¿Cómo se cultiva Cordyceps militaris?
El propósito del cultivo es recibir cuerpos fructíferos, y el cultivar producido anteriormente en condiciones de oscuridad es su micelio. Si las especies cultivadas continúan cultivándose en condiciones adecuadas, como la luz, los cuerpos fructíferos se pueden diferenciar y cultivar en medios sólidos o líquidos. Sin embargo, el rendimiento no puede satisfacer las necesidades de las personas, por lo que las especies cultivadas se utilizan para ampliar aún más la producción. reproducción, utilizando pupas de gusanos de seda y crías de 2 estadios. Se utilizaron gusanos de seda y técnicas mixtas para cultivar Cordyceps militaris.
(1) Utilice crisálida de gusano de seda como medio para cultivar Cordyceps militaris. La crisálida de gusano de seda se puede comprar en crisálidas de morera o tussah disponibles comercialmente. Es necesario desinfectar la superficie de las pupas. Utilice 75 % de alcohol, 0,3 % de permanganato de potasio o 0,1 % de New Cleaner. Después de la desinfección, séquelo con una gasa esterilizada y colóquelo en una sala de inoculación esterilizada. Utilice los siguientes métodos para inocular bacterias. Para las bacterias sólidas, utilice el método del bloque de micelio. Utilice un bisturí estéril para cortar suavemente una pequeña abertura en la membrana intersegmentaria del cuerpo de la pupa. Luego, tome un trozo de micelio del tamaño de un grano de arroz y métalo en el orificio cortado. sellarlo y ponerlo en una lata, envolver la boca superior con papel kraft para cultivo. Las cepas líquidas se pueden inyectar mediante inyección. Utilice una jeringa esterilizada para absorber las cepas líquidas e inyéctelas en la membrana intersegmentaria del cuerpo de la pupa en secuencia, inyectando de 0,2 a 0,5 ml en cada pupa. Luego colóquelo en una botella esterilizada y séllelo con papel kraft para cultivo. Además, también se puede utilizar el método de pulverización. Coloque las pupas esterilizadas en la superficie del cuerpo en una botella esterilizada y rocíe la solución bacteriana sobre las pupas dos veces al día durante 3 días consecutivos. Cubra la boca de la botella con una película plástica limpia y cultivo.
Si no utiliza latas y cultivo directamente en la sala de cultivo, debe desinfectar la sala de cultivo con antelación. Puede utilizar una solución de permanganato de potasio al 0,5 % o una solución de Lysol al 3 % para rociar los suelos, las paredes y las paredes interiores. desinfectar espacios. Antes de plantar, espolvoree una capa de cal seca en polvo en el suelo para evitar exponer el suelo. Además, prepare tierra de cultivo esterilizada: mezcle 50% de tierra no contaminada a 55 cm de profundidad debajo del huerto y 50% de arena fina de río, y mézclela y desinféctela con una solución acuosa de permanganato de potasio al 0,1% para que la humedad alcance entre 60% y 65ºC. % %, es mejor mantenerlo formando una bola y dispersarlo cuando se deja caer desde una altura de 1 metro. Al inocular, primero coloque una capa de película plástica en el suelo con un ancho de 1 metro y una longitud determinada por la longitud de la habitación. Deje aceras entre las películas y cubra las películas con tierra de cultivo de 2 cm de espesor. Luego poner las pupas remojadas en agua de cal al 1,5% durante 5 horas, esterilizadas y escurridas, y colocarlas horizontalmente sobre el suelo una a una a una distancia de 1 cm. Luego, puedes usar bacterias líquidas para cepillar uniformemente la pupa con un cepillo esterilizado, o usar un rociador pequeño esterilizado para rociar las bacterias líquidas sobre la pupa. El volumen de inóculo es de 1000 ml de cepa líquida, con la que se pueden inocular 10 kg de pupas. Después de la inoculación, cubra la superficie del cuerpo de la pupa con 1 a 2 cm de tierra, que es suficiente para cubrir el cuerpo de la pupa. Luego cubra el suelo con una película limpia para evitar infecciones bacterianas y el secado del suelo de cultivo. Para evitar que el viento abra la película, presione una piedra cada 33 cm alrededor de la película. Sin embargo, no debes presionar un círculo de tierra a su alrededor, porque provocará falta de oxígeno y las bacterias no crecerán o el vapor de agua generado por las bacterias no se descargará y fallará.
Mantener la habitación a oscuras durante el periodo de germinación. La temperatura inicial puede ser más baja, 10-15 ℃, y puede aumentarse a 20-25 ℃ después de unos días. Después de 40 días, si la superficie del suelo está cubierta de hifas blancas, significa que las pupas han sido completamente infectadas por Cordyceps militaris y han comenzado a entrar en la etapa de cultivo del cuerpo fructífero. En este momento, se debe quitar la película de arriba. La temperatura se controla entre 20 y 23 ℃. La humedad del aire está entre el 70% y el 80%, lo que se puede solucionar pulverizando agua limpia sobre la superficie del suelo y las paredes. Las puertas y ventanas deben abrirse adecuadamente para proporcionar ventilación y oxígeno, y agregar luz para estimular el crecimiento de la base a partir del suelo. Después de desenterrar la sub-base, la humedad del aire debe aumentarse entre un 80% y un 90%. En unos 10 días, el pedúnculo crecerá hasta unos 10 centímetros, con un diámetro de 1,5 a 4 milímetros, y estará maduro cuando la punta se vuelva negra. La recolección debe ser oportuna, comenzar desde todos los lados y extraer las pupas y los subasientos juntos sin romperlos. Enjuague con agua limpia y sol o seque en secadora.
(2) Utilice gusanos de seda de segundo estadio como medio de cultivo para cultivar Cordyceps militaris. Los gusanos de seda de segundo estadio generalmente miden de 3 a 5 centímetros de largo. Para evitar que gatee y sea dañado por ratas y hormigas. En la sala de cultivo se deben instalar algunos somieres de madera o hierro. Coloque un marco de madera que sea conveniente para el transporte, extienda una película limpia en el marco de madera y luego colóquelo en tierra de cultivo esterilizada. Luego coloque una capa de gusanos de seda jóvenes y rocíe la inoculación en el suelo, rocíe una vez cada 3 horas y rocíe 3 veces al día. Cubrir con film después de cada pulverización. Después de la tercera pulverización, cubra los gusanos de seda con tierra esterilizada, de aproximadamente 1 cm de espesor. Luego cubrir con film plástico. El manejo y la recolección de hongos son los mismos que los del cultivo de pupas.
(3) Cultivo medio mixto de Cordyceps militaris Existen muchas fórmulas de medios. Se elabora principalmente a partir de arroz y otros productos agrícolas y secundarios, con una pequeña cantidad de azúcar, oligoelementos y vitamina B añadidos.
Por ejemplo
Fórmula A: 93 % arroz, 2 % glucosa, 2 % peptona, 2,5 % polvo de crisálida de gusano de seda, 0,3 % citrato de amonio, 0,2 % sulfato de magnesio y una pequeña cantidad de vitamina B.
Fórmula B: 95% mijo, 3,5% glucosa (o sacarosa), 1,2% peptona, 0,1% dihidrógenofosfato de potasio, 0,2% sulfato de magnesio, además de trazas de vitamina B.
Fórmula C: 50% arroz, 45% arroz de sorgo, 2% sacarosa, 2% pupa de gusano de seda en polvo, 0,5% peptona, 0,1% dihidrógenofosfato de potasio, 0,4% sulfato de magnesio y trazas de vitamina B .
En la fórmula anterior, el arroz, el arroz de sorgo, etc. deben remojarse en agua durante 5 a 6 horas antes de su uso, luego sacarse y mezclarse con otros ingredientes. El contenido de agua es del 60% al 65%, el valor del pH es de 5 a 7 y se envasa en botellas de conserva de 500 ml. Agregue 2 cm para la altura (grosor). También puede utilizar las sustancias solubles en agua de la fórmula para preparar una solución nutritiva y remojar directamente el arroz y otros productos agrícolas y secundarios. También puedes preparar primero los productos agrícolas y secundarios, poner 30 gramos en cada botella y luego añadir 45 ml de solución nutritiva. Zhang Xianke, de la Universidad de Liaoning, utilizó diferentes materiales de cultivo para cultivar Cordyceps militaris y los resultados mostraron que el arroz era el mejor material de cultivo. El micelio crece rápidamente, los cuerpos fructíferos se producen y maduran temprano y el ciclo de crecimiento es corto, pero el rendimiento no es muy diferente del de otros productos agrícolas y secundarios. Diferentes regiones pueden elegir diferentes fórmulas según condiciones específicas, y la fórmula también se puede mejorar aún más en la práctica según las condiciones locales de la materia prima.
Esterilización e inoculación del medio de cultivo: Los frascos y frascos llenos se sellan con una película plástica de polipropileno resistente a alta presión y se esterilizan a alta presión durante 30 a 40 minutos. Si se utiliza presión normal: la esterilización se realizará. tardar de 4 a 6 horas. Después de la esterilización, espere a que el material de cultivo se enfríe por debajo de 25 °C y transfiéralo a una sala de inoculación limpia. Utilice una jeringa o pipeta estéril para aspirar el cultivo líquido. Transfiéralo rápidamente al medio de cultivo con una hendidura abierta en la boca del frasco e inyecte de 5 a 10 ml en cada frasco. Si se utiliza un cultivo sólido, utilice pinzas esterilizadas o una pala de inoculación para retirar el cultivo del frasco de cultivo y transferirlo al material de cultivo en un frasco nuevo. Una botella de especies cultivadas se puede trasladar a 20 a 30 botellas de especies cultivadas.
Los requisitos para el manejo del cultivo post-inoculación son los mismos que los dos anteriores, es necesario proteger de la luz la etapa inicial de germinación y cubrir el marco de madera o soporte de hierro donde se colocan los frascos de cultivo. con tela negra. La temperatura es de 15 a 20 ℃ Para acelerar el crecimiento del micelio después de 2 a 3 días, la temperatura se puede elevar a 20 a 25 ℃. El micelio se puede llenar con material de cultivo después de dos semanas. Después de 20 días, el denso micelio blanco completa el crecimiento vegetativo y comienza a entrar en la etapa de crecimiento y cambio de color. Durante este período, la temperatura debe controlarse entre 20 y 21 ° C y se debe proporcionar iluminación todos los días. Retire la tela negra y use luz natural durante el día, y use lámparas fluorescentes para aumentar la iluminación por la mañana y por la noche. El período de cambio de color es de 2 a 8 días. Después del cambio de color, no es necesario encender las luces por la noche. Inicie la aireación cuando aparezcan los primordios de la hierba en la botella. La humedad del aire interior aumenta del 60% al 65% al 80%. Después de que el cuerpo fructífero (hierba) crece hasta 1 cm, para reducir la evaporación del agua en el material, la humedad del aire debe aumentarse al 90%. Para aumentar la circulación de aire en la botella, se puede utilizar una aguja para perforar agujeros en la película selladora o aflojar la tapa de la botella varias veces para ventilar adecuadamente. Además, debido a que el cuerpo fructífero tiene una fuerte fototaxis, para evitar que caiga hacia un lado, la dirección de la botella se puede ajustar adecuadamente. Cuando el cuerpo fructífero crece de 5 a 8 cm, aparecen muchas espinas pequeñas en la superficie superior y producen un polvo amarillo que se puede cosechar.
Al cosechar, retirar la película selladora y sacar juntos los cuerpos fructíferos y el material de cultivo. Corta la raíz del cuerpo fructífero. Secar al aire libre, secar al sol o secar en secadora. Si se almacena, el contenido de humedad debe ser inferior al 9%. Al cosechar, si utiliza pinzas esterilizadas para quitar solo los cuerpos fructíferos, luego agrega aproximadamente de 3 a 5 ml de solución nutritiva o agua esterilizada a la botella, vuelve a atar la boca de la botella y continúa cultivando, los cuerpos fructíferos se formarán nuevamente en aproximadamente medio mes. Se necesitan aproximadamente 1 mes para cosechar otra cosecha de cuerpos fructíferos.