Nucleasa antisentido

Cech et al. descubrieron que el precursor del ARN ribosómico de Tetrahymena puede escindirse con precisión en fragmentos y volver a unirse a ellos durante la maduración. Este tipo de ARN con actividad enzimática se llama ribozima [11, 12].

Las ribozimas se encuentran ampliamente en las células biológicas y tienen dos estructuras: en forma de cabeza de martillo y en forma de horquilla. El centro activo de la enzima consta de dos brazos y una región funcional en el medio [13]. Las secuencias de los dos brazos están altamente conservadas. Son específicamente complementarias al ARN diana y son equivalentes a un ARN antisentido. La región funcional puede descomponer y digerir el ARN diana degradando el enlace fosfodiéster del propio ARN. el proceso de acción. La molécula de escisión de ribozima está formada por una estructura espacial estricta, y el sitio de escisión siempre está ubicado en el extremo 3' del triplete GUX (X: C, U, A) en la molécula de ARN objetivo [12].

Las ribozimas no sólo son naturales sino también sintéticas. Con base en el sitio de acción de la ribozima, la secuencia que rodea al ARNm objetivo y la secuencia altamente conservada de la ribozima misma, es fácil diseñar y sintetizar artificialmente una secuencia específica de la ribozima. Además, el gen que codifica la ribozima se clona aguas abajo de un promotor como SP6 o T7 mediante ingeniería genética, y se transcribe la ribozima requerida. Las ribozimas pueden escindir específicamente moléculas de ARNA, lo que permite bloquear la expresión genética, especialmente la expresión de genes dañinos. Si se conoce la posición del triplete GUX en el ARNm diana, el gen codificante de ribozima se puede insertar en la posición apropiada del vector de expresión antisentido, de modo que el ARN antisentido transcrito que contiene la ribozima tiene funciones duales: por un lado, tiene un efecto inhibidor antisentido, por otro lado, tiene un efecto catalítico en la escisión del ARNm objetivo. Las ribozimas tienen perspectivas muy atractivas en aplicaciones antitumorales y antivirales. Se aprueba el primer protocolo clínico que utiliza ribozimas para la terapia génica del VIH. Como fármaco de información genética, las ribozimas recibirán cada vez más atención en la terapia génica tumoral.