Puntos técnicos para el paso de líneas celulares

1. Materiales: Los materiales proceden principalmente de operaciones quirúrgicas o biopsias de tejido tumoral. Al recolectar materiales se debe evitar el tejido necrótico y seleccionar áreas con células tumorales concentradas y buena viabilidad. Las metástasis tumorales, los ganglios linfáticos o el líquido torácico y ascítico son mejores materiales de cultivo. Cultive el material lo antes posible después de tomarlo. Si por algún motivo no se puede cultivar inmediatamente, se puede congelar. Los métodos de cultivo y criopreservación son los mismos que para los tejidos normales mencionados anteriormente.

2. Exclusión de fibroblastos: el tejido tumoral a menudo se mezcla con algunos fibroblastos, que pueden crecer al mismo tiempo que las células tumorales durante el cultivo y, a menudo, abrumar a las células cancerosas, lo que provoca que el crecimiento de las células cancerosas se bloquee o incluso se bloquee. desapareciendo. Deben ser eliminados cuidadosamente. Los métodos de eliminación suelen incluir: raspado mecánico, adherencias repetidas, eliminación digestiva, digestión con colagenasa, etc.

3. Mejorar la tasa de supervivencia y la tasa de crecimiento de las células tumorales en cultivo.

Según la experiencia experimental, es difícil cultivar células tumorales in vitro, y es aún más difícil establecer una línea de células tumorales que pueda pasarse. Generalmente, cuando los componentes o células del tumor se encuentran en cultivo primario, deben adaptarse al nuevo entorno para poder crecer. No pueden limitarse a métodos de cultivo generales y se deben tomar algunas medidas especiales. Por ejemplo: utilice la matriz adecuada, la capa inferior de colágeno de cola de rata y la capa inferior de células alimentadoras, etc. Utilizando factores de crecimiento celular, seleccione diferentes factores promotores del crecimiento celular según los diferentes tipos de células, como insulina, hidrocortisona, estrógeno, etc. También se puede considerar el cultivo de vectores animales.