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¿Cuáles son los pasos en el proceso de elaboración de secciones de parafina?

Un método para hacer secciones de parafina, que incluye los siguientes pasos:

Los pasos de toma de materiales, fijación, deshidratación, transparencia, encerado, incrustación, corte, pegado, teñido, transparencia, sellado y otros pasos.

En concreto:

1. Materiales de dibujo

La calidad del material afecta directamente a la calidad de los cortes. Independientemente del material animal o vegetal que se elija, se debe prestar atención a los siguientes puntos.

(1) Los materiales vegetales deben seleccionarse de manera que no dañen las plantas o las partes requeridas tanto como sea posible; los animales a menudo se anestesian cuando toman materiales animales. Los anestésicos más utilizados son el cloroformo y el éter, o se mata al animal y se extrae rápidamente el tejido necesario.

(2) Las materias primas deben ser frescas, lo cual es especialmente importante para la investigación en biología celular. Debemos recortar la mayor cantidad de trozos de tejido vivo posible y luego poner el fijador en su interior.

(3) Al cortar materiales, el cuchillo debe estar afilado para evitar aplastar y dañar las células.

(4) El material cortado debe ser pequeño y fino para que el fijador pueda penetrar rápidamente en el interior. Generalmente, el espesor no supera los 2 mm y el tamaño no supera los 5×5 mm2.

Reparación

Después de abandonar el cuerpo, los tejidos y las células continúan con sus actividades vitales durante un cierto período de tiempo, provocando cambios patológicos hasta la muerte. Para que la muestra refleje el estado normal antes de la muerte, se deben utilizar algunas sustancias químicas lo antes posible para matar rápidamente tejidos y células, inhibir los cambios anteriores, convertir componentes estructurales en sustancias insolubles y evitar que ciertas estructuras se derritan y desaparezcan. Este tratamiento es fijo. Además de las funciones anteriores, el fijador también endurecerá el tejido de manera adecuada para su procesamiento posterior y también cambiará el índice de refracción dentro de las células, lo que hará que ciertas partes sean fáciles de teñir.

El principal objetivo de los fijadores son las proteínas. En cuanto a otros ingredientes, como la grasa y el azúcar, generalmente no se consideran en la producción. Si desea observar estas sustancias, puede utilizar métodos especiales para repararlas.

Deshidratación

Los tejidos biológicos contienen una gran cantidad de agua, que es incompatible con la parafina, imposibilitando que la parafina penetre en el tejido durante el proceso de inclusión. Por lo tanto, se debe eliminar toda la humedad con un agente deshidratante, que es lo que hace la deshidratación.

Los agentes deshidratantes deben mezclarse con agua en cualquier proporción. Hay dos tipos de agentes deshidratantes: uno es un disolvente sin parafina, como etanol, acetona, etc., que debe ser transparente después de la deshidratación antes de poder incorporarse en cera; el otro es un disolvente de parafina, como n-; butanol, que puede penetrar directamente en la cera después de la deshidratación.

Un agente deshidratante comúnmente utilizado es el etanol porque es barato y fácilmente disponible.

Transparente

Los bloques de tejido deben quedar transparentes después de la deshidratación en disolventes sin parafina. El agente clarificante se puede mezclar con agente deshidratante y cera de parafina al mismo tiempo. Una vez que la parafina reemplaza al agente deshidratante, puede penetrar suavemente en el tejido.

Existen muchos tipos de agentes transparentes, los más utilizados son xileno, tolueno, benceno, cloroformo, asfalto aromático, aceite de anilina, etc.

5. La penetración e incrustación de la cera

La penetración de la cera debe realizarse en una incubadora. La temperatura de la incubadora debe ajustarse a 3 grados por encima del punto de fusión de la parafina. que el bloque de tejido transparente se pueda tratar con una mezcla igual de parafina y xileno y luego con parafina pura. La parafina pura debe procesarse de 2 a 3 veces. El tiempo de penetración de la cera depende de la naturaleza del material. Generalmente toma de 15 a 30 minutos cada vez.

La clave de la transparencia es controlar la temperatura constante y evitar altas y bajas temperaturas. Si la temperatura es demasiado baja, la parafina se solidificará y no podrá penetrar; si la temperatura es demasiado alta, el tejido se encogerá y se volverá quebradizo.

La incrustación consiste en envolver el bloque de tejido empapado en cera en parafina. El método específico es: primero prepare la caja (consulte la Figura 1-3 y las instrucciones para el método de plegado específico), vierta la cera derretida en la caja, use pinzas precalentadas para sacar rápidamente el bloque de tejido y colóquelo plano en el fondo de la caja, con la sección transversal hacia abajo, luego levante suavemente la caja y colóquela en agua fría. Después de que la parafina en la superficie se solidifique, presione inmediatamente la caja en el agua para permitir que se enfríe y solidifique rápidamente, y sáquela después de 30 minutos.

La temperatura de la cera de inclusión debe ser ligeramente superior a la temperatura de la cera transparente para garantizar la integración completa del bloque de tejido con la parafina circundante. También es importante un enfriamiento rápido de la parafina, de lo contrario se producirá una cristalización en el bloque incrustado. Causará fragmentos al cortar más tarde.

Rebanar

Antes de cortar, observe el filo del cuchillo con una lupa y seleccione la parte plana del filo para cortar. Fije el bloque de inclusión que se va a cortar en la mesa de muestras de modo que la sección exterior del bloque de inclusión quede paralela a la sección del clip de muestra y el bloque de inclusión quede ligeramente expuesto. Después de empujar la mesa del cuchillo hacia el borde exterior, afloje el tornillo de la abrazadera de la hoja y fije la hoja de modo que el plano de la cortadora y los bordes superior e inferior del inserto queden paralelos al borde del cuchillo para formar un ángulo de aproximadamente 15 °. Ajuste el grosor deseado de las rodajas en el dispositivo de micromovimiento.

Al ajustar, tenga cuidado de que el puntero no pueda estar entre las dos escalas, de lo contrario la cortadora se dañará fácilmente. Acerque la mesa de operaciones a la mesa de muestras para que el borde del cuchillo esté en ligero contacto con las rodajas de tejido y pueda comenzar a cortar. El método es el siguiente: gire la rueda con la mano derecha, use el cepillo con la mano izquierda para recoger la película de corte en el extremo inferior de la cuchilla y sostenga la cinta de cera cortada. Cuando la cinta encerada tenga una cierta longitud, deja de girar con la mano derecha, usa otro cepillo para levantar suavemente la cinta encerada y colócala plana en una caja forrada con papel negro. Preste atención a la velocidad de corte, agite la muela de manera uniforme para evitar que la cortadora vibre violentamente y cause un grosor desigual del corte, y preste atención a la dirección de rotación. Después del corte, las partes relevantes del microtomo deben limpiarse rápidamente con cloroformo.

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Cada trozo de hojas de morera tiene un peso neto de un kilogramo, dos tazones para el jugo concentrado, use cuatro onzas de semillas de sésamo negro y dos tazones de jugo concentrado para cocinar en agua yin y yang. Tome el jugo y guárdelo, use doce taels de miel, refínelo hasta obtener gotas con agua, agregue el jugo a la miel, mézclelo con la medicina en polvo y tritúrelo en pastillas, del tamaño de un sicomoro. "Se pueden comer 100 pastillas al día, sopa de sal por la mañana y vino por la noche" (enviar). La medicina tradicional china cree que la enfermedad de la mancha marrón es causada por el estancamiento del hígado y la deficiencia de sangre, el viento y el calor que bloquean los meridianos. El método para utilizar hojas de morera es tomar 500 gramos de hojas de morera de invierno, hervirlas y esterilizarlas en agua para eliminar las impurezas, secarlas al sol y reservarlas. Tomar 15 gramos todos los días y remojarlas en agua hirviendo como un té. 20 días y el efecto será evidente. Durante el período de tratamiento, la placa se desvanecerá o el pigmento se aclarará. Consuma más productos de soja, como tofu, brotes de soja, etc. Los expertos creen que las hojas de morera tienen un buen efecto sobre el color marrón. manchas, que pueden estar relacionadas con la mejora de la función endocrina. Los estudios farmacológicos han demostrado que los diversos nutrientes contenidos en las hojas de morera pueden mejorar la circulación sanguínea y la inflamación. Tiene un efecto positivo en la regulación del metabolismo del tejido de la piel e inhibe la aparición y el desarrollo. de pigmentación. Las hojas de morera son las hojas secas del árbol de hoja caduca de la familia de las Moráceas. Son de naturaleza fría, de sabor amargo y dulce, y tienen el efecto de dispersar el viento y el calor. Es una medicina tradicional picante. Medicina china. Las hojas de morera son amadas por la gente por su valor medicinal universal. Las hojas de morera se usan principalmente para tratar la fiebre, el dolor de cabeza, la tos y otras enfermedades causadas por el viento-calor exógeno o enfermedades febriles. La investigación farmacológica moderna muestra que los componentes químicos de la morera. Las hojas contienen isoquercetina, ácidos orgánicos, colina, caroteno, vitamina B1, etc., que pueden inhibir significativamente la fiebre tifoidea y el crecimiento de Staphylococcus aureus, se descubrió que las hojas de morera tienen los siguientes nuevos usos para el tratamiento de enfermedades oculares: Lavado 15. ~ 20 g de hojas de morera helada, decóquelas en agua, déjelas enfriar y aplíquelas en los ojos enfermos con una toalla seca. Es milagroso para tratar la hinchazón de los ojos y el dolor causado por el viento, el calor, los ojos rojos, los ojos llorosos y. Ojos secos Se puede aplicar varias veces al día y será eficaz en 2 a 3 días. También puede tratar las lágrimas, los ojos secos y los mareos causados ​​por deficiencia hepática y renal. sus ojos mientras los calienta todos los días, lo que tendrá un buen efecto para mejorar la vista y reducir las lágrimas. Generalmente, se requiere un ciclo durante medio mes, y puede usarlo durante 2 a 3 ciclos y luego dejar de tomar el medicamento por un tiempo. 3 a 5 días Continuar 1 ciclo más de tratamiento. 下篇: Un día libre a la semana para ejercicios aeróbicos para bajar de peso.