Ideas de investigación para rutas de señales
Métodos de investigación de transducción de señales de receptores (segunda edición)
Autor: (inglés). Willars (G.B.), (inglés)Trabajo original de Challiss (R.A.J),
Traducido por Zhang Youyi
Editorial: Peking University Medical Press.
Fecha de publicación: 1 de marzo de 2008
Este libro refleja de manera integral el estado y los resultados de las investigaciones más recientes en el campo de los receptores acoplados a proteína G (GPCR) y su transducción de señales. Se presentan en detalle la tecnología, los métodos y los principios de GPCR y la investigación de transducción de señales. El contenido incluye la unión de receptores y ligandos, preparación de anticuerpos receptores, interacción y excitación de receptores y proteínas G, expresión y localización de receptores, internalización y modificaciones postraduccionales, interacciones entre GPCR y proteínas, y cómo determinar los aspectos fisiológicos y farmacológicos. Las funciones de los receptores se estudian mediante estrategias de knockout y knockout.
La expresión del receptor se puede regular mediante tratamiento con anticuerpos o ARNi/sobreexpresión, y luego la expresión de genes en la vía posterior se puede estudiar mediante tecnología de chips genéticos.
Una vez completado el método anterior, podemos usar buenos anticuerpos del receptor para realizar una inmunoprecipitación (CoIP), tomar todas las proteínas que interactúan con él y cocinar las perlas directamente (proteína A-argrosa- perlas), realice SDS-PAGE, use IgG como control y luego realice espectrometría de masas para identificar proteínas diferenciales. Por supuesto, esto es sólo una prueba complementaria. La proteína con un peso molecular grande en la imagen del gel puede ser una proteína descendente, pero es una proteína descendente.