Determinación del contenido de gránulos de Pueraria lobata Qinlian
Prueba de idoneidad del sistema y condiciones: utilice gel de sílice unido a octadecilsilano como relleno; utilice metanol-acetonitrilo-agua (6:8:86) como fase móvil; la longitud de onda de detección es de 250 nm. El número de platos teóricos no debe ser inferior a 3000 según el pico de puerarin.
Preparación de la solución de prueba: tomar el producto bajo la diferencia de volumen de carga, triturarlo finamente, tomar aproximadamente 0,3 g, pesarlo con precisión, colocarlo en un matraz Erlenmeyer tapado, agregar con precisión 50 ml de metanol. y se mezcla bien, se pesa, se calienta y se refluye durante 1 hora, se deja enfriar, se pesa nuevamente, se compensa el peso perdido con metanol, se agita bien, se filtra y se toma el filtrado para obtenerlo.
La puerarina se utiliza generalmente como indicador para la determinación del contenido, como por ejemplo:
Utilice HPLC para medir el contenido de baicalina en los gránulos de Pueraria Qinlian. Instrumento: Serie Japón Shimadzu HPLC-10A. La columna cromatográfica es una columna C18 (250 mm x 4 mm, 10 μm); fase móvil: metanol-agua-tetrahidrofurano (THF) (45:55:6) (el agua es una solución acuosa de ácido fosfórico con un caudal de pH = 2,7); /min; temperatura de la columna 15 ℃; longitud de onda del detector 280 nm. Las muestras se sonicaron con metanol al 40%.
Uso del método HPLC de doble longitud de onda para determinar el contenido de puerarina y baicalina en gránulos de Pueraria Qinlian. Instrumento: Cromatógrafo líquido de alta resolución Waters515. La columna cromatográfica es una columna Kromasil C18 (4,6 mm x 250 mm, 5 μm); se utiliza metanol (A)-0,2 ácido fosfórico (B) como fase móvil, elución en gradiente: 0 min: A35, B65, 8 min A35, B65, 10 min A48, B52, 26minA48, B52, 28minA35, B65, 35minA35, B65. La longitud de onda de detección es λ1=250 nm (detección de puerarina), λ2 = 315 nm (detección de baicalina), la temperatura de la columna es 30 °C y el caudal es 1,0 ml/min. Las muestras se sonicaron con metanol.
Utilizando el método HPLC para determinar el contenido de puerarina en gránulos de Pueraria Qinlian. Instrumento: Cromatógrafo líquido de alta resolución HP-1100. La columna cromatográfica es una columna ODS (5 µm, 250 mm x 4 mm); la fase móvil es metanol-acetonitrilo-agua (12:8:80); la temperatura de la columna es temperatura ambiente; el caudal es de 0,8 ml/min. Las muestras se extrajeron con reflujo de metanol.
El contenido de puerarin en los gránulos de Pueraria Qinlian se determinó mediante el método de escaneo de capa fina. Condiciones de capa fina: gel de sílice G, el agente revelador es una solución de capa inferior de cloroformo-metanol-agua (60:35:10). Condiciones de escaneo: λR = 256 nm, λS = 360 nm, SX = 3, hendidura 1,2 × 1,2 nm, escaneo lineal con método de reflexión, lámpara de fuente de luz D2; Las muestras se extrajeron ultrasónicamente con etanol absoluto y luego se procesaron con una columna de alúmina neutra.
Por ejemplo: clorhidrato de berberina: utilice espectroscopía de segunda derivada para determinar el contenido de clorhidrato de berberina en los gránulos de Pueraria Qinlian. La muestra se extrajo con etanol absoluto a reflujo. Condiciones de medición: rango de longitud de onda 300~450 nm, hendidura 2 nm, Δλ=2 nm, rango de absorbancia -0,1 ~ 0,1, velocidad de escaneo 40 nm/cm.