Aislamiento y purificación de fármacos

Aislamiento y purificación de bacterias del ácido láctico

Inocular yogur fresco disponible comercialmente en la placa de agar de cultivo bovino BCG con una aguja de inoculación y cultivarlo a 40 °C durante 48 horas. Si aparecen colonias amarillas, redondas y ligeramente planas, y el medio de cultivo circundante se vuelve amarillo, inicialmente se identifican como bacterias del ácido láctico.

Selecciona una colonia típica de bacterias ácido lácticas y transfiérela a un tubo de ensayo de leche desnatada. Después de cultivar a 40 ° C durante 8 a 24 horas, si la leche coagula y la baciloscopia no muestra burbujas, células ácidas, en forma de bastón o de cadena, y la tinción de Gram es positiva, se puede pasar continuamente tres veces. Finalmente, seleccione los conductos lácteos que puedan coagularse en 3 a 6 horas como cepas.

Agregar: 1 Fórmula y esterilización del medio de cultivo de leche BCG

(a) Líquido: 10 g de leche desnatada en polvo, 50 ml de agua, agregar una solución de etanol verde de bromocresol al 1,6 %, 80 Esterilizar a ℃ durante 20 minutos.

(b) Líquido: 1g de extracto de levadura, 50g de agua, 2g de agar, pH 6,8, 121°C, esterilizado durante 2 minutos

Pesar correctamente los medicamentos requeridos según la fórmula y Coloque en el vaso de precipitados, agregue la cantidad requerida de agua a la taza esmaltada, revuelva uniformemente con una varilla de vidrio, caliente para disolver, ajuste el pH con NaOH 1 N o HCl 1 N, compare con el papel de prueba de pH y agregue agar para disolver. Durante el proceso de calentamiento, se requiere agitación constante y reposición adecuada de agua. Una vez que el agar esté completamente disuelto, viértalo en un matraz Erlenmeyer de 250 ml y envuélvalo con una gasa (tenga cuidado de no contaminar la gasa).

Luego envuélvelo en papel kraft, etiquétalo (debe escribirse con lápiz) e indica de qué medio de cultivo se trata. En la olla a presión la presión es de 1kg/cm2 durante 30 minutos.