¿Cuál es el propósito de incrustar al hacer rebanadas?
Incrustación: La finalidad es potenciar la dureza de los materiales tisulares y facilitar el seccionamiento. Los agentes de inclusión comúnmente utilizados incluyen parafina, resina, etc.
Proceso de producción de secciones congeladas
1. Fijación del tejido: Fijar el tejido fresco en fijador durante más de 24 horas, retirar el tejido del fijador y alisar el tejido objetivo con un bisturí.
2. Deshidratación: Poner el tejido cortado en una solución de sacarosa al 15%, luego transferir a una solución de sacarosa al 30%, deshidratar y sumergir en un refrigerador a 4°C.
3. Inclusión de OCT: saque el tejido deshidratado, use papel de filtro para absorber ligeramente la humedad de la superficie y luego colóquelo en la etapa de inclusión con la superficie cortada hacia arriba. Deje caer el agente de inclusión de OCT alrededor del tejido. para incrustarlo, coloque la muestra en la mesa de congelación rápida de un micrótomo de congelación para congelarla e incrustarla rápidamente, y córtela después de que la OCT se vuelva blanca y dura.
El tejido fresco se congela directamente sin fijación ni deshidratación. El tejido objetivo se alisa directamente con un bisturí y se incrusta con un agente de inclusión OCT.
4. Rebanado: Fije la plataforma de inclusión en el microtomo, primero corte la superficie del tejido en trozos grandes y luego córtelo en rodajas con un espesor de 8-10 μm. Coloque el portaobjetos de vidrio limpio sobre el corte. Para seccionar, coloque el tejido en un portaobjetos de vidrio. Pegar la película con etiquetas y almacenar a -20°C para su uso posterior.
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