Cómo preparar una solución de clorhidrato de porfirina
Disolver 1, 1 g de hemo o protoporfirina en 20 mL de solución de ácido acético glacial saturado con ácido bromhídrico, dejar a temperatura ambiente por 24 horas, filtrar y utilizar 10 ml de hidróxido de sodio. Ajustar el pH del filtrado a 6 para precipitar, filtrar, lavar con agua tres veces y secar en un secador de vacío para obtener hematoporfirina cruda. Añadir 50 ml de solución de ácido clorhídrico en metanol a 1 g de hematoporfirina cruda, refluir en un baño de agua durante 15 minutos, enfriar, neutralizar con 1 solución de carbonato de amonio hasta precipitación y lavar con agua tres veces para obtener cristales de color marrón rojizo. Después de secar el cristal, se disuelve en cloroformo y luego se pasa a través de una columna de cromatografía de alúmina neutra de 100 g, se eluye con cloroformo:éter de petróleo (9:1) y se separa el eluido del éster metílico de hematoporfirina. Después de la evaporación del disolvente, el residuo se cristalizó dos veces con cloroformo y éter de petróleo para obtener éster metílico de hematoporfirina. Añadir 20 ml de solución de hidróxido de sodio de alcohol 5-etílico al éster metílico, refluir en un baño de agua durante 10 minutos, enfriar, filtrar y separar el precipitado. Disolver el precipitado en 50 ml de agua y ajustar el pH a 6 con ácido acético diluido para precipitar la hematoporfirina. Filtrar, lavar el precipitado con agua hasta neutralidad y secar para obtener el producto terminado de hematoporfirina.