Principios rectores para las pruebas de biodisponibilidad y bioequivalencia de preparados farmacéuticos en el cuerpo humano
La absorción de ingredientes activos en preparaciones orales u otras preparaciones no vasculares se ve afectada por muchos factores, incluido el proceso de preparación, el tamaño de las partículas del fármaco, la forma cristalina o el polimorfismo, los excipientes, los aglutinantes y los desintegrantes, los lubricantes y el recubrimiento. materiales, disolventes, agentes de suspensión, etc. La biodisponibilidad es un indicador importante para garantizar la calidad intrínseca de un fármaco, mientras que la bioequivalencia es la base principal para garantizar la consistencia de la calidad de diferentes preparados que contienen el mismo fármaco. Aunque los conceptos de biodisponibilidad y bioequivalencia no son exactamente los mismos, los métodos de prueba son básicamente los mismos. Para controlar la calidad de los medicamentos y garantizar la eficacia y seguridad de los medicamentos, se formulan estos principios rectores. Los preparados farmacéuticos que deben someterse a pruebas de bioequivalencia o biodisponibilidad se pueden realizar de acuerdo con las leyes y reglamentos promulgados por los departamentos pertinentes.
Los laboratorios clínicos y laboratorios analíticos que realicen pruebas de biodisponibilidad y bioequivalencia de preparados farmacéuticos deberán proporcionar el nombre de la institución y el nombre, título profesional y currículum del responsable médico, científico o analítico.
1. Requisitos básicos para los métodos de análisis de muestras biológicas
La especificidad y sensibilidad de los métodos de análisis cuantitativo de fármacos y sus metabolitos en muestras biológicas son la clave para el éxito de las pruebas de biodisponibilidad y bioequivalencia. . La cromatografía preferida, como HPLC, GC y GC-MS, LC-MS y LC-MS-MS, generalmente debe cuantificarse utilizando el método de estándar interno. También se pueden utilizar métodos biológicos o bioquímicos cuando sea necesario.
Dado que muchos factores, como el tamaño pequeño de la muestra, la baja concentración del fármaco, las sustancias endógenas (como sales inorgánicas, lípidos, proteínas, metabolitos) y las diferencias individuales afectan la medición de las muestras biológicas, es necesario determinar la La estructura, el medio biológico y el rango de concentración esperado de la sustancia se utilizan para establecer un método analítico apropiado para muestras biológicas y validar el método.
1. Características
Se debe demostrar que la sustancia que se mide es un fármaco prototipo o un metabolito activo específico. Las sustancias endógenas y sus metabolitos correspondientes no deben interferir con la determinación de la muestra. . El método de cromatografía debe proporcionar al menos el cromatograma de la muestra biológica en blanco, el cromatograma de la muestra biológica en blanco más la sustancia de referencia (indicar la concentración) y el cromatograma de la muestra biológica después de la administración del fármaco. En el caso de las preparaciones compuestas, se debe reforzar especialmente la investigación de la especificidad para eliminar posibles interferencias.
2. Curva estándar y rango lineal
Según la correlación entre la concentración de la sustancia a medir y la respuesta, la curva estándar se obtiene mediante análisis de regresión. Los rangos de concentración alta y baja de la curva estándar son lineales y los resultados de la medición de la concentración dentro del rango lineal deben cumplir con la precisión y exactitud requeridas por la prueba.
La curva estándar debe establecerse con al menos 6 concentraciones, se debe utilizar el mismo medio biológico que la muestra a ensayar y el rango lineal debe abarcar todas las concentraciones a ensayar. No está permitido extrapolar la concentración de muestras desconocidas del rango lineal. La curva estándar no incluye el punto cero.
3. Precisión y exactitud
Se requiere seleccionar tres concentraciones de muestras de control de calidad y examinar la precisión y exactitud del método al mismo tiempo. La selección de concentración baja está cerca del límite inferior de cuantificación (LLOQ), que es menos de 3 veces el LLOQ. Las concentraciones altas están cerca del límite superior de la curva estándar; elija una concentración en el medio. Se midieron al menos 5 muestras en cada concentración.
La precisión se expresa mediante la desviación estándar relativa (RSD) intradía e interdía de las muestras de control de calidad, que generalmente debe ser inferior a 15 y inferior a 20 cerca del LLOQ.
La precisión se refiere a la cercanía de la concentración de la muestra biológica medida utilizando un método específico a la concentración real. Generalmente debe estar en el rango de 85 ~ 115, y cerca del LLOQ, debe estar en el rango. de 80 ~ 120.
4. Límite inferior de cuantificación
El límite inferior de cuantificación es el punto de concentración más bajo en la curva estándar, que requiere que al menos la concentración del fármaco en la muestra esté dentro de 3 a 5 vidas medias, o 1/10 de Cmax ~ 1/20, su precisión debe estar dentro del rango de 80 ~ 120 de la concentración real y la RSD debe ser inferior a 20.
5. Estabilidad de la muestra
Según circunstancias específicas, examine la estabilidad de las muestras biológicas que contienen fármacos a temperatura ambiente, condiciones de congelación y congelación-descongelación y diferentes tiempos de almacenamiento para determinar la Estabilidad de las muestras biológicas. Condiciones y tiempos de almacenamiento.
6. Tasa de recuperación de extracción
Se debe investigar la tasa de recuperación de concentraciones altas, medias y bajas, y los resultados deben ser consistentes, precisos y reproducibles.
7. Muestra de control de calidad
La muestra de control de calidad es una muestra preparada añadiendo una cantidad conocida del fármaco que se va a analizar en un medio biológico para el control de calidad.
8. Gestión de la calidad
Las pruebas de muestras desconocidas deben comenzar una vez completada la verificación del método de análisis de la muestra biológica. Cada muestra desconocida generalmente se mide una vez y se puede volver a analizar si es necesario. Al medir muestras biológicas todos los días, se debe establecer una nueva curva estándar y, en consecuencia, se deben medir muestras de control de calidad de concentraciones altas, medias y bajas, con dos muestras para cada concentración. La desviación de los resultados de medición de las muestras de control de calidad generalmente debe ser inferior a 65438 ± 05, y la desviación de los puntos de baja concentración generalmente debe ser inferior a 20. Se permite que un máximo de dos muestras de control de calidad con diferentes concentraciones superen el estándar. Si falla, los resultados de la prueba de la muestra de ese día no serán válidos.
9.Resultados de las pruebas
Se debe describir detalladamente el método de análisis utilizado, citar las referencias existentes y el proceso de cálculo de la curva estándar diaria, muestras de control de calidad y muestras desconocidas. se debe proporcionar. También se deben proporcionar para su revisión los cromatogramas de todas las muestras desconocidas, incluidas todas las curvas estándar pertinentes y las muestras de control de calidad.
2. Preparación conjunta
(1) Selección de sujetos
Existen algunos requisitos especiales para los sujetos que participan en estudios de biodisponibilidad y bioequivalencia.
1. Condiciones del sujeto
En general, elegir hombres sanos, y explicar los motivos en casos especiales, como medicación ginecológica. Los medicamentos para niños deben administrarse a adultos. Los requisitos específicos son los siguientes.
(1) El género es masculino.
(2) El requisito de edad es generalmente de 18 a 40 años; la diferencia de edad en el mismo lote de experimentos no debe ser de 10 años.
(3) La diferencia entre el peso y el peso estándar es 10. El peso de los sujetos del mismo lote debe ser similar y la unidad de peso es kilogramo (kg).
(4) Buen estado de salud, con antecedentes de enfermedades cardíacas, hepáticas, renales, del tracto digestivo, anomalías metabólicas, enfermedades neurológicas, etc., examen físico (como electrocardiograma, presión arterial, corazón). frecuencia cardíaca, función hepática, función renal, función pulmonar, etc.), recuento sanguíneo, etc.), no debe haber anomalías. Los medicamentos especiales también requieren otros indicadores correspondientes. Por ejemplo, los medicamentos antidiabéticos deben controlar los niveles de azúcar en sangre.
(5) Sin antecedentes de alergias ni hipotensión ortostática.
(6) No tome ninguna otra droga desde dos semanas antes del período de prueba. Está prohibido fumar, alcohol y bebidas con cafeína durante el período de prueba.
(7) La unidad experimental deberá firmar un formulario de consentimiento informado con los sujetos voluntarios.