Plantar Anomatis sin suelo
1 Investigación sobre el establecimiento de cultivo estéril
En el proceso de cultivo de tejidos de Anomatis se puede utilizar como explante la planta completa, incluyendo segmentos de tallo, yemas terminales, hojas, semillas. etc. , pero los diferentes tipos de explantes mostrarán ciertas diferencias cuando se inicien y tendrán un cierto impacto en el siguiente paso de proliferación. Wang Yaying et al. utilizaron segmentos de tallo, hojas y yemas adventicias de Anoectochilus como materiales para comparar los efectos de tres explantes sobre la inducción de callos. Los resultados mostraron que los tres explantes podían inducir callos con éxito, pero las yemas adventicias fueron el mejor explante para la inducción de callos [9]. Feng utilizó las hojas jóvenes de plántulas estériles de Anomatis como explantes y descubrió que la tasa de inducción de callos de las hojas era extremadamente baja y el período de diferenciación era largo, lo que dificultaba la formación de yemas adventicias en las etapas posteriores. La tasa de inducción del uso de segmentos de tallo (cortados en trozos pequeños de aproximadamente 2 mm de espesor) es superior al 60%, el ciclo de cultivo es corto y es adecuado para la producción a gran escala. Es la mejor opción para la rápida propagación de Anoectochilus [. 10]. Además, las semillas de Anoectochilus también se pueden utilizar como explantes para cultivo de tejidos. Las semillas de Anomatis yunnanensis utilizadas por Zhang Tie tienen una buena tasa de germinación en el medio Hyponex 1 sin hormonas, y los cormos originales pueden diferenciarse en plántulas fuertes después de agregar un 10% de jugo de coco [11]. Huang Huilian utilizó Knudson C como medio básico para realizar experimentos de germinación en semillas de Anoectochilus, y la tasa de germinación de las semillas podría alcanzar el 60% [12]. Por lo tanto, se puede ver a partir de los resultados anteriores que utilizando las semillas, hojas y segmentos de tallo de Anomatis como explantes, se estableció con éxito un sistema estéril de Anomatis, y también puede convertirse en plántulas en una etapa posterior. Sin embargo, en el proceso de producción a gran escala de plántulas de Anomatis, las yemas terminales y los tallos de Anomatis son los mejores materiales para explantes, que son fáciles de iniciar, se multiplican rápidamente y pueden mantener rasgos genéticos más consistentes de las plántulas cultivadas [65438
2 Investigación sobre difusión
Los métodos de proliferación comunes de las orquídeas incluyen la proliferación de protocormos, la proliferación de yemas en racimo, la proliferación de yemas adventicias, etc. , pero los diferentes métodos de proliferación también se ven afectados por diferentes factores. El proceso de proliferación se ve afectado principalmente por el tipo de hormona, el tipo de medio de cultivo, el tipo de explante, etc. Después de que las semillas de Anomatis germinan, forman protocormos. Los protocormos pueden convertirse directamente en plántulas, o se pueden producir callos a partir de los protocormos, y luego los callos pueden convertirse en células similares a protocormos y diferenciarse en plántulas. las células similares a protocormos [15]. Al mismo tiempo, Anomatis también puede formar yemas adventicias a través de segmentos de tallo o yemas terminales, y proliferar en forma de yemas agrupadas. Huang Huilian et al. germinaron protocormos a partir de semillas de Anomatis y agregaron 0,5 mg/L de 6-BA y 20 % de extracto de papa al medio Knudson C, y la tasa de plántula alcanzó el 51 % [12]. Además, Yang Baiyun comparó los efectos de tres reguladores del crecimiento de las plantas: TDZ, NAA y S-3307 (uniconazol) en la diferenciación de protocormos. El resultado fue TDZ > S-3307 (triazol diluido) >: NAA [16]. al. utilizaron segmentos de tallo de Anoectochilus silvestre como explantes y agregaron 6-BA 1,0 mg/L, 0,1 mg/L y 0,02 mg/L al medio básico MS, y la tasa de inducción de yemas fue la más alta.
Sin embargo, durante el período de diferenciación vegetativa, es aconsejable utilizar una combinación de hormonas de baja concentración para promover el engrosamiento del diámetro de las yemas y la diferenciación de tallos y hojas [17]. Hao Lili y otros descubrieron durante el proceso de proliferación de yemas axilares que Anoectochilus no era sensible al 6-BA, pero tenía un cierto efecto acumulativo durante el proceso de cultivo, entre los cuales ZT tenía el mejor efecto de proliferación [18]. Gao Yan y otros también descubrieron que Anoectochilus no era sensible al 6-BA. Cuando la concentración de 6-BA en el medio de cultivo alcanza 4 mg/L, todavía no hay brotes anormales, pero el 6-BA se acumulará durante el proceso de cultivo. Agregar una cierta cantidad de KT en el subcultivo puede promover la diferenciación y proliferación de. dispara [19]. Cuando Wu et al. aumentaron la dosis de 6-BA a 5,0 mg/L, la proliferación múltiple de yemas fue mayor, pero las yemas comenzaron a envejecer significativamente y el entrenudo se hizo más corto [20]. Meng et al. compararon 6-BA, KT y KT, pero encontraron que el efecto proliferativo de 6-BA era más fuerte que el de KT y KT. Las yemas inducidas por 6-BA son robustas y tienen entrenudos cortos, los entrenudos inducidos por KT son largos y los entrenudos inducidos por ZT tienen efectos intermedios [21]. En cuanto a los efectos de diferentes medios sobre la proliferación de Anoectochilus, Cao Tianxu encontró que en los medios VW y KC, el número de yemas diferenciadas de Anomatis era significativamente mayor que en los medios MS y B5, pero la calidad de las yemas era relativamente pobre y la tasa de plántula fue de Solo 4.6% (VW) y 65,438+04.3% (KC), y en medio B5, aunque solo se formaron 65,438+05.9 yemas, la calidad de las yemas fue pobre. La altura de la planta en los medios B5 y MS fue mayor que en los medios VW y KC [22]. Además, bajo el mismo medio de cultivo, debido a los diferentes explantes seleccionados cuando se inicia Anomatis, los efectos serán bastante diferentes en las etapas de inducción y proliferación de las yemas del racimo. Song et al. utilizaron nudos del tallo de Anoectochilus como explantes para el cultivo de proliferación, y el coeficiente de proliferación fue de 4,8. La punta del brote se utilizó como explante para el cultivo de proliferación, y el coeficiente de proliferación fue de 2,7. La eficiencia de inducir yemas agrupadas en los nudos del tallo fue significativamente mayor que en la punta del brote [23].