¿Qué es una enfermedad genética de la neuritis? Me operaron en el Hospital Shanghai Huashan en abril de este año. El médico dijo que me quedaba medio año de vida y que eventualmente moriría de atrofia muscular.
Los países europeos y americanos se tomarán en serio dos enfermedades infecciosas e inmunomediadas, así como las enfermedades desmielinizantes del sistema nervioso central.
Inflamación se utiliza para referirse a la neuropatía óptica desmielinizante. Cada vez más estudios han encontrado que la desmielinización primaria o idiopática IDON es la enfermedad oftalmológica más común en el Hospital Wei Zai Beijing 301.
Tipo [1], mediante imágenes por resonancia magnética se descubrió que entre 50 y 70 pacientes con neuritis óptica tenían desmielinización asintomática en el cerebro.
Las autopsias de pacientes con neuritis óptica han revelado lesiones de la vaina [2], placas desmielinizantes y engrosamiento del nervio óptico [8];
Recientemente, la etiología de la neuritis óptica en mi país también ha sido investigada. Se ha encontrado que es compatible con el nervio óptico. Entre los pacientes que cumplen los criterios de diagnóstico de enfermedad inflamatoria, IDON es el más común y representa el 73,5% [3]. Actualmente, muchos estudiosos se dedican a buscar las causas de las enfermedades desmielinizantes.
Las posibles causas se dividen en dos categorías: causas internas y causas externas. Entre los factores intrínsecos, los factores genéticos [4] han atraído mucha atención y los factores genéticos son propensos a sufrir desventajas.
Una respuesta autoinmune al ataque de mielina puede ser una de las causas del daño de la mielina y la pérdida del nervio óptico.
Sin embargo, los mecanismos de daño tisular y apoptosis no se comprenden bien. Debido a que los mediadores del gen del receptor de interleucina,
la transducción de señales de interleucina desempeñan un papel importante en el proceso inmunológico del cuerpo, ha recibido cada vez más atención en los últimos años. Blanco
Se cree que los genes del receptor de interleucina-2 (IL-2R) y del receptor de interleucina-7 (receptor de IL-7,
IL-7R) desempeñan un papel en las enfermedades autoinmunes. juega un papel importante en la susceptibilidad genética, por eso elegimos.
El gen IL-2R y el gen IL-7R se utilizaron como genes candidatos para estudiar la susceptibilidad genética de IDON. Al mismo tiempo, basándonos en estudios extranjeros relevantes [5-7], seleccionamos el sitio rs2104286 del gen IL-2R y el sitio rs6897932 del gen IL-7R.
Realizar análisis de polimorfismo de un solo nucleótido.
Objetos y métodos
1. Objetos de investigación
Grupo de pacientes: Seleccionados del Departamento de Oftalmología y Neurología del Hospital General del Ejército Popular de Liberación de septiembre de 2007 a Marzo de 2009.
72 pacientes ambulatorios y hospitalizados recién diagnosticados (los criterios de admisión se refieren al estudio estadounidense ONTT y los criterios de diagnóstico
IDON de Leonard [8-9]); firmó el formulario de consentimiento informado. Grupo de control: cerrado
Se incluyó un total de 865.438 personas sanas (48 hombres, 33 mujeres, edad promedio 34 años) en la misma zona durante el mismo período.
¿Los pacientes no tienen parentesco sanguíneo, no tienen infecciones recientes, no han usado inmunosupresores y no tienen neuritis? Diabetes tipo 2,
Esclerosis múltiple, antecedentes médicos y familiares de Graves, aceptaron participar en este estudio y firmaron un formulario de consentimiento informado.
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2. Métodos de investigación:
1. Extracción de ADN genómico: Extraer 5 ml de sangre venosa del paciente con un tubo de extracción de sangre al vacío y separar los glóbulos blancos.
Extrae el ADN mediante el método de la columna de centrifugación y mide la concentración con un espectrofotómetro UV.
2. Diseñar y sintetizar cebadores específicos de genes para IL-2R e IL-7R (consulte la Tabla 1 para ver las secuencias de cebadores).
Tabla 1 Secuencias de cebadores específicos de los genes IL-2R e IL-7R
Nombre del gen gen diana
Longitud del fragmento (pb)
Secuencia del cebador específico
Interleucina-2R 457
Cebador aguas arriba: 5'-AAGTTGGGGGGGGAAAAgCC-3'
Cebador aguas abajo: 5'-caggagctggaaggttgcagtgag-3'
Interleucina 7R 373
Cebador aguas arriba: 5'-caagcaccctgagaccctacc-3'
Cebador aguas abajo: 5'-cagcgtttgcctatgtccagt-3'
3.Reacción en cadena de la polimerasa del gen IL-2R: 15.
En el sistema de µl, las condiciones de la reacción de PCR son: predesnaturalización a 94°C durante 2 min, desnaturalización a 94°C durante 30 s, hibridación a 67°C durante 30 s, extensión a 72 °C durante 30 s, y ***30 ciclos, y finalmente extender a 72°C durante 5 minutos, y almacenar a 4°C la dirección inversa de PCR del gen diana IL-7R; ser: sistema de 30 µl, las condiciones de reacción de PCR son 95 °C durante 5 minutos de predesnaturalización, desnaturalización a 95 °C durante 30 segundos, hibridación a 62 °C durante 30 segundos, 30 ciclos a 72 °C durante 30 segundos, y finalmente 7 min a 72°C, luego se almacenó a 4°C.
4. Reacción de digestión de restricción: 20 μl de sistema de digestión: 2 μl de tampón 10X, 0,5 μl de NDeI, desionizado.
7,5 µl de agua de semilla, 10 µl de producto de PCR del gen diana IL-2R, completamente digeridos en un baño de agua a 37 ℃ durante 4 horas. Limitaciones
Utilice electroforesis en gel de agarosa 2,5 para separar los productos de digestión enzimática y observe los resultados bajo un transiluminador UV.
5. Secuenciación de genes: el producto de amplificación por PCR del gen diana IL-7R se envió a Beijing Aoke Biotechnology Co., Ltd.
para su secuenciación, y el software Chromas leyó la secuenciación. mapa para análisis de genotipo.
En tercer lugar, análisis estadístico
Cuente directamente las frecuencias genotípicas y alélicas de IL-2R e IL-7R, y compárelas con el grupo de control e IDON.
Utilice la prueba de χ2 y la fórmula de Woolf para calcular el intervalo de confianza del valor OR, y el estándar para la prueba de significancia es p.