Principio de la prueba de catalasa

Principio de la prueba de catalasa: la catalasa también se llama catalasa. Las bacterias con catalasa pueden catalizar el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno atómico, y luego formar moléculas y burbujas de oxígeno.

Reactivos y fármacos

Tampón fosfato 1,50 mmol/lpH7,0

2,0,3 % H202: Aspirar 0,5 ml de H202 al 30 % y añadir pH7 ．0 tampón fosfato hasta 50ml

guaiacol al 3,0,2%: pesar 0,2g de guaiacol y añadir tampón fosfato pH 7,0 a 100ml

Información ampliada:

Pasos experimentales

Preparación de la solución enzimática

1. Pesar 0,25 g de hojas y agregar 5 veces la cantidad de baño de hielo (M/V) pH7 .0 PBS, moler a 15000 r/min

Centrifugar durante 15 minutos, tomar parte del sobrenadante y utilizarlo para medir la actividad enzimática después de una dilución adecuada.

2. Determinación de la actividad CAT

En un sistema de reacción de 3ml, incluir H2021ml al 0,3%, H201,95ml y finalmente añadir 0,05ml de solución enzimática.

Iniciar la reacción y medir la tasa de reducción de OD a una longitud de onda de 240 nm. Una disminución de OD de 0,01 por minuto se define como 1 unidad de energía.

3. Determinación de la actividad POD

En un sistema de reacción de 3ml, incluyendo 0,3% H2021ml. Guaiacol al 0,2% 0,95 ml, pH 7,0 PBS 1 ml, finalmente agregue 0,05 ml de solución enzimática para iniciar la reacción, registre la tasa de aumento de DO a 470 nm. Un aumento en OD de 0,01 por minuto se define como 1 unidad de vitalidad.

4. Determinar el contenido de proteínas mediante el método Coomassie Brilliant Blue G-250.

Enciclopedia Baidu: prueba de catasa