¿Cuál es el principio del recuento en placa del total de colonias bacterianas?
Principios para el recuento en placa de colonias bacterianas totales:
1. Operación aséptica: Se debe incluir en la operación el concepto de “operación estéril”. La cristalería utilizada debe estar completamente esterilizada y. no se permitirán residuos. Contiene bacterias o sustancias bacteriostáticas. También deberán esterilizarse las tijeras, pinzas y demás instrumentos utilizados. Si la muestra está empaquetada, use etanol al 75% para limpiar la abertura del paquete antes de tomar la muestra.
La operación debe realizarse sobre una mesa de trabajo limpia o en una habitación estéril y esterilizada. Las placas de agar se exponen a la mesa de trabajo durante 15 minutos, con no más de 15 colonias por placa.
2. Representatividad del muestreo: Si se trata de una muestra sólida, el muestreo no debe concentrarse en un punto, sino que debe tomarse de varios lugares. Las muestras sólidas deben homogeneizarse o molerse y las muestras líquidas deben agitarse para obtener una dilución uniforme.
3. Error de dilución de la muestra: Para reducir el error de dilución de la muestra, durante diluciones sucesivas continuas, cada dilución debe agitarse completamente para que quede uniforme y se debe reemplazar una pajita para cada dilución.
Al realizar diluciones en serie, el líquido de la pipeta debe fluir a lo largo de la pared de la tubería. No extienda la punta de la pipeta hacia el diluyente para evitar que la solución de prueba se adhiera al exterior de la pipeta. disolviéndose en él.
Para reducir el error de dilución, el estándar SN adopta 10 ml de diluyente y lo inyecta en 90 ml de solución tampón.
Limitaciones del recuento en placa
El método de recuento en placa solo puede medir aquellos microorganismos cultivables, a menudo subestima el número real de microorganismos presentes en el suelo y hay muchos factores que interfieren, como suspensión del suelo Las bacterias originales se reúnen o se adhieren a las partículas del suelo y no están completamente dispersas, por lo que el número de colonias formadas en la placa es menor que el número real de colonias.
El medio de cultivo o las condiciones de cultivo utilizadas son selectivas y es difícil distinguir todos los microorganismos por igual, además el diluyente puede inhibir ciertos tipos (especies) de microorganismos. Para interpretar con mayor precisión los resultados del recuento de colonias en placa, ahora se prefiere expresar el número de microorganismos en la muestra en términos de unidades formadoras de colonias.
Referencia para el contenido anterior: Enciclopedia Baidu: método de conteo de colonias en placas, Enciclopedia Baidu: método de conteo en placas