Proceso de producción de la vacuna contra la influenza A H1N1
Con el firme apoyo del Grupo Nacional de Apoyo Conjunto para la Prevención y el Control de la Influenza A (H1N1), la cepa de vacuna contra la influenza A (H1N1) NYMCX-179A de los CDC de EE. UU. llegó a Beijing Sinovac en la tarde del junio. 8 . Después de que Beijing Sinovac obtuvo la cepa del virus, rápidamente comenzó los preparativos para lotes de semillas de la cepa del virus.
①Preparación antes de la producción
a. Seleccionar estrictamente embriones de pollo específicos para producir vacunas contra la influenza, lo que requiere la preparación de una gran cantidad de embriones de pollo de 9 a 11 días. Los embriones de pollo proceden de Blue Ocean White Chickens y son proporcionados por empresas especializadas. En primer lugar, se debe seleccionar a los proveedores de embriones de pollo y realizar una auditoría de calidad. Los embriones de pollo tienen poca o ninguna resistencia, y el virus de la influenza inyectado no será eliminado por la resistencia del propio embrión de pollo. El caparazón de los embriones de pollo es blanco y tiene buena transmisión de luz. Bajo la iluminación de una fuente de luz en una habitación oscura, los vasos sanguíneos del embrión de pollo se pueden ver claramente, por lo que es fácil extraer embriones débiles y embriones muertos.
Cada lote de embriones de pollo enviados aquí debe ser estrictamente examinado. ***4 ítems de inspección externa: cáscara blanca, tamaño, daño, embrión sucio, ***9 ítems de inspección interna: remoción de cáscara de arena, cámara de aire excéntrica, cámara de aire flotante, embrión invertido, óvulo estéril, embrión terminado, embrión débil Embriones, embriones contaminados, embriones agrietados.
b. Las bacterias necesitan ser amplificadas para satisfacer las necesidades de producción.
Las semillas de virus enviadas por la OMS son las semillas originales de las cepas de virus recombinantes, que conservan la antigenicidad y la capacidad de replicación del virus y reducen su patogenicidad. Pero la cantidad es pequeña e insuficiente para producir vacunas en masa. Es necesario diluirlos, amplificarlos y cultivarlos, preparar lotes de semillas de virus y verificar los datos de amplificación, como qué concentración de dilución es mejor para el cultivo.
El virus se diluye y se planta en la cavidad alantoidea de un embrión de pollo (equivalente al líquido amniótico de un embrión humano), y luego el embrión de pollo se coloca en una incubadora cerrada, estéril y a temperatura constante. para permitir que el virus se multiplique rápidamente. Después de cultivar los embriones de pollo durante un cierto período de tiempo, se extrae el líquido de la cavidad alantoidea y luego se cultiva repetidamente para obtener semillas de virus adecuadas para el paso, que se reservan como lotes de semillas para la producción de vacunas.
②Producción en masa
El proceso de producción de cada empresa no es exactamente el mismo, pero la ruta general es similar.
1. Cultivo a gran escala para obtener grandes cantidades de virus.
El número de embriones de pollo utilizados para la producción de vacunas puede llegar a decenas de miles a la vez. El proceso de cultivo y recolección de virus a gran escala es el mismo que el de obtención de semillas y lotes de virus. Es simplemente una operación puramente mecanizada, que puede reducir la contaminación manual y mejorar la eficiencia de la producción.
b. Inactivación del virus y eliminación de la patogenicidad
Aunque el virus proporcionado por la OMS a los fabricantes de vacunas tiene una baja infectividad, todavía está vivo, por lo que es necesario inactivarlo para eliminarlo. la patogenicidad del virus. Por lo tanto, es necesario agregar un agente inactivante a la solución de recolección de virus durante un cierto período de tiempo para obtener una solución inactivante de virus. También es necesario inactivar la solución de inactivación de virus para garantizar que la vacuna se haya inactivado. Además, se debe analizar el contenido de proteínas, el título de hemaglutinación y la esterilidad de la solución de inactivación del virus.
c.Purificar la vacuna fraccionada para obtener una solución original de alta pureza.
Hay muchas impurezas en la solución de inactivación del virus, como proteínas en embriones de pollo, reactivos químicos utilizados para la inactivación, etc., que deben purificarse para retener los ingredientes activos del virus como vacuna. antígeno y para eliminar el virus. Inactiva otras impurezas en la solución para evitar reacciones adversas al cuerpo humano. Después de la ultrafiltración y concentración de la solución inactivada, se purifica varias veces mediante métodos físicos como cromatografía, filtración y centrifugación. Luego agregue una solución de lisis para escindir el virus, purifique y elimine aún más el agente de escisión y las proteínas de impureza para obtener una solución de vacuna purificada y, finalmente, esterilice y filtre para obtener una solución madre de vacuna de alta pureza.
Después de la inactivación, lisis y otros pasos, el virus H1N1 no es un virus vivo, sino un virus incompleto y no causará infección. Por lo tanto, no es científico escuchar que la influenza A estalló en las escuelas primarias y secundarias de Beijing porque fueron vacunadas antes del Día Nacional.
d. Ingredientes y relleno para obtener la vacuna terminada.
Una vez purificado el antígeno, es necesario añadir tampón a la solución madre de la vacuna para diluirla a una concentración adecuada. A veces, para reducir la cantidad de antígeno utilizado y aumentar relativamente la producción de vacunas, es necesario agregar adyuvantes apropiados para la compatibilidad. Las vacunas con adyuvantes estimulan mejor una respuesta inmunitaria que las vacunas sin adyuvantes, por lo que la cantidad de antígeno necesaria para cada vacuna será mucho menor. Después de eso, es necesario llenarlo con la vacuna terminada.
③Verificación de vacunas para determinar efectividad y seguridad.
Una vez producida la vacuna, la empresa también realizará inspecciones por muestreo de los productos terminados para determinar su eficacia y seguridad.
Además, debe enviarse al Instituto de Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos de China para su inspección y solo puede ponerse en uso después de obtener un certificado de liberación de lote. Para acortar el tiempo tanto como sea posible, el Instituto Chino para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos decidió iniciar la liberación simultánea de lotes. Ambos lados se prueban al mismo tiempo, verificando principalmente la esterilidad, el valor del pH, los residuos del inactivador, la toxicidad anormal, el contenido de endotoxinas bacterianas, el contenido de adyuvantes y la eficacia de la vacuna.