Materiales tutoriales completos para el examen de técnicos de laboratorio clínico: Introducción al género Salmonella
(1) Características biológicas de Salmonella
1. Morfología y tinción: el tamaño de este género es (0,7 ~ 1,5) μm × (2,0 ~ 5,0) μm, sin esporas. bacilos rectos gramnegativos no encapsulados. A excepción de Salmonella gallinarum, todos tienen flagelos en todo el cuerpo y pueden moverse, y la mayoría tiene pili.
2. Características del cultivo: los requerimientos nutricionales no son altos, puede crecer en cultivo de agar ordinario y es uniformemente turbio en medio de cultivo líquido. Se pueden formar colonias transparentes o translúcidas con un diámetro de aproximadamente 2 a 4 mm en agar SS y medio agar MacConkey a una temperatura de 35 °C a 37 °C durante 24 horas, y son tolerantes a las sales biliares. Los productores de H2S forman un centro negro en el agar SS.
3. Reacciones bioquímicas: A excepción de las bacterias de Arizona, no se puede fermentar la lactosa. La mayoría de las pruebas IMViC son - -, KIA: K/A, producción de gas/-, H2S/-, MIU: cinética, indol. -, ureasa.
4. Estructura del antígeno: Compuesto principalmente por antígeno 0 y antígeno H. Algunas cepas tienen antígenos de superficie similares al antígeno K de E. coli, que están relacionados con la virulencia de la bacteria. se denominan antígenos Vi.
Antígeno (1)0: el antígeno bacteriano. Hay 58 tipos de antígenos bacterianos en el género Salmonella, que están marcados secuencialmente con números arábigos: basándose en el hecho de que Salmonella tiene el mismo antígeno O, los taxónomos agrupan las bacterias con el mismo antígeno en un grupo, lo que significa que Salmonella se divide en 42 grupos (o grupos). Es decir, los grupos A, B, C...Z y O16~O67. Cada grupo tiene antígenos específicos de grupo, como el grupo A O2, el grupo B 04, el grupo D O9, etc.
(2) Antígeno H: antígeno flagelar. El antígeno H es la base de los estereotipos.
El antígeno de Salmonella H tiene dos fases la primera fase es el antígeno específico, representado por a, b, c...; la segunda fase es el mismo antígeno, representado por 1, 2, 3. .. …expresar.
(3) Antígeno de superficie: Se ha confirmado que Salmonella tiene tres antígenos: Vi, M y 5. El antígeno Vi se destruye calentándolo a 60°C durante 30 minutos o tratándolo con ácido fénico. Su presencia puede impedir la aglutinación del antígeno O y el anticuerpo correspondiente.
5. Variabilidad
(1) Mutación S-R, el tipo de colonia suave se convierte gradualmente en un tipo rugoso después del cultivo y paso artificial. En este momento, el antígeno polisacárido específico en la superficie de las células bacterianas se pierde y puede ocurrir la autocoagulación en solución salina fisiológica.
(2) La mutación H-O se refiere a la mutación en la que la Salmonella flagelada pierde su flagelo.
(3) Mutación de fase, Salmonella con antígeno H bifásico (Fase I es la fase específica, Fase II es la fase no específica) se convierte en una bacteria monofásica con un solo antígeno H de fase, llamada fase variación.
(4) Mutación V-W, mutación que pierde todos los antígenos Vi.
(2) Patogenicidad
Existen tres tipos de factores patogénicos: invasividad, endotoxina y enterotoxina. Clínicamente puede provocar gastroenteritis, fiebre entérica, bacteriemia o sepsis. Entre ellas, la fiebre entérica es una enfermedad infecciosa de declaración obligatoria.
1. Fiebre entérica: fiebre tifoidea y fiebre paratifoidea. Síntomas febriles crónicos causados por Salmonella typhi y Paratyphi. Es una de las enfermedades infecciosas de declaración obligatoria.
2. Intoxicación alimentaria: Las especies de Salmonella más comunes que causan intoxicación alimentaria son Typhimurium, Enteritis, Thompson, Choleraesuis y Salmonella Paratyphi B y C.
3. Enteritis crónica: La Salmonella puede provocar enteritis crónica en ancianos y niños.
4. Septicemia: causada mayoritariamente por Salmonella choleraesuis.
5. Infección local de Salmonella como cuello, cintura, etc.
Existen informes de infecciones hospitalarias en niños causadas por Salmonella typhimurium.
(3) Examen microbiológico
1. Recolección de muestras: se recolectan diferentes muestras según las diferentes enfermedades para su aislamiento y cultivo. Se recolecta sangre en la primera y segunda semanas de fiebre entérica, y se recolectan heces y orina en la segunda y tercera semanas. La tasa positiva de aislamiento bacteriano de la médula ósea fue alta durante todo el curso de la enfermedad. Recolecte alimentos y heces en caso de intoxicación alimentaria.
2. Métodos de inspección e identificación
(1) Aislamiento y cultivo
1) Heces: Generalmente, las heces o hisopos anales se inoculan directamente en SS y MacConkey. Placas anteriores, el propósito de utilizar dos medios de cultivo es aumentar la tasa de detección positiva de las muestras.
2) Sangre y médula ósea: Extraer 5ml de sangre del paciente o 0,5ml de médula ósea, inocularlo inmediatamente en un tubo de ensayo de 5ml que contenga caldo de sales biliares al 0,5% o caldo de glucosa para enriquecimiento bacteriano y trasplantar. el cultivo en la sangre después de 48 horas. Si hay crecimiento bacteriano en la placa y en el medio de identificación intestinal, tome una tinción de Gram del frotis bacteriano e informe el resultado. Si el cultivo de enriquecimiento se cultiva continuamente durante 7 días y aún no hay crecimiento bacteriano, el informe es negativo.
3) Orina: Tomar de 2 a 3 ml de orina y enriquecerla con caldo sulfato, luego inocularla en medio de selección de bacterias intestinales o en placa de sangre para aislamiento y cultivo. La orina también se puede centrifugar el precipitado para. separación y cultura.
4) Pus por infección local.
(2) Identificación: La identificación de Salmonella es la misma que la de Shigella y debe basarse en reacciones bioquímicas y en la identificación serológica.
1) Identificación preliminar: Si se trata de bacilos Gram negativos, realizar una prueba de oxidasa. Si es negativo, recoger las colonias sospechosas y trasplantarlas a KIA y MIU respectivamente. Y realizar reacciones bioquímicas. Se realizó una prueba de aglutinación en portaobjetos utilizando suero diagnóstico polivalente de Salmonella.
Cualquier producto que cumpla con KIA: K/A, producción de gas/-, H2S/-, MIU: cinética, indol-, ureasa, oxidasa-, catalasa, reducción de nitratos, Salmonella polivalente. La prueba de aglutinación en portaobjetos de suero. fue positivo y se identificó como Salmonella spp.
2) Identificación final: La identificación serológica de Salmonella se basa principalmente en el suero multivalente del antígeno O de Salmonella y el suero del factor monovalente de los antígenos O, H y Vi. Salmonella paratyphi A, Salmonella typhimurium y Salmonella typhi pertenecen a los serogrupos A, B y D respectivamente.
(3) Diagnóstico serológico: Prueba de Feida: utilice los antígenos conocidos de Salmonella typhi 0 y H, el antígeno de Salmonella A, B y C Paratyphi H para diluir y realizar una prueba de aglutinación cuantitativa con el suero analizado para detectar el anticuerpo. contenido en el suero del paciente para determinar si el cuerpo está infectado por Salmonella que causa fiebre entérica e identificar el tipo de Salmonella.
(4) Principios de prevención y control
Fortalecer la higiene de los alimentos, prevenir la infección bucal por alimentos y fuentes de agua contaminados, tratar activamente a los portadores, inyección subcutánea de vacuna de bacterias muertas o administración oral de vacuna de bacteria viva atenuada Estas son varias medidas principales para prevenir la infección bacteriana por Salmonella. El tratamiento clínico consiste en seleccionar los antibióticos adecuados basándose en los resultados de las pruebas de sensibilidad a los medicamentos in vitro, mantener el equilibrio de agua y electrolitos y afrontar activamente las complicaciones como hemorragia intestinal, perforación intestinal, colecistitis, miocarditis, etc. Para la infección por Salmonella typhi, los antibióticos disponibles incluyen cloranfenicol, fluoroquinolonas, ampicilina, cotrimoxazol, cefalosporinas de tercera generación, etc.