La sustancia comúnmente utilizada para marcar antígenos o anticuerpos en el inmunoensayo enzimático quimioluminiscente es ().

En el punto A, el éster de acridinio es un agente luminiscente de marcado directo comúnmente utilizado. Para BD, los inmunoensayos enzimáticos quimioluminiscentes suelen utilizar peroxidasa de rábano picante y fosfatasa alcalina. El agente luminiscente catalizado por la peroxidasa de rábano picante es el luminol y sus derivados el sustrato luminiscente catalizado por la fosfatasa alcalina es el AMPPD. El punto c, la bipiridina de rutenio es un agente electroquimioluminiscente. El elemento E, 4-MUP (fosfato de 4-metilumbeliferona) es el sustrato fluorescente para la reacción de la fosfatasa alcalina. El luminol se utiliza a menudo para marcar antígenos o anticuerpos en inmunoensayos enzimáticos quimioluminiscentes.