la misma parte dos veces en cada fosa nasal. .

② Se toman muestras de las fosas nasales izquierda y derecha, se combinan y se etiquetan como muestras combinadas.

③ Después de limpiar, coloque inmediatamente el hisopo en 750 μL de MoBioBuffer, gírelo y acumule la esponja en la pared del tubo varias veces durante 20 s para garantizar que las bacterias se transfieran a la solución.

Los tubos de recolección de muestras se colocaron en bolsas ziplock, se colocaron en hielo y se transfirieron al laboratorio para su procesamiento en aproximadamente 2 horas.

IV.Apéndice

Técnica aséptica

Principio:

Todas las muestras deben recolectarse y procesarse utilizando una técnica aséptica.

Se garantiza que todos los materiales recopilados en cada POE estarán limpios o se confirmará que son estériles antes de su compra y uso.

Las recomendaciones de técnica aséptica son las siguientes.

La técnica aséptica se aplica a todos los SOP de recogida de muestras.

Técnica estéril: preparación de tubos de recogida de muestras

1) ¿Los suministros estériles incluyen (entre otros) tubos, puntas, MoBiobuffer y tampón SCF-1?

2) Si se va a llenar el tubo, MoBioBuffer y SCF-1 se dispensarán dentro de una campana de flujo laminar.

Técnica aséptica: recolección de muestras del sujeto

1. Manipule las muestras biológicas de acuerdo con todas las pautas de seguridad del comité de seguridad local y/o la política institucional. Se deben utilizar guantes, gafas de seguridad o mascarilla y bata blanca durante toda la preparación del suero. Se deben seguir precauciones al recolectar cualquier muestra biológica, incluido al menos el uso de guantes.

2.

2. Al tomar el tubo de recolección de muestra con sus propias manos durante el proceso de muestreo, debe mantener sus guantes limpios para evitar la contaminación cruzada dentro y fuera del tubo de recolección. .

3.

3. Utilice guantes desechables limpios durante la recogida de muestras.

a) Al recolectar muestras de piel y cavidad nasal, recolecte primero muestras de cuatro sitios de la piel y luego recolecte muestras de la cavidad nasal. El tomador de muestras puede usar un par de guantes para recolectar muestras de múltiples sitios de la piel siempre que no se toque el sitio de la muestra mientras se estira la piel. Una vez que se toca el sitio de muestreo, se deben cambiar los guantes y tomar la siguiente muestra de piel.

b) Los investigadores pueden utilizar un par de guantes para recolectar muestras de diferentes sitios orales dentro de la boca del mismo sujeto.

Asimismo, no es necesario cambiar de guantes al recolectar tres muestras vaginales de un mismo sujeto.

Técnica estéril: prueba de muestras

Los suministros estériles incluyen (entre otros) tubos de ensayo, puntas de pipeta y todos los tampones/reactivos.