¿Cuál es la actividad de la gelatinasa?

La gelatinasa, o colagenasa tipo IV, pertenece a la familia de las metaloproteinasas y es una hidrolasa de matriz específica que degrada el colágeno tipo IV. Su actividad está estrechamente relacionada con la invasión y metástasis de células tumorales. La determinación del efecto de los fármacos sobre la actividad de las metaloproteinasas en las células tumorales es un aspecto importante en la evaluación de los efectos antiinvasivos de los fármacos. La célula de fibrosarcoma humano HT1080 puede secretar una gran cantidad de gelatinasas con pesos moleculares de 72 KD y 92 KD. Remoje la solución del fármaco con extracto de metaloproteinasa de células tumorales y la electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS puede separar las dos gelatinasas según su peso molecular, mostrando dos bandas de tinción negativas. El efecto de los fármacos sobre la actividad de las metaloproteinasas se puede juzgar en función del brillo y el ancho de las bandas, y se puede utilizar para estudiar los efectos y mecanismos de la antiinvasión y el transporte de fármacos.

Acción gelatinasa

El extracto de metaloproteinasa contiene principalmente gelatinasa de 72KD y 92KD. Después de la electroforesis del extracto de metaloproteinasa, agregue el fármaco al tampón de reacción para permitir que reaccione con la cinta. Después de una incubación prolongada, las bandas de tinción negativa de los consumidores de drogas no aparecieron ni se debilitaron, lo que indica que la droga tenía un efecto inhibidor sobre la actividad de la gelatinasa. Además, una vez procesada la película, se puede utilizar el escaneo de bandas negativas para análisis cuantitativos con un densitómetro láser de 633 nm.