¿Cuáles son las metodologías de verificación?
La llamada verificación del método consiste en verificar el método analítico para demostrar que cumple con el propósito y los requisitos de la prueba. Para explicarlo de manera más sencilla, de acuerdo con los requisitos del proyecto de prueba, primero se debe configurar el contenido de la verificación y el método analítico utilizado debe verificarse mediante experimentos bien diseñados para cumplir con los requisitos del proyecto de prueba.
Para garantizar el control de calidad del producto, la validación del método es esencial. Sólo se pueden utilizar métodos analíticos validados para las pruebas analíticas en la producción farmacéutica. Se puede decir que la validación de métodos es la base para estándares de calidad específicos.
Entonces, ¿qué incluye el método de verificación? ¿Cuáles son sus requisitos de verificación?
1. La linealidad se refiere al grado en que los resultados de la prueba se relacionan linealmente con la concentración de materias primas o productos en la muestra dentro de un rango establecido. La linealidad es la base de las pruebas cuantitativas y los proyectos que requieren pruebas cuantitativas deben verificar la linealidad. Generalmente, la solución madre se diluye con precisión o las muestras se pesan con precisión por separado para preparar una serie de concentraciones de la sustancia analizada (más de 5). La secuencia se ejecuta desde concentraciones pequeñas a grandes, y la función del área del pico y la concentración. se utiliza para trazar y se utiliza el método menos cuadrático. Realice cálculos de regresión lineal mediante multiplicación para examinar la linealidad del método de análisis.
2. La precisión se refiere al grado de diferencia entre los resultados medidos y el valor real, que también se puede llamar autenticidad. Todos los métodos analíticos que requieren análisis cuantitativo deben verificar la precisión. La precisión debe establecerse dentro del rango especificado. Para los API, se pueden utilizar para la medición estándares de pureza conocida o API que cumplan con los requisitos. Si es necesario, los resultados se pueden comparar con otro método que tenga precisión establecida.
3. Límite de detección. El límite de detección se refiere a la cantidad más baja de analito en una muestra que se puede detectar y no requiere una cuantificación precisa. El límite de detección representa la sensibilidad del método analítico. El límite de detección se puede determinar analizando una serie de muestras con concentraciones conocidas del analito para determinar la concentración mínima que puede detectar el analito de manera precisa y confiable. La señal de la muestra con concentración conocida también se puede comparar con la señal de ruido. y determinar el límite de detección en función de la concentración cuando la relación señal-ruido es 3:1. Generalmente, se requiere alcanzar el 0,05 de la concentración de inyección.
4. Durabilidad. La durabilidad se refiere a la estabilidad de los resultados de la medición cuando ocurren pequeños cambios en las condiciones de medición. La durabilidad indica principalmente la capacidad antiinterferente del método. Los principales factores cambiantes incluyen: la composición de la fase móvil, el caudal y el valor de pH, la columna cromatográfica, la temperatura de la columna, etc. Después de la prueba, se debe demostrar si pequeños cambios pueden cumplir con los requisitos de la prueba de idoneidad del sistema para garantizar que el método sea efectivo.
5. Exclusividad. La especificidad se refiere a la capacidad de un método analítico para separar productos de las impurezas, también conocida como selectividad. Para las pruebas de pureza, se pueden agregar impurezas conocidas al estándar o se puede usar el producto crudo directamente para verificar si el pico del producto está interferido por impurezas. Para el seguimiento del proceso, se pueden usar muestras del sistema de reacción para verificar si hay interferencia de otros. impurezas. Si es necesario, se puede utilizar un detector de matriz de diodos o un detector de espectrómetro de masas para comprobar la pureza de los picos cromatográficos. En términos generales, se requiere que la separación entre el producto y las impurezas sea superior a 2,0.
6. Alcance. El rango se refiere al intervalo de concentración del analito en la muestra que puede lograr una cierta exactitud, precisión y linealidad. En pocas palabras, el rango es la concentración máxima y mínima del analito en la muestra para la cual es aplicable el método analítico. Los métodos analíticos que requieren detección cuantitativa deben verificar el rango. Al probar la pureza, el rango debe ser del 80 % al 120 % de la concentración de la prueba.
7. La precisión se refiere a la cercanía entre los resultados obtenidos por una serie de pruebas en la misma muestra homogénea bajo condiciones específicas. La precisión generalmente se expresa como desviación estándar relativa y el número de muestreos y pruebas es al menos 6 veces. La precisión se examina desde estos tres aspectos: repetibilidad, precisión intermedia y reproducibilidad.
a. Repetibilidad: Es la precisión de los resultados medidos por un mismo analista en las mismas condiciones de operación y en un intervalo de tiempo corto. Generalmente, para la evaluación se utilizan los resultados de 6 mediciones de muestras al nivel de concentración del 100%.
b. Precisión intermedia: la exactitud de los resultados de medición en un mismo laboratorio cuando cambian las condiciones internas como fechas, analistas e instrumentos.
c. Reproducibilidad: se refiere a la precisión de los resultados medidos por diferentes analistas entre diferentes laboratorios.
8. Límite cuantitativo.
El límite de cuantificación se refiere a la cantidad más baja de analito en una muestra que puede detectarse cuantitativamente. Los resultados de la medición requieren un cierto grado de exactitud y precisión. El límite de cuantificación refleja la capacidad del método analítico para realizar una detección cuantitativa sensible. Cuando se detectan impurezas cuyo contenido debe controlarse estrictamente, se debe examinar el límite de cuantificación del método para garantizar que las impurezas se puedan cuantificar con precisión. Generalmente, el límite de cuantificación se determina en función de la concentración o volumen de inyección correspondiente cuando la relación señal-ruido es 10:1.
En términos generales, la verificación del método debe realizarse simultáneamente al desarrollar métodos analíticos, pero no se debe verificar todo el contenido siempre que el contenido de la verificación sea suficiente para demostrar la racionalidad del método analítico. Zhongke Testing tiene una amplia experiencia en pruebas y puede ayudar a los clientes a realizar la verificación de métodos para garantizar una producción de productos de alta calidad. Si tiene alguna necesidad al respecto, póngase en contacto con nosotros.