Pasos detallados para extraer proantocianidinas de semillas de uva y determinar su contenido.
Debido a sus funciones únicas, se utilizan en medicina, cosmética y salud. alimentos.
Productos. Las semillas de uva son un subproducto de la producción de vino y jugo de uva y generalmente se desechan como alimento o basura, lo que provoca desperdicio de recursos y contaminación ambiental.
Teñido. Por lo tanto, este artículo explora el proceso de extracción de proantocianidinas de las semillas de uva.
1 Materiales y métodos
1.1 Materiales de ensayo
Semillas de uva, etanol absoluto, metanol, acetona.
(AR), ácido clorhídrico concentrado (AR), vainillina (AR), éter de petróleo (AR),
estándar de proantocianidina (AR).
1.2 Instrumentos y Equipos
Trituradores, centrífugas, espectrofotómetros UV, balanzas electrónicas,
Osciladores ultrasónicos, hornos de secado al vacío, bombas de vacío.
Método de preparación de 1. 3. Proantocianidinas
Lavar las pepitas de uva, secarlas, triturarlas y desgrasarlas con éter de petróleo para su posterior uso. Considera
Poner 5g de polvo de semilla de uva seca desgrasada en un vaso de precipitados y añadir 25 mL.
Para una solución acuosa de etanol al 70%, coloque el vaso en un oscilador ultrasónico y vibre.
Después de oscilar durante 10 minutos, retire toda la solución acuosa de etanol de polvo de semilla de uva en el vaso de precipitados.
Poner en un matraz de tres bocas, remover (no demasiado rápido) y calentar hasta.
Después de 60 minutos a 70°C, filtrar en caliente y recoger el filtrado y el residuo del filtrado.
Colocar el residuo del filtro en un matraz de tres bocas, añadir disolvente y extraer el residuo del filtro según las primeras condiciones de extracción.
Después de la segunda y tercera extracción, la cantidad de etanol al 70% y agua utilizada fue de 22,5 mL.
El tiempo de extracción es de 30 minutos, recogiéndose el filtrado en cada ocasión. Combinar los tres filtrados.
Destilación y secado para la obtención de productos de proantocianidinas.
1.4 Determinación del contenido de proantocianidina
(1) Preparación de solución estándar. Pesar con precisión 10,4 mg de proantocianidinas.
Sustancia química de referencia, disuelta en etanol absoluto, con una precisión de 100 ml.
Preparar una solución estándar con una concentración de 104,0 μg/ml.
(2) Determinación de la relación entre absorbancia y longitud de onda de proantocianidinas.
Las proantocianidinas tienen un pico de absorción único a 280 nm.
3) Dibujo de curva estándar. Llame a los estándares de proantocianidina anteriores respectivamente.
Los líquidos de 10 son 1,00 ml, 2,00 ml, 3,00 ml, 4,00 ml y 5,00 ml.
Añadir etanol absoluto al tubo de ensayo graduado de mL, ajustar el volumen a 10 mL y taparlo herméticamente.
Agitar bien hasta obtener una concentración de 10. Solución de serie estándar de 4 μg/ml, 20,8 μg/ml,
31,2 μg/ml, 41,6 μg/ml, 52,0 μg/ml.
Líquido. A 280 nm, se utilizó etanol absoluto como fondo de puesta a cero en blanco.
Valor, determinar el valor de absorbancia de la solución serie estándar,
(4) Determinación del contenido de proantocianidina. Pesar con precisión 20 mg (con una precisión de
0,1 mg) de extracto de semilla de uva seca y diluir a 100 ml con etanol absoluto.
(Para muestras con poca solubilidad en alcohol, se puede añadir una pequeña cantidad de agua para que se disuelvan y queden anhidras.
Diluir a volumen con etanol. Si es necesario, centrifugar a 4 000 r /min durante 65,438 ± 00 min,
Tomar 2 ml del sobrenadante, diluirlo con etanol absoluto a 65438 ± 00 ml) y agitar bien.
Incluso, medir la absorbancia de la muestra según el método anterior y buscarla según la curva estándar.
Calcule la concentración de proantocianidinas correspondiente, y calcule la pureza y tasa de extracción de las proantocianidinas.