Red de conocimientos sobre prescripción popular - Enciclopedia de Medicina Tradicional China - Al extraer tejido de riñón de ratón para hacer secciones de parafina, ¿se puede reparar primero y luego extraer? ¿Qué precauciones se deben tomar al tomar materiales? Quiero hacer una fijación inmunohistoquímica.

Al extraer tejido de riñón de ratón para hacer secciones de parafina, ¿se puede reparar primero y luego extraer? ¿Qué precauciones se deben tomar al tomar materiales? Quiero hacer una fijación inmunohistoquímica.

Al realizar secciones de parafina de tejido de riñón de ratón para tinción inmunohistoquímica, se pueden fijar primero y luego extraer. Los fijadores más utilizados incluyen formaldehído, etanol, acetona, etc.

Las siguientes son medidas preventivas:

1. Tiempo fijo: el tiempo fijo es generalmente de 1 a 2 horas y no debe ser demasiado largo. Una fijación demasiado prolongada provocará que el tejido se endurezca, afectando los procesos de producción posteriores.

2. Concentración del fijador y valor de pH: Se debe seleccionar la concentración y el valor de pH adecuados según el tipo de tejido y el tipo de fijador. En términos generales, la concentración de formaldehído está entre 1 y 4 y el valor de pH está entre 7,2 y 7,4.

3. Materiales: El tejido fijado debe retirarse inmediatamente. Al tomar el material, coloque la toalla de papel sobre el papel de filtro y corte la toalla de papel en trozos pequeños de aproximadamente 1-2 mm3 con una cuchilla. Al mismo tiempo, se debe tener cuidado para evitar daños mecánicos al tejido y el impacto de factores externos en el tejido.

4. Deshidratación y transparencia: Antes de realizar cortes en parafina, es necesario que el tejido esté deshidratado y transparente. Los agentes deshidratantes comúnmente utilizados incluyen etanol, acetona, etc. Los agentes transparentes de uso común incluyen xileno, etc. Este proceso debe llevarse a cabo en una incubadora, y la concentración de agente deshidratante y agente aclarador debe aumentarse gradualmente para evitar daño tisular debido a una deshidratación o aclaramiento excesivo.

5. Seccionamiento incrustado: incruste el tejido deshidratado y transparente en parafina. Después de que la parafina se solidifique, use un microtomo para cortarlo en el espesor requerido (generalmente 3-5 μm).

6. Tinción inmunohistoquímica: Las secciones requieren tinción inmunohistoquímica para mostrar los antígenos o anticuerpos requeridos. Se deben seleccionar los anticuerpos apropiados y los anticuerpos secundarios de acuerdo con el propósito del experimento y se deben seguir las instrucciones del kit.

Por último, cabe destacar que los cortes en parafina requieren desparafinado, hidratación, recuperación de antígenos y otros pasos. Consulte la literatura relevante o las instrucciones del kit para conocer los métodos de operación específicos.