El crecimiento de las células es el proceso de pequeño a grande.
Proceso de cultivo
El proceso de crecimiento de las células cultivadas: período latente → fase de crecimiento exponencial → fase estancada.
1. Periodo de incubación:
Después de sembrar las células, se someten a un periodo de suspensión, durante el cual quedan suspendidas en el medio de cultivo. En este momento, el citoplasma se reduce y el cuerpo celular se vuelve esférico. Luego, las células se adhieren a la superficie del soporte, lo que se denomina adhesión, y finaliza el período de suspensión. La velocidad de adhesión de las células está estrechamente relacionada con el tipo de célula, los componentes del medio de cultivo y las propiedades físicas y químicas del soporte. En términos generales, las células del cultivo primario se adhieren a la pared lentamente, lo que puede durar más de 10 a 24 horas, mientras que las células del subcultivo se adhieren a la pared más rápido, generalmente demorando de 10 a 30 minutos. Una vez que las células se adhieren a la pared, deben pasar por un período de latencia antes de entrar en la fase de crecimiento y proliferación. Las células cultivadas primarias tienen un período de latencia de aproximadamente 24 a 96 horas o más, mientras que las líneas celulares continuas y las células tumorales tienen un período de latencia más corto, de sólo 6 a 24 horas.
En segundo lugar, la etapa de crecimiento exponencial.
Esta es la etapa de proliferación celular más vigorosa, con más células mitóticas. El número de fases mitóticas en la fase de proliferación exponencial se puede utilizar como un indicador importante para juzgar si el crecimiento celular es vigoroso. Generalmente se expresa como índice mitótico (IM), que es el número de fases mitóticas por cada 1000 células en una población celular. El índice de división celular promedio está entre 0,1% y 0,5%, que es más bajo que el índice de mitosis de las células primarias y descendientes, mientras que el índice mitótico de las células continuas y las células tumorales puede llegar al 3% -5%.
Las células en la fase de crecimiento exponencial son el mejor período para la viabilidad celular, el mejor período para realizar diversos experimentos y el mejor momento para congelar las células. Cuando la cantidad de células inoculadas es adecuada, la fase de proliferación exponencial dura de 3 a 5 días. A medida que aumenta la cantidad de células y disminuye el espacio de crecimiento, las células eventualmente entran en contacto entre sí y se fusionan en bloques. Las células normales pueden inhibir el movimiento celular después del contacto entre sí, lo que se denomina inhibición de contacto. Sin embargo, las células tumorales malignas no tienen inhibición por contacto y pueden continuar moviéndose y proliferando, lo que hace que las células se expandan en un espacio tridimensional y acumulen células. Después de que las células entran en contacto y se fusionan en grupos, aunque se produce una inhibición del contacto, las células aún pueden proliferar y dividirse siempre que los nutrientes sean suficientes, por lo que el número de células sigue aumentando. Pero cuando la densidad celular aumenta aún más, los nutrientes en el medio de cultivo disminuyen y los productos metabólicos aumentan, la división celular se detiene debido al agotamiento de los nutrientes y los efectos de los productos metabólicos, lo que se denomina inhibición de la densidad.
3. Período de estasis
Una vez que el número de células alcanza la densidad de saturación, si no se pasan a tiempo, las células dejarán de proliferar y entrarán en la fase de estasis. En este momento, el número de células permanece estable, por lo que también se le llama fase de meseta. Aunque las células en la fase de estasis no proliferan, todavía tienen actividades metabólicas. Si las células no se separan y pasan, serán envenenadas por factores como el agotamiento de nutrientes, la acumulación de metabolitos y la disminución del pH, lo que provocará cambios morfológicos, caída de células adherentes y muerte en casos graves. Por lo tanto, debería transmitirse con el tiempo.