¿Qué significa el resultado de inmunohistoquímica P63?

P63 puede marcar muchos tipos de células, como el epitelio escamoso y el mioepitelio. La inmunohistoquímica es la aplicación del principio básico de la inmunología: la reacción antígeno-anticuerpo, es decir, el principio de unión específica de antígeno y anticuerpo.

Los antígenos (polipéptidos y proteínas) en tejidos y células se determinan mediante reacciones químicas que hacen que los reactivos cromogénicos (fluoresceína, enzimas, iones metálicos e isótopos) marquen anticuerpos para desarrollar el color, cualitativo y relativamente cuantitativo. Los estudios se llaman inmunohistoquímica o inmunocitoquímica.

Datos ampliados:

Método de inmunotinción

1, método directo

La fluoresceína se marca directamente sobre un anticuerpo específico (-anticuerpo) On arriba, el anticuerpo marcado se une al antígeno (en la sección) y el antígeno se observa bajo un microscopio de fluorescencia → detección.

△El anticuerpo marcado con enzima debe visualizarse y luego examinarse bajo un microscopio.

Las ventajas del método directo: sencillez, poco tiempo y gran especificidad. Desventajas: baja sensibilidad, requiere grandes cantidades de anticuerpos (antieconómico). Aplicación: ¡Básicamente no es necesario!

2. Marcado indirecto con fluoresceína sobre el anticuerpo secundario (anticuerpo secundario: anticuerpo IgG contra el animal que produjo el anticuerpo primario).

※Examen microscópico después del desarrollo del color

Características: Más sensible que el método directo, puede marcar un anticuerpo y reconocer múltiples antígenos.

3. Método puente Ab sin etiqueta:

El "método puente" es una mejora de los anticuerpos marcados con enzimas. Después del tercer anticuerpo, el segundo anticuerpo es un anticuerpo puente no marcado.

(1) Método de puente único

(2) Método de puente doble

Después del tercer anticuerpo, repita el segundo anticuerpo y el tercer anticuerpo nuevamente.

Puede aumentar la intensidad del teñido.

★Nota especial: Presta atención a la relación entre especies animales.

4. Método de pasteurización (método peroxidasa-anti-peroxidasa, método de pasteurización)

~ Es una mejora del método puente, es decir, el complejo PAP se forma primero Objeto→ complejo antígeno-anticuerpo-anticuerpo anti-IgG-PAP.

Este método simplifica los pasos de la operación, mejora la sensibilidad y las muestras teñidas se pueden almacenar durante mucho tiempo.

5.Método ABC (método del complejo avidina-biotina-peroxidasa, método ABC).

Avidina: Avidina, una glicoproteína con cuatro sitios de unión a biotina.

Biotina: Biotina-vitamina H, las dos tienen una afinidad extremadamente fuerte y son irrompibles.

La diferencia entre el método ABC y el método PAP es que se utiliza la capitalización ABC en lugar de la capitalización PAP.

(1) Preparación del complejo ABC.

(2) Principio de reacción 2) Método ABC.

6. ¿Método SP o SAP (tinción con estreptavidina marcada con peroxidasa o con fosfatasa alcalina marcada con peroxidasa)? estreptavidina/peroxidasa o estreptavidina/fosfatasa alcalina)

Referencia:

Enciclopedia Baidu-Tecnología de inmunohistoquímica