¿Cuáles son las precauciones y los factores que influyen en la tinción inmunohistoquímica?

Hay muchos factores que afectan la calidad de la tinción inmunohistoquímica. Durante el experimento, se debe prestar atención a la selección y fijación de tejidos, la selección de anticuerpos comerciales de buena calidad, la selección y el uso adecuados de métodos de bloqueo y recuperación de antígenos, y una operación y comparación estrictas.

1. Pueden ocurrir reacciones falsas negativas cuando:

1) El antígeno a analizar en el tejido se ha descompuesto y destruido, o el contenido de antígeno es demasiado bajo.

2) El antígeno es; cubierto, principalmente debido al uso de fijadores de aldehídos que entrecruzan proteínas macromoleculares en los tejidos a través de enlaces de aldehídos para cubrir el antígeno a analizar

3) El anticuerpo es de mala calidad o está incorrectamente diluido

4) Errores de operación técnica, etc.

2. Pueden ocurrir reacciones falsas positivas en:

1) Reacción cruzada entre anticuerpos y no antígenos a probar, lo cual es fácil de ocurrir cuando se usan anticuerpos policlonales

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2) Adsorción no específica de anticuerpos por el tejido, especialmente cuando el tejido está necrótico en áreas grandes o hay mucho líquido rico en proteínas en el tejido.

3) El efecto; Es probable que aparezca peroxidasa endógena en el bazo. En la tinción de la médula ósea y algunas lesiones inflamatorias, el efecto de la fosfatasa alcalina endógena, especialmente la alta concentración de fosfatasa alcalina en el epitelio de la mucosa intestinal y el borde en cepillo del túbulo proximal renal, si el tratamiento no es exhaustivo, es fácil producir resultados positivos falsos.

4) Error de juicio, confundiendo la señal inmunohistoquímica positiva del tejido normal restante en el tejido tumoral con la reacción de tinción del tumor.

5) Cuando la infiltración tumoral destruye el tejido normal. Cuando se forma, las proteínas solubles en el citoplasma de las células normales dañadas se liberan y estas últimas son absorbidas o fagocitadas de forma no específica por las células tumorales, provocando el tumor. las células reaccionan positivamente a este antígeno ⑥ Interferencia de pigmentos exógenos y endógenos.